实验7种子生活力和活力测定（TTC法)李岩1iyan5011@163.com
实验7 种子生活力和活力测 定（TTC法） 李 岩 liyan5011@163.com
一、本实验目的学习四唑法（TTC）测定种子生活力和活力的实验方法，掌握玉米种子生活力鉴定标准。二、材料与设备1.材料：玉米种子2.设备：烧杯、三角瓶、容量瓶、刀片、垫板、恒温培养箱等
一、本实验目的 学习四唑法（TTC）测定种子生活力和活力的实 验方法，掌握玉米种子生活力鉴定标准。 二、材料与设备 1.材料：玉米种子 2.设备：烧杯、三角瓶、容量瓶、刀片、垫板、恒 温培养箱等
三、实验内容1、TTC法测定玉米种子生活力随机数取玉米净种子100粒×2→室温浸泡过夜（以软化种皮、促进酶活化）→沿胚中部纵切，留取半粒 →放入烧杯，用0.1%TTC浸泡（淹没为宜，pH6.5-7.5）→35℃避光染色0.5~1h
三、实验内容 1、TTC法测定玉米种子生活力 随机数取玉米净种子100粒×2 → 室温浸泡 过夜（以软化种皮、促进酶活化） → 沿胚中部纵切，留取半粒 → 放入烧杯，用 0.1% TTC浸泡（淹没为宜，pH6.5-7.5）→ 35℃ 避光染色0.5～1h
→清水冲洗→观察鉴定（玉米：允许胚根不）一计算种染色、盾片上下任一端1/3不染色）子生活力百分率（平均百分率修约至最近似的整数）一→核对容许差距一→报告
→ 清水冲洗 → 观察鉴定（玉米：允许胚根不 染色、盾片上下任一端1/3不染色） → 计算种 子生活力百分率（平均百分率修约至最近似的 整数） → 核对容许差距 → 报告
平均生活力百分率%重复间容许的最大差距124次重复3次重复2次重复5299--36598-766497865796698795987-81093-949101191-929-1099011121189121211101388131210148713121114131184-8615-1715141281-8318-2016151378-8021-2316131776-7724-2517161473-7526-2814181671-7229-3018171469-7031-3218151767-6833-3419171564-6635-3719151856-6338-45
平均生活力百分率 % 重复间容许的最大差距 1 2 4次重复 3次重复 2次重复 99 2 5 - - 98 3 6 5 - 97 4 7 6 6 96 5 8 7 6 95 6 9 8 7 93-94 7-8 10 9 8 91-92 9-10 11 10 9 90 11 12 11 9 89 12 12 11 10 88 13 13 12 10 87 14 13 12 11 84-86 15-17 14 13 11 81-83 18-20 15 14 12 78-80 21-23 16 15 13 76-77 24-25 17 16 13 73-75 26-28 17 16 14 71-72 29-30 18 16 14 69-70 31-32 18 17 14 67-68 33-34 18 17 15 64-66 35-37 19 17 15 56-63 38-45 19 18 15 55 46 20 18 15
2、TTC法测定玉米种子活力（脱氢酶活性测定）随机数取玉米净种子30粒×2室温浸泡过夜（或35℃3-4h）→沿胚中部纵切，留取半粒→放入烧杯用0.1%TTC浸泡（淹没为宜）→培养箱35℃黑暗0.5-1h→清水冲洗剥胚、称重→15m195%乙醇研磨（5ml研磨，10ml冲洗）三角瓶中（封口）80℃水浴0.5h转移至容量瓶定容25ml→5min、5000r/min（配平）上清液490nm比色（CK：95%乙醇）→根据光密度值评价种子活力高低（/g）一→报告
2、TTC法测定玉米种子活力（脱氢酶活性测定） 随机数取玉米净种子30粒×2 → 室温浸泡过夜（或35℃3-4h）→ 沿胚中部纵切，留取 半粒 → 放入烧杯用0.1%TTC浸泡（淹没为宜）→ 培养箱 35℃黑暗0.5-1h → 清水冲洗 → 剥胚、称重 → 15ml95%乙醇研磨（5ml研磨，10ml冲洗） → 三角瓶中（封口）80℃水浴0.5h → 转移至容量瓶定容25ml → 5min、5000r/min（配平） → 上清液490nm比色（CK：95%乙醇）→ 根据光密度值评 价种子活力高低（/g）→ 报告
胚芽和分生胚根未染色组织未染色胚根和超过1/3的盾片未染色
胚芽和分生 组织未染色 胚根未染色 胚根和超过1/3的盾 片未染色