第五节定性和定量分析 定性分析「定性鉴别 纯度检查和杂质限量测定 、定量分析「单组分的定量方法 L多组分的定量方法
第五节 定性和定量分析 一、定性分析 二、定量分析 定性鉴别 纯度检查和杂质限量测定 单组分的定量方法 多组分的定量方法
定性分析 ()定性鉴别 定性鉴别的依据→吸收光谱的特征 吸收光谱的形状 吸收峰的数目 吸收峰的位置(波长) 吸收峰的强度 相应的吸光系数
一、定性分析 （一）定性鉴别 定性鉴别的依据→吸收光谱的特征 吸收光谱的形状 吸收峰的数目 吸收峰的位置（波长） 吸收峰的强度 相应的吸光系数
续前 1,对比吸收光谱的一致性 0.2 播酸泼尼松 同一测定条件下 与标准对照物谱图或标准谱图 CH2OAc 进行对照比较 .OH 0.2 醋酸氢化可的松 0.4 0.2 酸可的松 220 260 三种甾体激素的紫外吸收光谐 ml甲爵溶液
续前 1．对比吸收光谱的一致性 同一测定条件下， 与标准对照物谱图或标准谱图 进行对照比较
续前 2.对比吸收光谱的特征值 max 3 max 9 +A,, C sh min CH3 C≡CH C=0 CH CHa . OH OCOCH3 CH3 H H H HH O O CH3 安宫黄体酮(M=386.53) 炔诺酮(M=298.43) ax=240士1nm λmg=240±1nm E1{%=408 E1%=571
续前 2．对比吸收光谱的特征值 min 1% max ， max ，E1cm + s h ，
续前 3对比吸光度或吸光系数的比值: 例:药典规定B12定性鉴别: 2738,4361,350三处最大吸收 361=1.70~1.88,-361=3.15~3.45 278 550
续前 3．对比吸光度或吸光系数的比值： ✓ 例： 1.70 ~1.88 3.15 ~ 3.45 550 361 278 361 278 361 550 1 2 = = A A A A VB ， ， ， 三处最大吸收 药典规定 定性鉴别：
续前 (三)纯度检查和杂质限量测定 1.纯度检查(杂质检查) 1)峰位不重叠: 找λ→使主成分无吸收,杂质有吸收→直接考察杂质含量 2)峰位重叠: 主成分强吸收,杂质无吸收/弱吸收→与纯品比较,E↓ 杂质强吸收>主成分吸收→与纯品比较,E↑,光谱变形
续前 （二）纯度检查和杂质限量测定 1．纯度检查（杂质检查） 1）峰位不重叠： 找λ→使主成分无吸收，杂质有吸收→直接考察杂质含量 2）峰位重叠： 主成分强吸收，杂质无吸收 / 弱吸收→与纯品比较，E↓ 杂质强吸收 >> 主成分吸收→与纯品比较，E↑，光谱变形
续前 2.杂质限量的测定 例:肾上腺素中微量杂质——肾上腺酮含量计算 2mgmL-0.05mL的HCL溶液,λ310m下测定 规定A31050.05即符合要求的杂质限量≤0.06% E 0.05 450 E lcm 1435×1 =1.1×10g/100ml 150 1.1×10-mg/ml 0 260280300320m肾上腺酮% .1×10 100=0.06% 肾上腺素(…)与肾 腺(一)的吸收光谐
续前 2．杂质限量的测定： ✓ 例：肾上腺素中微量杂质——肾上腺酮含量计算 2mg/mL -0.05mol/L的HCL溶液，λ 310nm下测定 规定 A310≤0.05 即符合要求的杂质限量≤0.06% 100 0.06% 2 1.1 10 % 1.1 10 / 1.1 10 /100 435 1 0.05 3 3 4 1% 1 = = = = = = − − − 肾上腺酮 mg ml g ml E l A C cm
定量分析 (一)单组分的定量方法 定量依据:A=EC·l 1.吸光系数法 2.标准曲线法 3.对照法:外标一点法
二、定量分析 （一）单组分的定量方法 1．吸光系数法 2．标准曲线法 3．对照法：外标一点法 定量依据：A = ECl
续前 1.吸光系数法(绝对法) 前提:要求单色光 过程:W(g样/含i稀C(g/m)→求A→C1 C;[g/100mL E·l 或C[mol 100 样
续前 1．吸光系数法（绝对法） 前提：要求单色光 i E 过程：W g 样 含i ⎯ ⎯→C g mL ⎯⎯⎯→求AC 稀释 已知 ( ) / ( / ) E l A Ci g mL [ /100 ] = l A Ci mol L = 或 [ / ] % = 100% C样 C i i
练习 √例:维生素B12的水溶液在361nm处的百分吸光系 数为207,用1cm比色池测得某维生素B12溶液的吸 光度是0414,求该溶液的浓度(见书P201例1) 解 A0.414 0.00200g/100mL=20.0/mL E·l207×1
练习 ✓ 例：维生素B12 的水溶液在361nm处的百分吸光系 数为207，用1cm比色池测得某维生素B12溶液的吸 光度是0.414，求该溶液的浓度（见书P201例1） ➢ 解： g mL g mL E l A C 0.00200 /100 20.0 / 207 1 0.414 = = = =