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实验一 质粒的制备 实验二 DNA 的琼脂糖凝胶电泳 实验三 外源 DNA 片段在质粒载体中的克隆 实验四 感受态细胞的制备 实验五 质粒的转化及转化子的鉴定 实验六 PCR 技术 实验七 植物总 DNA 的快速少量抽提( CTAB 法) 实验八 总 DNA 质量检测及酶切 实验九 电泳、转膜 实验十 RNA Extraction (mini prep) 实验十一 RT-PCR 实验 附录 试剂配方 一 细菌培养试剂 二 质粒抽提试剂 三 DNA 操作试剂 四 RNA 操作试剂
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第一节 碱基、核苷、核苷酸 第二节 磷酸二酯键与多核苷酸 第三节 碱基的性质和核酸结构 第四节 DNA的分子结构 4.1 DNA的一级结构 4.2 DNA的二级结构 4.3 DNA的三级结构 4.4 DNA的存在形式 第五节 RNA的分子结构 第六节 核酸的理化性质——物理
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实验一 利用 TSL 从全血中直接制备人类染色体 DNA 实验二 外周血基因组 DNA 的提取 实验三 基因突变分析(PCR-SSCP) 实验四 质粒 DNA 的提取 实验五 DNA 的限制性酶切和琼脂糖凝胶电泳 实验六 DNA 片段的回收与纯化 实验七 大肠杆菌感受态细胞的制备及转化
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第一节DNA复制的基本过程和共同特点 第二节原核生物DNA的复制 第三节真核生物DNA的复制 第四节某些病毒DNA的复制
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一、概述 二、限制性内切核酸酶 1、限制性核酸内切酶的分类 2、限制性核酸内切酶的命名原则 3、限制性核酸内切酶的基本特征 4、影响限制性内切酶的活性因素 5、限制性核酸内切酶的应用 三、DNA连接酶 1、DNA连接酶的基本特性 2、DNA片段的连接方式 3、影响连接反应的因素 四、其他工具酶 1、DNA聚合酶 2、DNA及RNA的修饰酶 3、核酸酶
文档格式:PPT 文档大小:1.32MB 文档页数:83
第三节 DNA重组技术过程 1、制备目的基因和相关载体 2、将目的基因和有关载体进行连接 3、将重组本DNA导入受体细胞 4、DNA重组体的筛选和鉴定 5、DNA重组体的扩增、表达和其他研究 第五节 利用重组DNA技术可对基因进行改造 第六节 克隆基因在适当宿主细胞内表达
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1. 掌握狂犬病病毒生物学性状、致病性和防治原则 2. 掌握人乳头瘤病毒致病性 3. 了解天花病毒致病性 第一节 狂犬病病毒 Rabies virus • 狂犬病病毒属于弹状病毒科(Rhabdoviridae) 狂犬病病毒属(lyssavirus) • 是一种嗜神经性病毒 • 可以引起犬、猫和多种野生动物的自然感染,并可通过动物咬伤或密切接触等形式在动物间或动物人类间传播而引起狂犬病 第二节 人乳头瘤病毒 • 属于乳多空病毒科(Papovaviridae)乳头瘤病毒属(papillomavirus) • 主要引起人类皮肤粘膜的增生性病变 • 高危性HPV(16型、18型等)与子宫颈癌等恶性肿瘤的发生密切相关 • 低危性HPV(6型、11型等)引起生殖器尖锐湿疣 第三节 细小DNA病毒 • 是一类具有单股DNA基因组、形态最小的DNA病毒 • 对人致病的细小DNA病毒有 – 红病毒属(Erythrovirus)的B19病毒(human parvovirus B19, B19) – 博卡病毒属(Bocavirus)的人类博卡病毒(human Bocavirus,HBoV) – 依赖病毒属(Dependovirus)的腺病毒伴随病毒(Adeno-associated viruses, AAV) 第四节 痘病毒 • 痘病毒科 • 体积最大和结构最复杂的DNA病毒 • 对人有致病性的是天花病毒和传染性软疣病毒 第五节 博尔纳病病毒 • 是副粘病毒科(Paramyxoviridae)博尔纳病病毒属(Bornavirus)的原型病毒 • 病毒颗粒呈球型,有包膜 • 核酸为8,900bp的非分节段、线性、单负链RNA • 转录和复制在细胞核内进行
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第三节 DNA重组技术过程 1、制备目的基因和相关载体 2、将目的基因和有关载体进行连接 3、将重组本DNA导入受体细胞 4、DNA重组体的筛选和鉴定 5、DNA重组体的扩增、表达和其他研究 第五节 利用重组DNA技术可对基因进行改造 第六节 克隆基因在适当宿主细胞内表达
文档格式:PPT 文档大小:9.18MB 文档页数:119
生命科学的核心问题: 生命是什么? 终极问题,最后Boss 一个 DNA (Gene)---- Gain/lost of function 多个或一组 DNA (Genes/ genome)----系统,网络 合成生物? 干细胞组织工程?克隆动物(人)? 肿瘤,转基因动物(绿色荧光小鼠),遗传病 DNA is very important ! • DNA的碱基排列(ATGC)顺序(sequence) 储存着遗传信息,进而决定物种性状; • 人的核内DNA有3X10^9个碱基对,以23对染 色体形式存在。 Decoding the genome: classical methods and ideas Mapping open chromatin in cd28/ctl4/icos locus region during T cells activation
文档格式:PPT 文档大小:2.4MB 文档页数:192
重点:掌握中心法则;半保留复制、半不连续复制、反转录、基因工程的概念;参与DNA复制的有关酶类和蛋白质及DNA的复制过程;DNA损伤修复的方式。 难点:对DNA的半保留复制、半不连续复制的理解。 第一部分 DNA的生物合成 第二部分 RNA的生物合成
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