• 基因工程 ( genetic engineering)、基因 克隆、DNA重组、DNA克隆、分子克隆 • 克隆（clone） 无性繁殖 – 应用酶学的方法，在体外将目的基因与载体 DNA结合成一具有自我复制能力的DNA分 子（复制子、重组体），继而通过转化或转 染宿主细胞、筛选出含有目的基因的转化子 细胞，再进行扩增、提取获得大量同一DNA 分子拷贝，或其表达产物

DNA复制概述 an overview 复制子(Replicons):以单一单位复制的任一段DNA 称为复制子,在单个复制子内部,DNA复制从起始点开始复制,通常复制叉从起始点(origin)两个方 向进行复制,随着双链的解链模板被复制直至终点 (terminus) 每个复制子使用一次,并且在每个细胞周期中只使 用一次。原核基因组中只含一个复制子,细菌染色体本身就是一个最大的复制子

第三节 DNA重组技术过程 1、制备目的基因和相关载体 2、将目的基因和有关载体进行连接 3、将重组本DNA导入受体细胞 4、DNA重组体的筛选和鉴定 5、DNA重组体的扩增、表达和其他研究 第五节 利用重组DNA技术可对基因进行改造 第六节 克隆基因在适当宿主细胞内表达

一、概述 二、限制性内切核酸酶 1、限制性核酸内切酶的分类 2、限制性核酸内切酶的命名原则 3、限制性核酸内切酶的基本特征 4、影响限制性内切酶的活性因素 5、限制性核酸内切酶的应用 三、DNA连接酶 1、DNA连接酶的基本特性 2、DNA片段的连接方式 3、影响连接反应的因素 四、其他工具酶 1、DNA聚合酶 2、DNA及RNA的修饰酶 3、核酸酶

内容与学习要求 结合前面对DNA代谢的学习，补充介绍DNA损伤修复的知识 内容 学习要求 了解DNA修复的相关知识，了解DNA损伤修复重要意义和研究进 展

第三节 DNA重组技术过程 1、制备目的基因和相关载体 2、将目的基因和有关载体进行连接 3、将重组本DNA导入受体细胞 4、DNA重组体的筛选和鉴定 5、DNA重组体的扩增、表达和其他研究 第五节 利用重组DNA技术可对基因进行改造 第六节 克隆基因在适当宿主细胞内表达

Although DNA replication, repair, homologous recombination occur with high fidelity to ensure the genome identity between generations, there are genetic processes that rearrange DNA sequences and thus lead to a more dynamic genome structure Two classes of genetic recombination for DNA rearrangement: • Conservative site-specific recombination (CSSR): recombination between two defined sequence elements • Transpositional recombination (Transposition): recombination between specific sequences and nonspecific DNA sites

1. 掌握狂犬病病毒生物学性状、致病性和防治原则 2. 掌握人乳头瘤病毒致病性 3. 了解天花病毒致病性 第一节 狂犬病病毒 Rabies virus • 狂犬病病毒属于弹状病毒科（Rhabdoviridae） 狂犬病病毒属（lyssavirus） • 是一种嗜神经性病毒 • 可以引起犬、猫和多种野生动物的自然感染，并可通过动物咬伤或密切接触等形式在动物间或动物人类间传播而引起狂犬病 第二节 人乳头瘤病毒 • 属于乳多空病毒科（Papovaviridae）乳头瘤病毒属（papillomavirus） • 主要引起人类皮肤粘膜的增生性病变 • 高危性HPV（16型、18型等）与子宫颈癌等恶性肿瘤的发生密切相关 • 低危性HPV（6型、11型等）引起生殖器尖锐湿疣 第三节 细小DNA病毒 • 是一类具有单股DNA基因组、形态最小的DNA病毒 • 对人致病的细小DNA病毒有 – 红病毒属（Erythrovirus）的B19病毒（human parvovirus B19, B19） – 博卡病毒属（Bocavirus）的人类博卡病毒（human Bocavirus，HBoV） – 依赖病毒属（Dependovirus）的腺病毒伴随病毒（Adeno-associated viruses, AAV） 第四节 痘病毒 • 痘病毒科 • 体积最大和结构最复杂的DNA病毒 • 对人有致病性的是天花病毒和传染性软疣病毒 第五节 博尔纳病病毒 • 是副粘病毒科（Paramyxoviridae）博尔纳病病毒属（Bornavirus）的原型病毒 • 病毒颗粒呈球型，有包膜 • 核酸为8,900bp的非分节段、线性、单负链RNA • 转录和复制在细胞核内进行

生命科学的核心问题： 生命是什么？ 终极问题,最后Boss 一个 DNA （Gene）---- Gain/lost of function 多个或一组 DNA （Genes/ genome）----系统，网络 合成生物？ 干细胞组织工程？克隆动物（人）？ 肿瘤，转基因动物（绿色荧光小鼠），遗传病 DNA is very important ! • DNA的碱基排列（ATGC）顺序（sequence） 储存着遗传信息，进而决定物种性状； • 人的核内DNA有3X10^9个碱基对，以23对染 色体形式存在。 Decoding the genome: classical methods and ideas Mapping open chromatin in cd28/ctl4/icos locus region during T cells activation

DNA的复制（以DNA为模板合成DNA） RNA的转录（以DNA为模板合成RNA） RNA的逆转录（以RNA为模板合成DNA） RNA的复制（以RNA为模板合成RNA）