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本课程的目的是,通过本课程的学习,使学生对生物工程相关药物的研制原理、生产工 艺及分离纯化技术有全面的认识与掌握
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载体必备条件: 1.是一个复制子; 2.载体在受体细胞中能大量繁殖,其携带的外源基因才能在受体细胞中得到大量扩增; 3.有1到几个限制内切酶的单一识别与切割位点,便于外源基因的插入; 4.具有选择性的遗传标记(如抗生素抗性标记等)以此知道它是否已进入受体细胞,并据此标记将受体细胞从其他细胞中分离出来
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主要内容和要求:以蛋白质分离纯化为例 介绍生物大分子分离纯化的一般步骤和注意事 项;介绍层析技术、电泳技术、离心技术的原 理及其应用;总结蛋白质、核酸、酶、氨基酸 测定的主要方法
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目录 一、农药分析取样与分离 二、农药的分离与纯化方法 三、商品农药的一般分析方法 四、气相色谱技术 五、薄层分析、酶抑制技术和荧光技术 六、免疫学检测方法 七、超临界流体萃取技术 八、手性拆分与毛细管电泳
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第一节、实验室规则及安全防护 一、实验室规则 二、实验室安全防护 第二节、分子生物学常用研究技术 一、核酸分离纯化 二、聚合酶链反应技术 三、分子杂交技术 四、分子克隆技术 五、其它新技术 第三节、常用仪器使用 一、离心机 二、分光光度计 三、PCR 仪 第四节、如何撰写实验报告 第五节 核酸分离纯化技术 实验一、基因组 DNA 的提取制备与检测 实验二、总 RNA 的提取制备与检测 实验三、质粒 DNA 的提取制备与检测 第六节 PCR 技术 实验四、常规 PCR 技术 实验五、定量 PCR 技术 第七节 分子克隆技术 实验六、DNA 的限制性酶切与电泳 实验七、凝胶中 DNA 片断的纯化回收 实验八、DNA 连接实验 实验九、感受态细胞的制备 实验十、重组 DNA 转化与篮白斑筛选 第八节 分子杂交技术 实验十一、Southern 印迹杂交 实验十二、Northern 印迹杂交 实验十三、Western 印迹 实验十四、核酸原位杂交 第九节 综合性实验 实验十五、蛋白质双向电泳 实验十六、酵母双杂交实验 实验十七、RNA 干扰实验
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从20世纪中叶开始,分子生物学研究得到高速发展,主要原因之一是研究方法,特别是基因操作和基因工程技术的进步。一、DNA操作技术 二、基因克隆的常用载体系统 三、基因的分离与鉴定
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第一章微生物检验基本知识 包括显微镜、染色技术、培养基制备技术、接种、分离纯化和培养技术等。 接种、分离纯化和培养技术 、接种 将微生物接到适于它生长繁殖的人工培养基上或活的生物体内的过程叫做接种。 1、接种工具和方法
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超临界流体色谱 1962年Klesper发表“用超临界的二氯二氟甲烷、二氯 一氟甲烷等分离镍卟啉异构体”的第一篇超临界色谱 论文。 1981年Novotny和Lee首次报道了毛细管超临界色谱技 术。 但1990s开始淡出仪器领域
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采用均匀法进行室内实验设计,研究絮凝剂单耗、絮凝剂溶液浓度和给料浓度三因素对固液分离技术中沉降速度和沉降浓度的影响.对实验数据进行回归分析后认为,各因素对沉降速度的影响程度从大到小为:给料浓度 > 絮凝剂单耗 > 絮凝剂溶液浓度.沉降速度与絮凝剂单耗、絮凝剂溶液浓度正相关,与给料浓度负相关;对沉降浆体浓度影响程度从大到小为:给料浓度 > 絮凝剂单耗 > 絮凝剂溶液浓度.沉降浓度与絮凝剂单耗、给料浓度正相关,与絮凝剂溶液浓度基本无关.利用非线性规划寻找最优配比,预测值与验证实验的实测值误差小于8%.推荐的深锥浓密机运行参数为絮凝剂单耗5 g·t-1,絮凝剂溶液浓度0.05%,给料浓度5.233%
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概论 随着科技发展,“膜”这个新名词越来越多的在各个方面出现,看起来它是一层极薄的薄片,但它威力之大,很难想象。 生命活动中一系列现象,能量转换,细胞识别,物质传输与药物作用无一 不与生物膜的功能有关。 膜的定义:在一种流体相内或两种流体相之间有一薄层凝聚相物质把流体 相分隔成两部分,这一薄层物质就是膜,这一作为凝聚相的膜可以是固态的, 或液态的;流体相可以是液态的,也可以是气态的。膜本身可以是均匀的一 相,也可以是由两相以上的凝聚态物质构成的复合体
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