细胞培养基本技术
细胞培养基本技术
细胞培养的基本概念 原代培养 取自体内新鲜组织并置于体外条件下生长的细胞 在传代之前称为原代培养。 传代培养: 细胞在培养器皿中生长一定时间后,被分开接种 到新的培养器皿中
细胞培养的基本概念 ◼ 原代培养： 取自体内新鲜组织并置于体外条件下生长的细胞 在传代之前称为原代培养。 传代培养： 细胞在培养器皿中生长一定时间后，被分开接种 到新的培养器皿中
细胞培养:使用单个细胞悬液 组织培养:使用组织块(O.5~1立方毫米)或 薄片(厚0.2毫米)在固定或悬浮状态下培养 ■器官培养:使用器官原基或器官的一部分或整 个器宫
◼ 细胞培养：使用单个细胞悬液 ◼ 组织培养：使用组织块（O.5～1立方毫米）或 薄片（厚0.2 毫米）在固定或悬浮状态下培养 ◼ 器官培养：使用器官原基或器官的一部分或整 个器宫
原代培养细胞的生命归宿 原代培养期 传代期 ■衰退期
原代培养细胞的生命归宿 ◼ 原代培养期 ◼ 传代期 ◼ 衰退期
初代 无限细胞系 培养 们限细抱系 指数细胞数量 18 6 转化 老化 121接 第‘次传 t0养代 传代间隔 死匚 8 传代 图54培养细胞的生命期
有限细胞系 无限细胞系 细胞系( cell line) 细胞株( cell strain)
◼ 有限细胞系 ◼ 无限细胞系 ◼ 细胞系 (cell line) ◼ 细胞株 (cell strain)
培养细胞的特性 培养细胞的生长方式 贴附生长: 必须贴附于支持物表面才能生长。见于各种实体 瘤细胞 悬浮生长: 于悬浮状态下即可生长,不需要贴附于支持物表 面。见于各种造血系统肿瘤细胞
培养细胞的特性 ◼ 培养细胞的生长方式 ◼ 贴附生长： 必须贴附于支持物表面才能生长。见于各种实体 瘤细胞。 ◼ 悬浮生长： 于悬浮状态下即可生长，不需要贴附于支持物表 面。见于各种造血系统肿瘤细胞
每代贴附生长细胞的生长过程 游离期 贴壁期 潜伏期 对数生长期 停止期(平台期)
每代贴附生长细胞的生长过程 ◼ 游离期 ◼ 贴壁期 ◼ 潜伏期 ◼ 对数生长期 ◼ 停止期（平台期）
游离期 细胞接种后在培养液中呈悬浮状态.也称悬浮 期。此时细胞质回缩,胞体呈圆球形 10分钟—4小时
◼ 游离期： ◼ 细胞接种后在培养液中呈悬浮 状态．也称悬浮 期。此时细胞质回缩，胞体呈圆球形。 ◼ 10分钟一4小时
贴壁期: 细胞附着于底物上,游离期结束。细胞株平均在10分钟一4 小时贴壁。 底物:胶原、玻璃、塑料、其它细胞等 血清中有促使细胞贴壁的冷析球蛋白和纤粘素、胶原等糖蛋 白(生长基质),这些带正电荷的糖蛋白的促贴壁因子先吸附于 底物上,悬浮细胞再与吸附有促贴壁因子的附着 进口塑料培养瓶涂有生长基质(化学合成的功能基团)
◼ 贴壁期： ◼ 细胞附着于底物上，游离期结束。细胞株平均在10分钟一4 小时贴壁。 ◼ 底物：胶原、玻璃、塑料、其它细胞等 ◼ 血清中有促使细胞贴壁的冷析球蛋白和纤粘素、胶原等糖蛋 白（生长基质），这些带正电荷的糖蛋白的促贴壁因子先吸附于 底物上，悬浮细胞再与吸附有促贴壁因子的附着。 ◼ 进口塑料培养瓶涂有生长基质（化学合成的功能基团）