南京发业大学NANJINGAGRICULTURALUNIVERSITY实验一动物免疫和多克隆抗体的制备蔺辉星123089182@qq.com逸夫楼4049
NANJING AGRICULTURAL UNIVERSITY 实验一 动物免疫和 多克隆抗体的制备 蔺辉星 123089182@qq.com 逸夫楼4049
南京发业大学NANJING AGRICULTURALUNIVERSITY注意事项·注意安全，防止人身和设备事故的发生；：穿实验服，不要在实验室内饮食；·未经允许不要接触仪器、细菌培养物、试剂、动物等；·不得将实验室物品带出实验室；·实验完毕，应清理实验场地，并将仪器放还原位·独立完成实验报告，不得抄袭
NANJING AGRICULTURAL UNIVERSITY • 注意安全，防止人身和设备事故的发生； • 穿实验服，不要在实验室内饮食； • 未经允许不要接触仪器、细菌培养物、试剂、动物等； • 不得将实验室物品带出实验室； • 实验完毕，应清理实验场地，并将仪器放还原位； • 独立完成实验报告，不得抄袭。 注意事项
南京发业大学NANJINGAGRICULTURALUNIVERSITY实验报告·实验目的及原理·实验材料·实验步骤·注意事项·实验结果及分析·思考题
NANJING AGRICULTURAL UNIVERSITY • 实验目的及原理 • 实验材料 • 实验步骤 • 注意事项 • 实验结果及分析 • 思考题 实验报告
南京发业大学NANJING AGRICULTURALUNIVERSITY基本概念常见的两种人工制备抗体>多克隆抗体：采用传统免疫方法，抗原物质经不同途径注入动物体内，经数次免疫后采取动物血液，分离血清而获得的抗体。>单克隆抗体：指由一个B细胞分化增殖的子代细胞（浆细胞）产生的针对单一抗原决定簇的抗体
NANJING AGRICULTURAL UNIVERSITY 常见的两种人工制备抗体 ➢多克隆抗体： 采用传统免疫方法，抗原物质经不同途径注入动物体内， 经数次免疫后采取动物血液，分离血清而获得的抗体。 ➢单克隆抗体： 指由一个B细胞分化增殖的子代细胞（浆细胞）产生的 针对单一抗原决定簇的抗体。 基本概念
南京发业大学NANJING AGRICULTURAL UNIVERSITY多克隆抗体antigen将制备好的抗原按照一定的免疫程序接种给实验动物，Bcells该动物在含有多种抗原表位的抗原刺激下，体内多个B细胞克隆被激活并产生针对多种不同表位的抗体，所有这些抗体统称为多克隆抗体
NANJING AGRICULTURAL UNIVERSITY 将制备好的抗原按照一定 的免疫程序接种给实验动物， 该动物在含有多种抗原表位的 抗原刺激下，体内多个B细胞 克隆被激活并产生针对多种不 同表位的抗体，所有这些抗体 统称为多克隆抗体。 多克隆抗体
南京发业大学NANJINGAGRICULTURALUNIVERSITY多抗与单抗的区别性质单克隆抗体多克隆抗体多抗原无关的Ig少或几乎无少，培养物上清常有10%的有其它血清蛋白胎牛血清免疫原中的一种成分的一个Ag-Ab结合全部抗原决定簇抗原决定簇无变化特异性亲和力的重复性不同批号间有变化与带有共同抗原决定簇的抗原有无与其它抗原的交叉反应部分交叉免疫球蛋白的种类与亚类完全是混合的只是一种或几种
NANJING AGRICULTURAL UNIVERSITY 多抗与单抗的区别 性 质 多克隆抗体 单克隆抗体 抗原无关的Ig 多 少或几乎无 其它血清蛋白 有 少，培养物上清常有10％的 胎牛血清 Ag-Ab结合 全部抗原决定簇 免疫原中的一种成分的一个 抗原决定簇 特异性亲和力的重复性 不同批号间有变化 无变化 与其它抗原的交叉反应 与带有共同抗原决定簇的抗原有 部分交叉 无 免疫球蛋白的种类与亚类 完全是混合的 只是一种或几种
南京发业大学NANJING AGRICULTURALUNIVERSITY多克隆抗体制备的基本过程·抗原制备·动物免疫L·血清分离与保存·测定抗体效价·抗体纯化与标记
NANJING AGRICULTURAL UNIVERSITY • 抗原制备 • 动物免疫 • 血清分离与保存 • 测定抗体效价 • 抗体纯化与标记 多克隆抗体制备的基本过程
南京发业大学NANJING AGRICULTURALUNIVERSITY抗原（灭活疫苗）的制备细菌培养（对数生长期前期的细菌悬液）灭活农医药便西［2006]】196号兽（常用甲醛，终浓度为0.3~0.8%）猪链球菌病灭活疫2型.HA9801袜【性状】本品静置后滑明消体，下层为活菌检测（用造步用单工机内月教双上的健康只，不免大小格国送抢是马有效期12-8C保春，看效期为12全月1广东永顺生物湖药股份有限公司5399投线：020-32加佐剂乳化
NANJING AGRICULTURAL UNIVERSITY 细菌培养 （对数生长期前期的细菌悬液） 灭活 （常用甲醛，终浓度为0.3~0.8%） 活菌检测 加佐剂乳化 抗原（灭活疫苗）的制备
南京发业大学NANJING AGRICULTURALUNIVERSITY免疫佐剂J(Immunoadjuvant)先于抗原或与抗原同时注入动物体内，非异性的改变或增强机体对抗原的特异性免疫应答，发挥辅助作用的物质。常见佐剂：·铝盐类佐剂：氢氧化铝、磷酸铝·油佐剂：白油佐剂；弗氏完全佐剂；弗氏不完全佐剂；ISA206佐剂（法国Seppic）·微生物及其代谢产物佐剂（卡介苗BCG）·细胞因子佐剂·蜂胶佐剂
NANJING AGRICULTURAL UNIVERSITY 先于抗原或与抗原同时注入动物体内，非异性的改变或 增强机体对抗原的特异性免疫应答，发挥辅助作用的物质。 常见佐剂： • 铝盐类佐剂：氢氧化铝、磷酸铝 • 油佐剂：白油佐剂；弗氏完全佐剂；弗氏不完全佐剂； ISA206佐剂（法国Seppic） • 微生物及其代谢产物佐剂（卡介苗BCG） • 细胞因子佐剂 • 蜂胶佐剂 免疫佐剂（Immunoadjuvant）
南京发业大学NANJING AGRICULTURALUNIVERSITY免疫方法常用注射方法*足底注射·皮下注射肌肉注射*注射到皮下组织内静脉注射·皮内注射腹腔注射注入表皮与真皮之间*其他免疫方式*口服*浸泡*粘膜
NANJING AGRICULTURAL UNIVERSITY 常用注射方法 • 皮下注射 注射到皮下组织内 • 皮内注射 注入表皮与真皮之间 免疫方法 足底注射 肌肉注射 静脉注射 腹腔注射 其他免疫方式 口服 浸泡 粘膜