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9外源基因表达产物的分离纯化 A重组蛋白分离纯化方法选择的基本原则 B离子交换层析 C凝胶层析 D亲和层析 E膜分离 F原核生物表达的重组蛋白质量检测
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第一章 蛋白质(酶)、核酸的分离纯化 第一节 引言 一、分离纯化的意义 二、分离纯化的要求 三、分离纯化的一般程序 第二节 蛋白质(酶)、核酸分离纯化的前处理 一、材料的选择与预处理 二、细胞的破碎 三、细胞器的分离 四、提取 第三节 分离纯化 一、 粗提纯 二、 精提纯 三、 纯度鉴定 第四节 生物大分子的浓缩、干燥及保存 第二章 离心技术 ▪ 离心技术概论 ▪ 一般制备离心 ▪ 超离心技术 第三章 层析技术 引言 层析法的基本原理 层析法的分类 第一节 吸附层析技术 第二节 分配层析技术 第三节 凝胶过滤层析技术 第四节 离子交换层析法 第五节 亲和层析法 第六节 高压液相层析(HPLC) 第四章 电泳技术 引言 第一节 电泳的基本原理 第二节 聚丙烯酰胺凝胶电泳 第三节 琼脂糖凝胶电泳 第四节 免疫电泳 一、概述 二、聚丙烯酰胺凝胶的制备 三、凝胶浓度和交联度与孔径大小的关系 四、不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳
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溶剂沉淀方法 层析技术
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基因工程制药概述 基因工程制药的基本流程 重组蛋白分离纯化技术 基因工程药物的修饰改造 基因工程在制药工业中的应用 基因工程制药的优点 基因工程菌的构建与筛选 基因工程制药基本环节 选择宿主细胞的原则 凝胶过滤 (gel filtration chromatography) 特异结合亲和性-亲和层析 纯化后蛋白的质量检测与保存 修饰与改造的主要手段 基因工程药物的质量控制与应用 成品理化性质的检定
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前面我们所学的凝胶过滤法、离子交换法以及电泳等一系列分离纯化生物大分子的 手段,比起早期采用的盐析法,有机溶剂及等电点沉淀法等,分离效果要好得多。但是, 这些方法中,或是利用生物大分子在一定条件下不同的溶解度、电荷分布、总电荷的不 同,或是依据其分子的大小和形状的不同。一句话,多是利用生物分子间物理和化学性 质的差异来进行分离纯化的。由于这些方法的特异性比较低,加之待分离物质之间的物 化性质差异较小,常常要综合不同的分离方法。经过许多步骤才能使生物分子达到一定 的纯度
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倾斜分层—将厚煤层分成若干与煤层层面相平行的 分层,然后逐层开采。 回采顺序:下行式(descending)— 先采顶分层, 依次下行回采各分层,垮落法管理顶板,称倾斜 分层下行垮落采煤法。 分层同采:在同一区段范围内,上、下分层工作面 错开一定距离同时采煤,称:“分层同采” 分层分采 :在同一区段范围内,采完一个分层后再 采下一个分层称“分层分采”或“大扒皮
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一、 TCP/IP(Transmission ControlProtocol/Internet Protocol,传输控制协议/网间协议) 二、包括五个层次:应用层、传输层、网络层、链路层、物理层 三、ISO/OSI网络参考模型 四、包括七个层次:应用层、表示层、会话层、传输层、网络层、链路层、物理层
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对GCr15轴承钢表面渗硼层的生长动力学与机械性能进行了研究.采用固体渗硼的方法,在1123、1173、1223和1323 K温度条件下,分别保温处理2、4、6和8 h,进行渗硼层制备.采用光学显微镜、扫描电镜、X射线衍射仪、维氏硬度计等对制备的渗硼层进行组织观察与性能分析,并通过试验数据对渗硼层的生长动力学特性进行了研究.研究结果表明:试样表面获得了均匀致密的渗硼层,渗硼层的相成分主要是FeB和Fe2B;渗硼层的厚度随处理温度与保温时间的增加而增厚,变化范围为33.4~318.5 μm;渗硼层的表面硬度随处理温度及保温时间的增加而增大,主要是由于随着渗硼层厚度的增加,高硬度FeB相的含量上升,低硬度Fe2B相的含量下降,表面硬度HV0.1变化范围为1630~1950,与基体组织相比,提高了5~6倍;渗层截面硬度测试结果表明,渗层与基体之间有较宽的硬度梯度过渡;通过Arrhenius公式,对渗硼层的生长动力学方程进行了推导,可知B元素在GCr15轴承钢中的扩散激活能为188.595 kJ·mol-1,对推导的动力学方程进行了试验验证,结果表明最大误差仅4.93%,可有效的实现对渗层厚度的预测
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以人造石墨为原料制备了低氧化程度的氧化石墨(MOG),并研究了具有不同极性基团和不同碳链长度的表面活性剂对氧化石墨的插层机理。通过X射线衍射(XRD)、红外光谱(FT-IR)、X射线光电子能谱(XPS)、拉曼光谱(Raman)和Zeta电位仪对插层前后的氧化石墨进行表征,探讨表面活性剂的分子结构对其插层能力的影响以及表面活性剂的插层机理。结果表明阳离子表面活性剂主要通过其极性端与氧化石墨的羧基、羟基之间的静电吸引作用进入氧化石墨层间进行插层,其插层效果优于阴离子表面活性剂,更容易增大氧化石墨的层间距。阴离子表面活性剂则通过与氧化石墨之间形成氢键和疏水作用力来进行插层。研究表明:表面活性剂极性基团的分子大小越大,非极性端的碳链越长,其插层能力越强。上述研究成果有助于深入认识表面活性在氧化石墨层间的插层机理,同时也对氧化石墨插层改性材料的制备和应用具有重要的指导意义
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一、建筑地面应由下列各构造层组成: ①面层:直接承受各种物理和化学的表面层; ②结合层:面层与下一构造层相联结的中间层、 也可以作为面层的弹性基层; 3找平层:在垫层上、楼板层上或填充层(轻质、松散材 料)上起整平、找坡或加强作用的构造层; ④隔离层:防止建筑地面上各种液体(含油渗)或地下水、 潮气渗透地面等作用的构造层
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