微生物( microorganism, microbe)是一切肉眼看不见或看不清楚的微小生物的总称。它们 是一些个体微小(<0.1mm)、构造简单的低等生物,包括属于原核类的细菌、放线菌、支原 体、立克次氏体、衣原体和蓝细菌(过去称藍藻或蓝绿藻),属于真核类的真菌(酵母菌和霉 菌)、原生动物和显微藻类,以及属于非细胞类的病毒、类病毒和朊病毒等。现表解如下 小(个体小){um(徽米)级:光学显微镜下可见《细胞 nm〔纳米)级:电于显微镜下可见(细胞器,病毒) 单细胞 简(构造简单)〈简单多细胞 非细胞(即“分子生物”) 原核类:细菌,放线菌,支原体,立克次氏体,衣原体,蓝细菌 低(进化地位低){真核类:真茵(酵母曹,霉菌),原生动物

一、了解固定化细胞技术的方法和意义; 二、了解酵母发酵产生啤酒的过程; 三、了解基本微生物实验操作技术; 四、学习酸奶制作方法; 五、了解纯种发酵和传统发酵在无菌操作方面的差别

酶是一类具有高效率、高度专一性、活性可调节的高分子生物催化剂。 1957巴斯德提出酒精发酵是酵母细胞活动的结果。 分子Gl→2分子乙醇+2分子CO2从Gl开始,经过12种酶催化,12步反应,生成 1897 Buchner兄弟证明发酵与细胞的活动无关,不含细胞的酵母汁也能进行乙醇发酵

酶是一类具有高效率、高度专一性、活性可调节的高分子生物催化剂。 1957 巴斯德提出酒精发酵是酵母细胞活动的结果。 1 分子 Glc→2 分子乙醇+2 分子 CO2 从 Glc 开始，经过 12 种酶催化，12 步反应，生成乙醇。 1897 Buchner 兄弟证明发酵与细胞的活动无关，不含细胞的酵母汁也能进行乙醇发酵

3.1蛋白质表达系统 3.1.1 E. coli蛋白表达系统 3.1.2哺乳动物表达系统 3.1.3昆虫表达系统 3.1.4硒代蛋白表达 3.2蛋白纯化技术 3.2.1 AKTA使用规则及使用实例 3.2.2蛋白纯化柱子的介绍及清洁方法 3.2.3透析袋的使用 3.2.4浓缩管的使用 3.2.5 TEV蛋白酶的使用 3.2.6金属螯合层析 3.2.7分子筛 3.2.8疏水作用层析 3.2.9离子交换层析 3.2.10 Protein A/G 纯化抗体 3.2.11谷胱甘肽转移酶 (GST) 亲和层析 3.2.12 Fab的蛋白表达 3.2.13植物种子蛋白的提取方案 3.2.14包涵体复性 3.2.15 SDS-PAGE凝胶电泳 3.2.16 GraphPad Prism软件的使用 3.3筛选与蛋白互作的分子 3.3.1酵母双杂交技术从文库中筛选与蛋白X结合的蛋白 3.3.2噬菌体展示 3.3.3配体指数富集的系统进化技术筛选核酸适配体 3.4检测蛋白与互作分子的互作 3.4.1酵母双杂交 Yeast two hybrid 3.4.2双分子荧光互补Bimolecular fluorescence complementation 3.4.3 Western Blotting 3.4.4免疫共沉淀Co-Immunoprecipitation 3.4.5差示扫描荧光技术Differential Scanning Fluorimetry 3.4.6荧光偏振Fluorescence polarization 3.4.7等温滴定微量热Isothermal Titration Calorimetry 3.4.8表面等离子共振技术Biacore 3.4.9蛋白质交联Crosslink 3.4.10 Native-PAGE 3.4.11静态光散射Static light scattering 3.4.12凝胶阻滞实验EMSA-electrophoretic mobility shift assay 3.5蛋白生化实验技术 3.5.1蛋白酶活性检测 3.5.2 ATP酶活检测 3.5.3解旋酶活性检测 3.5.4体外转录实验

一、实验目的 本实验以酵母 RNA 为材料，将 RNA 用碱水解成单核苷酸，再用离子交换柱层析进行分离，最后采用紫外吸收法进行鉴定。同时通过测定各单核苷酸的含量，可以计算出酵母 RNA 的碱基组成

利用分离的热带假丝酵母JM-1的培养液作破乳剂对冷轧乳化废水进行了生物破乳研究.该培养液在常温下8 h可使乳化废水的破乳率达97.1%,与化学破乳剂SYM+PAC 93.1%的破乳率相比具有更强的破乳活性,且受废水的pH值和温度影响很小.通过对全培养液、离心上清液、菌体和空白培养基的破乳效果对比表明,代谢过程中产生的生物表面活性剂是生物破乳的主要活性成分.热带假丝酵母JM-1菌株发酵液用于冷轧乳化废水破乳具有破乳率高、浮渣少及不产生二次污染等优点,可作为冷轧乳化废水的生物破乳剂

基础实验 实验 1 培养基的配制.1 实验 2 消毒与灭菌.5 实验 3 微生物的接种技术.13 实验 4 微生物分离与纯化技术.16 实验 5 圆褐固氮菌的分离、纯化与测定.19 实验 6 从病鱼体上分离、纯化病原菌.22 实验 7 噬菌体分离、纯化与效价的测定.24 实验 8 各种微生物菌落形态的观察.30 实验 9 细菌个体形态的观察.34 实验 10 细菌细胞单染色观察.36 实验 11 细菌的革兰氏染色.39 实验 12 细菌鞭毛染色与观察.42 实验 13 细菌芽孢染色与观察.45 实验 14 细菌荚膜染色与观察.47 实验 15 放线菌的形态观察.49 实验 16 酵母菌的形态观察.51 实验 17 霉菌的形态观察.54 附：在中学生物学教学中，如何观察微生物.57 实验 18 细菌和酵母菌体大小的测量.59 实验 19 微生物数量的测定.63 实验 20 细菌生理生化反应试验.73 实验 21 多项微量生化反应快速鉴定技术.86 实验 22 氧影响微生物生长的试验.90 实验 23 厌氧微生物的培养.95 实验 24 温度影响微生物生长的试验.100 实验 25 不同 NaCl 浓度影响微生物生长的试验.102 实验 26 pH 影响微生物生长的试验.104 实验 27 不同碳源物质对微生物培养生长的影响.106 实验 28 微生物菌种保藏.108 实验 29 免疫血清的制备.110 实验 30 凝集反应.113 实验 31 沉淀反应.116 综合实验 实验 32 水中细菌学检查.119 I 水中细菌总数的测定.119 I I 水中大肠菌群的检测 . . . . . . . . . . .123 实验 33 酒精发酵及糯米甜酒的酿制.128 实验 34 高淀粉酶活性枯草芽孢杆菌菌株的筛选与育种技术.130 实验 35 食用菌培养. 135

本实验为学生提供一个较全面的实践机会，学习如何提取纯化、分析鉴定一种酶， 并对这种酶的性质，尤其是动力学性质作初步的研究。 自 1860 年 Bertholet 从酒酵母 Sacchacomyces Cerevisiae 中发现了蔗糖酶以来，它已 被广泛地进行 了研究

实验一 普通光学显微镜的使用和维护 实验二 细胞染色及形态观察 实验三 霉菌的形态结构观察 实验四 酵母菌的形态观察及大小测定 实验五 酵母细胞的死活鉴定与镜检计数 实验六 微生物群体形态的观察 实验七 培养基的配制与灭菌 实验八 微生物的接种方法 实验九 微生物菌种的分离、纯化和培养 实验十 细菌的生理生化反应 实验十一 微生物的平板菌落计数法 实验十二 食品中细菌总数的测定 实验十三 食品中大肠菌群的测定