基因重组(gene recombination)是 指DNA片段在细胞内、细胞间,甚至在不同物种之 间进行交换,交换后的片段仍然具有复制和表达的 功能。 基因工程(genetic engineering)是 指采用人工方法将不同来源的DNA进行重组,并将 重组后的DNA引入宿主细胞中进行增殖或表达的过 程,从而改变生物特性或创造新的生物类型的技术
基因重组(gene recombination)是 指DNA片段在细胞内、细胞间,甚至在不同物种之 间进行交换,交换后的片段仍然具有复制和表达的 功能。 基因工程(genetic engineering)是 指采用人工方法将不同来源的DNA进行重组,并将 重组后的DNA引入宿主细胞中进行增殖或表达的过 程,从而改变生物特性或创造新的生物类型的技术
整合:外来DNA侵入宿主细胞,并与宿主 细胞DNA进行重组,成为宿主细胞DNA的 一部分,这一过程称为整合。 整合后的外来DNA仍然可随染色体DNA一起复 制,并在适当的条件下进行表达,但也可在相当 长的一段时间内不表达
整合:外来DNA侵入宿主细胞,并与宿主 细胞DNA进行重组,成为宿主细胞DNA的 一部分,这一过程称为整合。 整合后的外来DNA仍然可随染色体DNA一起复 制,并在适当的条件下进行表达,但也可在相当 长的一段时间内不表达
基因工程的操作过程主要由以下步骤组成: ①载体和目的基因的分离; ②载体和目的基因的切断; ③载体和目的基因的重组; ④重组DNA的转化和扩增; ⑤重组DNA的筛选和鉴定
基因工程的操作过程主要由以下步骤组成: ①载体和目的基因的分离; ②载体和目的基因的切断; ③载体和目的基因的重组; ④重组DNA的转化和扩增; ⑤重组DNA的筛选和鉴定
(一)载体:可以将目的基因运载进入细胞 并进行复制和表达的DNA分子。 基因工程中常用的载体(vector)主要包括质粒 (plasmid)、噬菌体(phage)和病毒(virus)三大 类。 这些载体均需经人工构建,除去致病基因, 并赋予一些新的功能,如有利于进行筛选的 标志基因、单一的限制酶切点等
(一)载体:可以将目的基因运载进入细胞 并进行复制和表达的DNA分子。 基因工程中常用的载体(vector)主要包括质粒 (plasmid)、噬菌体(phage)和病毒(virus)三大 类。 这些载体均需经人工构建,除去致病基因, 并赋予一些新的功能,如有利于进行筛选的 标志基因、单一的限制酶切点等
载体构建的条件: • 1. 能在受体细胞中独立复制。 • 2. 分子量小,易于分离、纯化、导入 • 3. 有限制性内切酶位点。 • 4. 有可供选择的遗传标志。 • 5. 易于导入受体细胞
载体构建的条件: • 1. 能在受体细胞中独立复制。 • 2. 分子量小,易于分离、纯化、导入 • 3. 有限制性内切酶位点。 • 4. 有可供选择的遗传标志。 • 5. 易于导入受体细胞
1.质粒: 是存在于天然细菌体内的一种独 立于细菌染色体之外的双链环状DNA,具有 独立复制的能力,通常带有细菌的抗药基因。 最早使用的质粒DNA是人工构建的pBR322, 该质粒分子大小为4.3kb,带有抗四环素和抗 氨苄青霉素基因,含EcoRⅠ,BamHⅠ, HindⅢ等单一的限制酶切点
1.质粒: 是存在于天然细菌体内的一种独 立于细菌染色体之外的双链环状DNA,具有 独立复制的能力,通常带有细菌的抗药基因。 最早使用的质粒DNA是人工构建的pBR322, 该质粒分子大小为4.3kb,带有抗四环素和抗 氨苄青霉素基因,含EcoRⅠ,BamHⅠ, HindⅢ等单一的限制酶切点