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一、实验目的 1. 了解凝胶层析的原理及其应用。 2. 通过测定蛋白质分子量的训练,初步掌握凝胶层析技术
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《生物化学实验》课程教学资源(讲义)实验二 凝胶层析法测定蛋白质分子量
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上海交通大学:《生命科学实验探索》教学资源(PPT课件)07 生物大分子的分离——血红蛋白凝胶层析
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第四节 凝胶过滤层析 ( Gel filtration chromatography,GFC ) 第五节 离子交换层析 Ion exchange chromatography, IEC 第六节 疏水性相互作用层析 第七节 亲和吸附层析 Immunoaffinity chromatography
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第一章概论-生命大分子物质的制备 第二章沉淀法 第三章吸附层析 第四章疏水层析 第五章离子交换层析 第五章凝胶过滤 第六章亲和层析 第七章SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 第八章等电聚焦电泳 第九章鉴定方法
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第四章 固相析出分离法 第五章 吸附法 第六章 离子交换法 第七章 凝胶层析 第八章 亲和层析 第九章 离心技术 第十章 膜分离技术 第十一章 制备型高效液相色谱
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9外源基因表达产物的分离纯化 A重组蛋白分离纯化方法选择的基本原则 B离子交换层析 C凝胶层析 D亲和层析 E膜分离 F原核生物表达的重组蛋白质量检测
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第一章 蛋白质(酶)、核酸的分离纯化 第一节 引言 一、分离纯化的意义 二、分离纯化的要求 三、分离纯化的一般程序 第二节 蛋白质(酶)、核酸分离纯化的前处理 一、材料的选择与预处理 二、细胞的破碎 三、细胞器的分离 四、提取 第三节 分离纯化 一、 粗提纯 二、 精提纯 三、 纯度鉴定 第四节 生物大分子的浓缩、干燥及保存 第二章 离心技术 ▪ 离心技术概论 ▪ 一般制备离心 ▪ 超离心技术 第三章 层析技术 引言 层析法的基本原理 层析法的分类 第一节 吸附层析技术 第二节 分配层析技术 第三节 凝胶过滤层析技术 第四节 离子交换层析法 第五节 亲和层析法 第六节 高压液相层析(HPLC) 第四章 电泳技术 引言 第一节 电泳的基本原理 第二节 聚丙烯酰胺凝胶电泳 第三节 琼脂糖凝胶电泳 第四节 免疫电泳 一、概述 二、聚丙烯酰胺凝胶的制备 三、凝胶浓度和交联度与孔径大小的关系 四、不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳
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基因工程制药概述 基因工程制药的基本流程 重组蛋白分离纯化技术 基因工程药物的修饰改造 基因工程在制药工业中的应用 基因工程制药的优点 基因工程菌的构建与筛选 基因工程制药基本环节 选择宿主细胞的原则 凝胶过滤 (gel filtration chromatography) 特异结合亲和性-亲和层析 纯化后蛋白的质量检测与保存 修饰与改造的主要手段 基因工程药物的质量控制与应用 成品理化性质的检定
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前面我们所学的凝胶过滤法、离子交换法以及电泳等一系列分离纯化生物大分子的 手段,比起早期采用的盐析法,有机溶剂及等电点沉淀法等,分离效果要好得多。但是, 这些方法中,或是利用生物大分子在一定条件下不同的溶解度、电荷分布、总电荷的不 同,或是依据其分子的大小和形状的不同。一句话,多是利用生物分子间物理和化学性 质的差异来进行分离纯化的。由于这些方法的特异性比较低,加之待分离物质之间的物 化性质差异较小,常常要综合不同的分离方法。经过许多步骤才能使生物分子达到一定 的纯度
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