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• 氨基酸是构成蛋白成分 • 目前世界上可用发酵法生产氨基酸有20多种
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一、PCR检测 二、报告基因的表达检测 三、Southern杂交鉴定 四、Northern杂交鉴定 五、外源基因表达蛋白的检测 六、其它方法
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山东师范大学:《微生物工程》课程教学资源(PPT课件)实验一 从土壤中分离纯化蛋白酶产生菌
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人们进一步研究荧光蛋白发色团的复杂特性,找到了关于多肽骨架结构与功能关系的线索,因此借助基因工程更精细的调整颜色变体,并扩大有用蛋白的光谱范围就变得更加容易了
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基因工程制药概述 基因工程制药的基本流程 重组蛋白分离纯化技术 基因工程药物的修饰改造 基因工程在制药工业中的应用 基因工程制药的优点 基因工程菌的构建与筛选 基因工程制药基本环节 选择宿主细胞的原则 凝胶过滤 (gel filtration chromatography) 特异结合亲和性-亲和层析 纯化后蛋白的质量检测与保存 修饰与改造的主要手段 基因工程药物的质量控制与应用 成品理化性质的检定
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利用插入突变的方式获得了一株衣藻不运动突变体ift81,该突变体表现出鞭毛缺失或者短鞭毛的性状.基因序列分析表明,外源基因aphⅧ插入了突变体中IFT81(intraflagellar transport,IFT)基因的第五个外显子内,并导致该外显子原有的52个碱基对被替换.把含有完整IFT81基因的重组质粒导入突变体ift81后,其鞭毛恢复为野生型且可以检测到IFT81-HA融合蛋白的表达,这证明突变体的鞭毛缺陷确实是由于IFT81基因突变所导致.电镜观察显示突变体中鞭毛的显微结构发生改变,免疫荧光实验证实IFT81蛋白主要定位于基体和鞭毛部位.上述结果表明:IFT81蛋白缺失会导致衣藻鞭毛组装缺陷,在鞭毛组装所需蛋白的运输过程中,IFT81蛋白是必不可少的
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为研究环境化合物与雌激素受体的相互作用,在大肠杆菌中异源表达了人雌激素受体ERβ的配体结合区(hERβ-LBD)蛋白。在诱导剂(IPTG)浓度为0.2mmol·L-1,培养温度25℃,诱导时间为8h的优化表达条件下,经亲和色谱法纯化后,hERβ(LBD蛋白的产量可达236mg·L-1
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9外源基因表达产物的分离纯化 A重组蛋白分离纯化方法选择的基本原则 B离子交换层析 C凝胶层析 D亲和层析 E膜分离 F原核生物表达的重组蛋白质量检测
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• 疫苗的基本概念 • 疫苗的分类 • 减毒疫苗 • 灭活疫苗 • 类毒素疫苗 • 基因工程蛋白疫苗 第一种基因工程疫苗-乙肝疫苗 第一种肿瘤疫苗-HPV疫苗 • 结合疫苗 • 核酸疫苗
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第二章预处理和固液分离 一、预处理 目的——改变料液的流变特性,以及除去对后面纯化有影响的杂质 方法 凝聚(定义、原理、凝聚剂) 絮凝(定义、原理、絮凝剂) 去杂(蛋白、多糖、核酸、去高价阳离子)
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