第一节 概述 第二节 基因治疗的基本流程 一．克隆治疗基因 二．载体的选择与构建 三．选择合适的靶细胞 四．基因转移 五．基因转染细胞的筛选与鉴定 六．回输体内 第三节 基因治疗的临床研究

1985年PE -cetusMullis-公司的人类遗传研究室等人发 明了具有划时代意义的聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)。此技术能够特异地扩增任何所希望的目 的基因或DNA片段。在基础和临床医学、法医、考古等方 面有重要的应用价值,并对分子生物学技术的发展给予巨 大的推动

酶工程在医学方面的应用是研究和解决酶在医学上应用时的各种技术问题。现代分子生物学 认为生物活动的正常进行都依赖于机体内部生化反应的平衡和稳定,这种复杂而有序的生化反应 需要酶来催化调节,以控制体内代谢的正常进行。因此,一旦疾病发生,究其根本原因都与酶有 直接或间接的关系

粘类小茭雄性不育系育性特异性研究及其快速定向转育体系的建拓 等发现父本的细胞质基因也可能渗漏到杂种一代[的。RAPD通常为显性标记,理论 上,如果母本、父本的RAPD扩增产物中有(或无)某一产物时,杂种一代的扩增产物 应该也有(或无)该特定产物

Entrez系统 NCB综合数据库 ·美国国家生物技术信息中心(National Center for Biotechnology Information, 称NCBI)创建于1988年。 1991年,NCBI开发 Entrez了数据库查询系 统,用于对 GenBank等分子生物学和生物 医学文献摘要(Medline)等数据库的查询 (Schuler et al, 1996)

人类对微生物世界的认识过程 一、感性认识阶段(史前时期) 二、形态学发展阶段(初创时期) 三、生理学发展阶段(奠基时期) 四、分子生物学发展阶段(成熟时期)

蛋白质(protein)在生物体内具有广泛和重要的生理功能,它不仅是各器官、组织 的主要化学组成,且生命活动中各种生理功能的完成大多是通过蛋白质来实现的,而且 蛋白质在其中还起着关键的作用,所以蛋白质是生物化学学科中传统、基础的内容,在 分子生物学学科中又是发展最快、最重要的部分之一, protein一词就是来自1938年 Jons Berzelius创造的希腊单词 protios,意为第一或最重要的意思

1.了解某一特定组织或细胞某一特定mRNA转录量的变化,如 RT-PCR、 Northernblot等 2.了解某一特定组织或细胞全部mRNA转录量的变化,如 DD-PCR、基因芯片等。 3.获得某一特定组织或细胞全部mRNA,以便建立cDNA库等

1.鉴定。鉴定所培养的单菌落中是否含有重组质粒,或仅含有自身环化的质粒。如 前所述,前者电泳后会出现大小不等的两条DNA条带,一条为线性质粒载体的DNA,另 条为插入的目的基因;后者仅有一条载体的DNA条带。比如 DDPCR、 RACEPCR、细 胞库筛选、基因重组,等

1.重组质粒的鉴定。当质粒的重组或其它载体重组后,通常会发生质粒的重组失 败,包括质粒的自身环化。因而要求进行筛选,把重组成功的质粒找出来。在目前常用的 质粒和其它载体中含有相应的抗生素抗性基因,一旦重组成功,质粒环化(包括自身环 化),抗生素抗性基因表达,被转化的大肠杆菌便具备抗相应抗生素的能力,可以含该抗生 素的培养基中生长传代,不然,重组失败,大肠杆菌便不能抵抗该抗生素而死亡