重要的工具酶 基因克隆常用的载体 重组DNA基本原理 重组技术在医学和制药 工业中的应用

实验一 质粒的制备 实验二 DNA的琼脂糖凝胶电泳 实验三 外源DNA片段在质粒载体中的克隆 实验四 感受态细胞的制备 实验五 质粒的转化及转化子的鉴定 实验六 PCR技术

从Watson 和Crick发现DNA的双螺旋结构开始，分子生物学得到了飞速的发展，并迅速成为生命科学体系中的一门重要学科，也成为同学们必需学习的课程之一。通过本课程对核酸的结构、基因组、遗传信息的表达、以及表达的调控、基因工程等内容的教学，使学生了解基因的本质及基因表达调控的方式，掌握与分子生物学有关的新知识、新技术，为一些与基因有关的疾病诊断、预防和治疗提供科学根据

一、形态学观察 二、细胞遗传学 如：染色体核型分析、染色体显带等 三、分子细胞遗传学 如：荧光原位杂交 四、分子生物学 如： Southern杂交，PCR及相关技术等

• 疫苗的基本概念 • 疫苗的分类 • 减毒疫苗 • 灭活疫苗 • 类毒素疫苗 • 基因工程疫苗 • DNA疫苗• 抗体的概念 • 抗体的发现-白喉抗毒素 • 抗体理论的发展 • 生物魔弹-单克隆抗体 • 肿瘤的免疫治疗

• 疫苗的基本概念 • 人类历史上第一种疫苗-牛痘疫苗 • 疫苗的分类 • 灭活疫苗、减毒疫苗和类毒素疫苗 • 第一种基因工程疫苗-乙肝疫苗 • 第一种肿瘤疫苗-宫颈癌疫苗 • DNA疫苗 • 抗体的概念 • 抗体的发现-白喉抗毒素 • 抗体理论的发展 • 生物魔弹-单克隆抗体 • 肿瘤的免疫治疗

从20世纪中叶开始，分子生物学研究得到高速发展，主要原因之一是研究方法，特别是基因操作和基因工程技术的进步。一、DNA操作技术 二、基因克隆的常用载体系统 三、基因的分离与鉴定

实验一 质粒的制备 实验二 DNA 的琼脂糖凝胶电泳 实验三 外源 DNA 片段在质粒载体中的克隆 实验四 感受态细胞的制备 实验五 质粒的转化及转化子的鉴定 实验六 PCR 技术 实验七 植物总 DNA 的快速少量抽提（ CTAB 法） 实验八 总 DNA 质量检测及酶切 实验九 电泳、转膜 实验十 RNA Extraction (mini prep) 实验十一 RT-PCR 实验 附录 试剂配方 一 细菌培养试剂 二 质粒抽提试剂 三 DNA 操作试剂 四 RNA 操作试剂

第一节 杂交瘤技术的基本原理 一、杂交瘤技术 二、阳性杂交瘤细胞的克隆化培养与冻存 第二节 单克隆抗体的制备 一、单克隆抗体的产生 二、单克隆抗体的纯化 三、单克隆抗体的性质鉴定 四、单克隆抗体的特性 第三节 基因工程抗体制备 一、人源化抗体 二、小分子抗体 三、抗体融合蛋白 四、双特异性抗体 五、噬菌体抗体库技术 第四节 单克隆抗体的应用 一、检验医学诊断试剂 二、蛋白质的提纯 三、小分子抗体的应用 四、抗体融合蛋白的应用 五、双特异抗体的应用 六、抗体库技术的应用和前景

第一节 杂交瘤技术的基本原理 一、杂交瘤技术 二、阳性杂交瘤细胞的克隆化培养与冻存 第二节 单克隆抗体的制备 一、单克隆抗体的产生 二、单克隆抗体的纯化 三、单克隆抗体的性质鉴定 四、单克隆抗体的特性 第三节 基因工程抗体制备 一、人源化抗体 二、小分子抗体 三、抗体融合蛋白 四、双特异性抗体 五、噬菌体抗体库技术 第四节 单克隆抗体的应用 一、检验医学诊断试剂 二、蛋白质的提纯 三、小分子抗体的应用 四、抗体融合蛋白的应用 五、双特异抗体的应用 六、抗体库技术的应用和前景 思考题 小结