1.绪论 1 1.1 生物化学实验技术发展简史 1 1.2 实验室规则 5 1.3 实验室安全及防护知识 6 1.4 实验记录与实验报告 9

离心技术在生物科学，特别是在生物化学和分子生物学研究领域，已得到十分广 泛的应用，每个生物化学和分子生物学实验室都要装备多种型式的离心机。离心技术 主要用于各种生物样品的分离和制备，生物样品悬浮液在高速旋转下，由于巨大的离 心力作用，使悬浮的微小颗粒（细胞器、生物大分子的沉淀等）以一定的速度沉降， 从而与溶液得以分离，而沉降速度取决于颗粒的质量、大小和密度

离心技术在生物科学，特别是在生物化学和分子生物学研究领域，已得到十分广 泛的应用，每个生物化学和分子生物学实验室都要装备多种型式的离心机。离心技术 主要用于各种生物样品的分离和制备，生物样品悬浮液在高速旋转下，由于巨大的离 心力作用，使悬浮的微小颗粒（细胞器、生物大分子的沉淀等）以一定的速度沉降， 从而与溶液得以分离，而沉降速度取决于颗粒的质量、大小和密度

信阳职业技术学院：《微生物学检验》课程教学课件（PPT讲稿）细菌的生物化学实验

第一章 生物化学部分.1 实验一、双缩脲法测定血清蛋白质含量. 1 实验二、纸层析法观察转氨基作用. 2 实验三、血清醋酸纤维薄膜电泳. 4 实验四、血清丙氨酸氨基转移酶活性测定. 7 实验五、胰酶对蛋白质的消化和影响酶作用的因素. 10 实验六、酶的竞争性抑制作用. 13 实验七、血糖浓度的测定. 16 实验八、血清γ球蛋白的分离纯化与鉴定. 18 第二章 分子生物学部分.25 实验一、质粒 DNA 的提取制备与检测. 25 实验二、PCR 技术. 28 实验三、DNA 的限制性酶切与电泳. 31 实验四、DNA 连接实验. 38 实验五、重组 DNA 转化与篮白斑筛选. 41 实验六、SDS-PAGE 测定蛋白质的相对分子量. 44

第一章生物化学实验基本知识与操作 第一节生物化学实验基本知识 第二节 第二章分光光度技术 实验一双缩脲法测定蛋白质浓度 实验二 Folin-酚试剂法(Lowry 法)测定蛋白质浓度 实验三紫外分光光度法测定蛋白质浓度 实验四考马斯(Comessie)亮兰结合法测定蛋白质浓度 实验五BCA 法测定蛋白质浓度 实验六激素对血糖浓度的影响及血糖的测定 第三章生物大分子的提取、沉淀和离心分离技术 第一节生物材料的选取与预处理 第二节生物大分子的沉淀分离技术 第三节生物大分子离心分离技术 实验七鸡血SOD的提取、分离及活力测定 实验八碱性磷酸酶的制备及活力测定 实验九酪蛋白的制备 实验十动物肝脏中提取DNA 实验十一猪心肌细胞线粒体可溶性ATP合酶的提 第四章电泳技术 实验十二DNA 琼脂糖凝胶电泳 实验十三血浆脂蛋白琼脂糖凝胶电泳 实验十四聚丙烯酰胺凝胶电泳分离乳酸脱氢酶同工酶 实验十五蛋白质分子量的测定——SDS-聚丙烯凝胶电泳 实验十六聚丙烯酰胺等电聚焦电泳 第五章层析技术 第一节 层析技术概述 吸附层析 第三节 分配层析 第四节 离子交换层析 第五节 凝胶层析 第六节亲和层析 第七节 高效液相层析 实验十七氨基酸的纸上层析与氨基酸的转氨基作用 实验十八血清-球蛋白的分离纯化与鉴定 实验十九 亲和层析纯化胰蛋白酶 实验十二离子交换层析分离氨基酸 实验二十一蛋白质分子量测定——凝胶过滤层析法 第六章 分子生物学基本技术 核酸分子杂交 聚合酶链反应 第三节分子克隆 实验二十二Southern杂交分析 实验二十三 Northern 杂交分析 实验二十四 PCR 基因扩增 验二十五质粒DNA的提取及酶切 实验二十六 DNA重组实验 实验二十七大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 附录一常用缓冲液的配制方法 附录二易变质及需要特殊方法保存的试剂 附录三一般化学试剂的分级 附录四 English words in the lab

1.1 生物化学实验技术发展简史 1.2 实验室规则 1.3 实验室安全及防护知识 1.4 实验记录与实验报告 1.5 实验室基本操作 1.6 缓冲溶液与 pH 测定 1.7 生化实验室的基本设施与装备

实验一 动物界的主要类群 实验二 植物的主要类群 实验三 实验动物解剖基础知识 实验四 家兔的解剖 实验五 大白鼠的解剖

实验一 光学显微镜的构造和使用 实验二 细胞的基本形态与结构 实验三 细胞器的观察 实验四 细胞膜的通透性和细胞的吞噬活动 实验五 细胞组分的分离和鉴定 实验六 细胞骨架的显示与观察 实验七 细胞的显微测量 实验八 细胞的有丝分裂 实验九 减数分裂 实验十 细胞原代培养 实验十一 细胞传代培养 实验十二 培养细胞的换液 实验十三 细胞的保存 实验十四 细胞的复苏 实验十五 细胞计数 实验十六 细胞生长曲线（计数法） 实验十七 培养细胞的分裂指数和集落形成率的测定 实验十八 培养细胞的形态观察 实验十九 细胞融合

性质与任务 生物化学实验是生物化学教学的重要组成部分,它和生物化学理论教学都具有同等重 要的地位。生化实验技术广泛用于生命科学许多领域的研究。 1.通过实验课的教学,使学生掌握比色、层析、电泳、离心等生物化学基本实验方 法的原理和操作技能,学会选择正确的方法进行生物材料中多种物质的分离,提纯及鉴定。 2.培养学生严谨的科学态度及分析、解决问题的能力。同时通过实验加深学生对生 物化学基本理论的理解