Restriction enzymes are used for cutting DNA at precise locations Vectors are used for the propagation of cloned DNA fragments Libraries of cloned DNA fragments allow searching for a specific DNA fragment

内容与学习要求 结合前面对DNA代谢的学习，补充介绍DNA损伤修复的知识 内容 学习要求 了解DNA修复的相关知识，了解DNA损伤修复重要意义和研究进 展

Although DNA replication, repair, homologous recombination occur with high fidelity to ensure the genome identity between generations, there are genetic processes that rearrange DNA sequences and thus lead to a more dynamic genome structure Two classes of genetic recombination for DNA rearrangement: • Conservative site-specific recombination (CSSR): recombination between two defined sequence elements • Transpositional recombination (Transposition): recombination between specific sequences and nonspecific DNA sites

DNA复制概述 an overview 复制子(Replicons):以单一单位复制的任一段DNA 称为复制子,在单个复制子内部,DNA复制从起始点开始复制,通常复制叉从起始点(origin)两个方 向进行复制,随着双链的解链模板被复制直至终点 (terminus) 每个复制子使用一次,并且在每个细胞周期中只使 用一次。原核基因组中只含一个复制子,细菌染色体本身就是一个最大的复制子

Chapter 25 DNA Metabolism 1. How does a DNA molecule replicate with high fidelity? 2. How are DNA lesions (damages)repaired to maintain the integrity of genetic information? 3. How do DNA molecules recombine (rearrange)? High accuracy, multitude of participants

一、在DNA指导下RNA的合成转录 转录--生物体以DNA为模板合成RNA的过程,转录所需的酶叫RNA聚合酶(依赖DNA的RNA聚合酶)复制和转录的异同点 3相同点:1.都以DNA为模板 2.原料为核苷酸 3.合成方向均为5′→3′方向 4.都需要依赖DNA的聚合酶 5.遵守碱基互补配对规律 6.产物为多聚核苷酸链

第一节 概 述 第二节 从植物组织提取基因组 DNA 第三节 从动物组织提取基因组 DNA 第四节 细菌基因组 DNA 的制备 第五节 基因组 DNA 的检测

第三节 DNA重组技术过程 1、制备目的基因和相关载体 2、将目的基因和有关载体进行连接 3、将重组本DNA导入受体细胞 4、DNA重组体的筛选和鉴定 5、DNA重组体的扩增、表达和其他研究 第五节 利用重组DNA技术可对基因进行改造 第六节 克隆基因在适当宿主细胞内表达

一、概述 二、限制性内切核酸酶 1、限制性核酸内切酶的分类 2、限制性核酸内切酶的命名原则 3、限制性核酸内切酶的基本特征 4、影响限制性内切酶的活性因素 5、限制性核酸内切酶的应用 三、DNA连接酶 1、DNA连接酶的基本特性 2、DNA片段的连接方式 3、影响连接反应的因素 四、其他工具酶 1、DNA聚合酶 2、DNA及RNA的修饰酶 3、核酸酶

• 基因工程 ( genetic engineering)、基因 克隆、DNA重组、DNA克隆、分子克隆 • 克隆（clone） 无性繁殖 – 应用酶学的方法，在体外将目的基因与载体 DNA结合成一具有自我复制能力的DNA分 子（复制子、重组体），继而通过转化或转 染宿主细胞、筛选出含有目的基因的转化子 细胞，再进行扩增、提取获得大量同一DNA 分子拷贝，或其表达产物