9外源基因表达产物的分离纯化 A重组蛋白分离纯化方法选择的基本原则 B离子交换层析 C凝胶层析 D亲和层析 E膜分离 F原核生物表达的重组蛋白质量检测

第四章 固相析出分离法 第五章 吸附法 第六章 离子交换法 第七章 凝胶层析 第八章 亲和层析 第九章 离心技术 第十章 膜分离技术 第十一章 制备型高效液相色谱

层析（chromatography） 原理：待分离蛋白质溶液（流动相）经过一个固态物 质（固定相）时，根据溶液中待分离的蛋白质颗粒大 小、电核多少及亲和力等，使待分离的蛋白质组分在 两相中反复分配，并以不同的速度流经固定相而达到 分离蛋白质的目的

本章重点： 一、荧光免疫试验的基本原理 二、间接免疫荧光试验 三、影响荧光免疫试验的主要因素 第一节 荧光免疫试验的组成要素 1. 荧光物质 2. 抗体 3. 抗原 4. 抗原抗体反应 5. 荧光显微镜 第二节 间接免疫荧光试验 第四节 其他荧光免疫检测试验 第五节 荧光免疫技术的应用 第六节 影响荧光免疫试验的主要因素 第二节 免疫层析试验 （immunochromatography） 第三节 免疫渗滤试验 （immunofiltrationassay, IFA） 第四节 斑点酶免疫吸附试验 （dot enzyme-linked immunosorbent assay, dot-ELISA） 第五节 免疫印迹试验 （immunoblotting test，IBT） 第六节 影响固相膜免疫试验的主要因素 第七节 固相膜免疫分析技术的临床应用 小结： • 免疫层析试验 • 免疫渗滤试验 • 斑点酶免疫吸附试验 • 免疫印迹试验 • 影响固相免疫试验的主要因素 • 免疫荧光技术在医学中的应用

实验室一些常用知识介绍 3 实验一：离子交换法分离氨基酸 7 实验二：垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质 9 实验三：马铃薯多酚氧化酶制备及性质实验13 实验四：碱性蛋白酶活力的测定 16 实验五: 植物组织中 DNA 和 RNA 的提取和鉴定 19 实验六：糖酵解中间产物的鉴定22 实验七：综合设计实验—蛋白质的制备及其含量测定24 实验八：还原糖和总糖的测定（3，5-二硝基水杨酸法） 35 实验九：发酵过程中无机磷的利用37 实验十：氨基酸的分离鉴定—纸层析法39 实验十一：细菌血栓溶解酶活性测定41 实验十二：可溶性糖的硅胶 G 薄层层析43 实验十三：植物材料中总黄酮的提纯与鉴定44 实验十四 ： IEF/SDS-PAGE双向电泳分离鉴定蛋白质

1. 绪论 2. 生物大分子的制备 3. 层析技术 4. 电泳技术

一、实验目的 1、了解色谱法分离提纯有机化合物的基本原理和应用。 2、掌握柱层析、薄层层析的操作技术

离子交换 柱色谱 薄层色谱 纸上层析 沉淀分离 溶剂萃取 微波萃取 固相萃取 超临界萃取 加速溶剂萃取 离子色谱 毛细管电泳 联用技术

生化大实验是一门综合性的实验课程，教学的目的在于通过对生命物质的分离制备，纯化，分析等综合性实验，在已掌握的基础生物化学理论知识和生化实验常用方法的基本原理、基本操作技术（如滴定、比色、层析、电泳等）的基础上，训练学生的综合实践动手能力，掌握蛋白质、酶、核酸等重要物质的分离、纯化等的测定技术。实验一蛋白质含量的测定实验二离子交换法血清纯化IgG实验三离子交换层析法分离血清白蛋白实验四SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定分子量实验五等电聚焦法测定样品的等电点实验六质粒的分离与纯化实验七PCR扩增目的基因片段实验八酶联免疫吸附实验

一、概述 ·定义——也称色谱层析、色谱、色层;样品中各组成依据其 在固定相与流动相之间作用行为的差别进行多次分离的过程。 ·特点——分离精度高、适用范围广、设备简单、操作方便; 处理量小、间歇操作等 ·发展史——1903年一位俄国植物学家首次提出。1931年首 次应用于制备;1938年适用范围扩展至无色物质;…