华京理工式辱·物工程院 发酵工程精品课程 ② http://biotech.ecust.educn/ipkc/figc
发酵工程精品课程 http://biotech.ecust.edu.cn/jpkc/fjgc 华东理工大学·生物工程学院
亮型程培慕 令动物细廳焙养 第二节动物细胞培养 http://biotech.ecust.educn/jpkc/figc
http://biotech.ecust.edu.cn/jpkc/fjgc 第二节 动物细胞培养 典型过程培养 ❖动物细胞培养
亮型程培慕 令物细廳养 动物细胞和微生物细胞的总体差异 内容 微生物细胞 动物细胞 细胞壁 普遍存在 存在 生长速率 0.1~0.5h1 0.01~005h1 需氧量 低 营养要求 普遍简单 复杂 co2需求 一些微生物需CO2许多需要CO2形成缓 冲液 环境影响 大 大小范围 100~2000nm 10000~100000nm 接种浓度 低高(105m1) 生长浓度 高(109~1010m1)低(106m1) http://biotech.ecust.educn/jpkc/figc
http://biotech.ecust.edu.cn/jpkc/fjgc 动物细胞和微生物细胞的总体差异 内容 微生物细胞 动物细胞 细胞壁 普遍存在 存在 生长速率 0.1~0.5h-1 0.01~0.05h-1 需氧量 高 低 营养要求 普遍简单 复杂 CO2需求 一些微生物需CO2 许多需要CO2形成缓 冲液 环境影响 小 大 大小范围 100~2000nm 10000~100000nm 接种浓度 低 高（10-5.ml-1） 生长浓度 高（109~1010.ml-1） 低（106.ml-1） 典型过程培养 ❖动物细胞培养
亮型程培慕 令动物细廳焙养 、动物细胞培养的特性 动物细胞培养是指在合适的培养条件下, 动物细胞离体生长和增殖,并保持其特性 和功能的技术,这些细胞不再形成组织。 http://biotech.ecust.educn/jpkc/figc
http://biotech.ecust.edu.cn/jpkc/fjgc 一、动物细胞培养的特性 动物细胞培养是指在合适的培养条件下， 动物细胞离体生长和增殖，并保持其特性 和功能的技术，这些细胞不再形成组织。 典型过程培养 ❖动物细胞培养
亮型程培慕 令动物细廳焙养 1细胞生长缓慢,易污染,培养需用抗生素 2细胞大,无细胞壁,机械强度低,环境适应性差 3需氧少,不耐受强力通风与搅拌 4群体生长效应,贴壁生长(锚地依赖性) 5培养过程产品分布细胞内外,成本高 6原代培养细胞一般繁殖50代即退化死亡 http://biotech.ecust.educn/jpkc/figc
http://biotech.ecust.edu.cn/jpkc/fjgc 1 细胞生长缓慢，易污染，培养需用抗生素 2 细胞大，无细胞壁，机械强度低，环境适应性差 3 需氧少，不耐受强力通风与搅拌 4 群体生长效应，贴壁生长（锚地依赖性） 5 培养过程产品分布细胞内外，成本高 6 原代培养细胞一般繁殖50代即退化死亡 典型过程培养 ❖动物细胞培养
亮型程培慕 令动物细廳焙养 两个专业术语 细胞系:首次分离组织的培养称之为原代培 养。原代培养物经传代成功后即成细胞系。 细胞株:通过选择法或克隆形成法从原代培 养物或细胞系中获得的具有特殊性质或标记 的培养物称为细胞株。 http://biotech.ecust.educn/jpkc/figc
http://biotech.ecust.edu.cn/jpkc/fjgc 两个专业术语 细胞系：首次分离组织的培养称之为原代培 养。原代培养物经传代成功后即成细胞系。 细胞株：通过选择法或克隆形成法从原代培 养物或细胞系中获得的具有特殊性质或标记 的培养物称为细胞株。 典型过程培养 ❖动物细胞培养
亮型程培慕 令动物细廳焙养 细胞生长的类型 贴壁依赖性来自动物实体组织的大多数细胞需 要贴壁单层生长。只要它们没有转化为非贴壁 依赖性的必须贴伏在合适的固体介质上并铺展 才能生长。 非贴壁依赖性细胞无需贴附到固体介质上就能 生存和生长的细胞。来自血液、淋巴系统的细 胞和大多数肿瘤细胞常为非贴壁依赖性的,它 们形态呈圆形。 http://biotech.ecust.educn/jpkc/figc
http://biotech.ecust.edu.cn/jpkc/fjgc 细胞生长的类型 贴壁依赖性来自动物实体组织的大多数细胞需 要贴壁单层生长。只要它们没有转化为非贴壁 依赖性的必须贴伏在合适的固体介质上并铺展， 才能生长。 非贴壁依赖性细胞无需贴附到固体介质上就能 生存和生长的细胞。来自血液、淋巴系统的细 胞和大多数肿瘤细胞常为非贴壁依赖性的，它 们形态呈圆形。 典型过程培养 ❖动物细胞培养
亮型程培慕 令动物细廳焙养 生长特性:贴壁依赖型细胞在培养时要贴附 于培养(瓶)器皿壁上,细胞一经贴壁就迅 速铺展,然后开始有丝分裂,并很快进入对 数生长期。一般数天后就铺满培养表面,并 形成致密的细胞单层。 http://biotech.ecust.educn/jpkc/figc
http://biotech.ecust.edu.cn/jpkc/fjgc 生长特性：贴壁依赖型细胞在培养时要贴附 于培养（瓶）器皿壁上，细胞一经贴壁就迅 速铺展，然后开始有丝分裂，并很快进入对 数生长期。一般数天后就铺满培养表面，并 形成致密的细胞单层。 典型过程培养 ❖动物细胞培养
亮型程培慕 令动物细廳焙养 贴壁培养的优点: ●容易更换培养液;细胞紧密黏附于固相表面; 可直接倾去旧培养液,清洗后直接加入新培养 液 ●容易采用灌注培养,从而达到提高细胞密度的 目的;因细胞固定表面,不需过滤系统。 ●当细胞贴壁于生长基质时,很多细胞将更有效 的表达一种产品。 同一设备可采用不同的培养液细胞的比例 ●适用于所有类型细胞。 http://biotech.ecust.educn/jpkc/figc
http://biotech.ecust.edu.cn/jpkc/fjgc 贴壁培养的优点： ●容易更换培养液；细胞紧密黏附于固相表面， 可直接倾去旧培养液，清洗后直接加入新培养 液。 ●容易采用灌注培养，从而达到提高细胞密度的 目的；因细胞固定表面，不需过滤系统。 ●当细胞贴壁于生长基质时，很多细胞将更有效 的表达一种产品。 ●同一设备可采用不同的培养液/细胞的比例。 ●适用于所有类型细胞。 典型过程培养 ❖动物细胞培养
亮型程培慕 令动物细廳焙养 贴壁培养的缺点:与悬浮培养法相比 ●扩大培养比较困难,投资大 占地面积大; 不能有效监测细胞的生长 http://biotech.ecust.educn/jpkc/figc
http://biotech.ecust.edu.cn/jpkc/fjgc .贴壁培养的缺点：与悬浮培养法相比 ●扩大培养比较困难，投资大； ●占地面积大； ●不能有效监测细胞的生长； 典型过程培养 ❖动物细胞培养