分子生物学概论生化教研室李嘉欣
分子生物学概论 生化教研室 李嘉欣
【掌握】1.核酸提取纯化的一般原则、原理及注意事项2.PCR的原理及方法（SINIW）及其3.分子杂交的主要种类原理
【掌握】 1. 核酸提取纯化的一般原则、原理及 注意事项 2. PCR的原理及方法 3.分子杂交的主要种类（S\N\W）及其 原理
【熟悉】1.DNA和RNA的定量方法2.细胞的破碎方法3.防止核酸降解的方法
【熟悉】 1. DNA和RNA的定量方法 2. 细胞的破碎方法 3. 防止核酸降解的方法
一、核酸的分离提取什么是核酸？核酸的种类及组成？核酸存在的部位？
4 一、核酸的分离提取 什么是核酸？ 核酸的种类及组成？ 核酸存在的部位？
核酸的概念和重要性(一)概念由核苷酸或脱氧核苷酸通过3'，5＇-磷酸二酯键连接而成的一类生物大分子，具有非常重要的生物功能，主要是贮存遗传信息和传递遗传信息。包括核糖核酸(RNA)和脱氧核糖核酸（DNA)两类。(二)重要性1.与生命活动关系密切，是重要的生命物质。生命的起源、生长、发育、衰老、死亡与之有关2.核酸研究是现代生物医学研究的核心。5
5 (一)概念 由核苷酸或脱氧核苷酸通过3′，5′-磷酸二酯键连 接而成的一类生物大分子，具有非常重要的生物功能， 主要是贮存遗传信息和传递遗传信息。包括核糖核酸 (RNA)和脱氧核糖核酸(DNA)两类。 (二)重要性 1.与生命活动关系密切，是重要的生命物质。生命的 起源、生长、发育、衰老、死亡与之有关。 2.核酸研究是现代生物医学研究的核心。 核酸的概念和重要性
核酸的类别、分布和组成类别：(一）核酸(nucleic acid)分为： 脱氧核糖核酸(DNA,acid)与核糖核酸(RNA,deoxyribonucleicribonucleic acid )。(RNA)核糖核酸分成以下几类：1、信使RNA(mRNA)2、转运RNA（tRNA）车3、核糖体RNA（rRNA）4、其他的非编码RNA(snRNA, microRNA)
6 （一）类别： 核酸(nucleic acid)分为: 脱氧核糖核酸(DNA, deoxyribonucleic acid )与 核 糖 核 酸 (RNA, ribonucleic acid )。 核糖核酸（RNA）分成以下几类： 1、信使RNA（mRNA） 2、转运RNA（tRNA） 3、核糖体RNA（rRNA） 4、其他的非编码RNA (snRNA, microRNA) 核酸的类别、分布和组成
(二)核酸的分布1、DNA的分布真核生物细胞核，线粒体亦含有DNA；原核生物集中于核区，核外的质粒；有些病毒含有DNA。2、RNA的分布存在于细胞质和细胞核中，主要存在于细胞质中：有些病毒含有RNA
7 （二）核酸的分布 1、DNA的分布 真核生物细胞核，线粒体亦含有DNA； 原核生物集中于核区，核外的质粒； 有些病毒含有DNA。 2、RNA的分布 存在于细胞质和细胞核中，主要存在于细胞质中； 有些病毒含有RNA
(三)核酸的组成五碳糖：脱氧核糖脱氧核糖基本组成单位碱基：A、 G、C 、 T脱氧核糖核苷酸核酸磷酸(DNA)磷酸主要在细胞核的染脱氧T核酸色体上，少数在线核糖粒体和叶绿体胸腺嘧啶脱氧核糖核苷酸五碳糖：核糖基本组成单位核糖核酸>核糖核苷酸碱基：A、Ｇ、Ｃ、U(RNA)磷酸磷酸主要在细胞质中U核糖尿嘧啶核糖核苷酸8
8 （三）核酸的组成 核酸 脱氧核糖 核酸 （DNA） 核糖核酸 （RNA） 基本组成单位 主要在细胞核的染 色体上，少数在线 粒体和叶绿体 主要在细胞质中 基本组成单位 脱氧核糖 核苷酸 核糖核苷酸 五碳糖：脱氧核糖 碱基： 磷酸 A、 G、C 、 T 脱氧 核糖 碱基 磷酸 A 腺嘌呤 G 鸟嘌呤 脱氧核糖核苷酸 C 胞嘧啶 T 胸腺嘧啶 五碳糖：核糖 碱基： 磷酸 A、 G、C 、 U 核糖 碱基 磷酸 A 腺嘌呤 G 鸟嘌呤 核糖核苷酸 C 胞嘧啶 U 尿嘧啶
核酸分离提取的原则一）保持核酸一级结构的完整性二尽量清除其它分子的污染，保证核酸纯度(三)防止核酸的降解应尽量简化分离纯化步骤，缩短提取时间。尽量避免各种有害因素对核酸的破坏
9 （一）保持核酸一级结构的完整性。 （二）尽量清除其它分子的污染，保证核酸纯度。 （三）防止核酸的降解。 l 应尽量简化分离纯化步骤，缩短提取时间。 l 尽量避免各种有害因素对核酸的破坏。 核酸分离提取的原则
核酸完整性的保持：1.避免过酸和过碱环境，pH在4-10之间2.避免高温破坏，0-4口C进行；3.简化步骤，缩短时间，洞减少破坏4.抑制DNA酶和RNA酶的活性
核酸完整性的保持： 1.避免过酸和过碱环境，pH在4-10之间； 2.避免高温破坏，0-4 C进行； 3.简化步骤，缩短时间，减少破坏； 4.抑制DNA酶和RNA酶的活性