大肠杆菌常规培养 大肠杆菌在LB( Luria-Bertani-)液体培养基中,37℃水浴摇床培养12-16小时在LB固 体培养基中,置于37℃培养箱培养12-16小时。如果培养用于提取具有氨苄青霉素(Amp)抗性 基因质粒(如pUC18)的菌体,则需在培养基中加入100mg/ml的氨青霉素

• 大肠杆菌表达体系 • 克隆基因正确表达的基本条件 • 克隆基因表达活性的检测

第一节 细菌的遗传分析 1. 细菌概述 2. 大肠杆菌的突变型和筛选 3. 大肠杆菌的性别和杂交 4. 致育因子(F因子) 5. 低频重组与高频重组 6. 中断杂交与作图 7. 细菌的交换和重组 8. 重组作图 9. F’因子和性导 第二节 噬菌体的遗传分析 1. 病毒概述 2. 噬菌体的繁殖和感染周期(infection cycle) (1). 烈性噬菌体 (2). 温和性噬菌体 3. 噬菌体的突变型 4. 噬菌体的基因重组 5. 转导与作图 (1). 普遍性转导 (2). 局限性转导

1.重组质粒的鉴定。当质粒的重组或其它载体重组后,通常会发生质粒的重组失 败,包括质粒的自身环化。因而要求进行筛选,把重组成功的质粒找出来。在目前常用的 质粒和其它载体中含有相应的抗生素抗性基因,一旦重组成功,质粒环化(包括自身环 化),抗生素抗性基因表达,被转化的大肠杆菌便具备抗相应抗生素的能力,可以含该抗生 素的培养基中生长传代,不然,重组失败,大肠杆菌便不能抵抗该抗生素而死亡

第一节 基因的表达系统与表达策略 第二节 基因在大肠杆菌中的高效表达 第三节 基因在酵母中的表达

本属现有5个种，其中最重要的种是大肠埃 希菌 (E·coli)，俗称大肠杆菌，下分血清型。 本菌系人和温血动物肠道内正常菌群成员之一， 人和动物出生后数小时即可经口进入消化道后 既大量繁殖而定居，终生伴随，并经粪便不断 散播于周围环境。故大肠杆菌在环境卫生和食 品卫生学上，常被用作粪便直接或间接污染的 检测指标。本菌还是分子生物学和基因工程中 重要的实验材料和研究对象

天津大学1999硕士入学微生物学试题 一.填空和多项选择填空题:(每题5分,共30分) 1.在原核微生物中虽然有性繁殖方式,但仍可通过不同方式在细胞水平上实现基因重组。由部分缺陷型噬茵体参与实现的基因重组方式称为大肠杆菌可以通过接合实现基因重组,可选用大肠杆菌的或菌株做供体茵,菌株做受体菌:如果要在不同种属的原核细胞之间实现基因重组,则应该采用或方式进行基因重组

试验检测结果表明,E基因在大肠杆菌中得到了表达,并且可与抗DTMUV的多克隆抗体发生特异性反应。E基因的成功表达为DTMUV的诊断试剂盒、疫苗等的研制奠定基础

一.是非题(共10分。只需注明“对”或“错”) 1.大多数嗜热菌的G-C含量高于中温菌。 2.大肠杆菌属低等原核生物,所以其遗传物质只是一条松散的环状双链DNA,不存在DNA高级结构。 3.当菌体生长、氧吸收和糖利用的比速度下降时,青霉素的合成达到最高值。 4.初生F菌株和次生F菌株都属于部分二倍体

一.是非题(共10分。只需注明“对”或“错”) 1.大多数嗜热菌的G-C含量高于中温菌。 2.大肠杆菌属低等原核生物,所以其遗传物质只是一条松散的环状双链DNA,不存在DNA高级结构。 3.当菌体生长、氧吸收和糖利用的比速度下降时,青霉素的合成达到最高值。 4.初生F菌株和次生F菌株都属于部分二倍体