1.重组质粒的鉴定。当质粒的重组或其它载体重组后,通常会发生质粒的重组失 败,包括质粒的自身环化。因而要求进行筛选,把重组成功的质粒找出来。在目前常用的 质粒和其它载体中含有相应的抗生素抗性基因,一旦重组成功,质粒环化(包括自身环 化),抗生素抗性基因表达,被转化的大肠杆菌便具备抗相应抗生素的能力,可以含该抗生 素的培养基中生长传代,不然,重组失败,大肠杆菌便不能抵抗该抗生素而死亡

殊性原生质体融合技术起源于 20 世纪 60 年代, 是基因重 组技术的一部分。它通过一定的理化条件处理, 使外源目的 基因进入受体细胞, 并得以表达, 以期使得受体细胞在原有 性状的基础上, 获得所需的新的特状

教学内容： 抗体工程制药研究进展： 了解：抗体工程制药的概念、背景、发展历程；抗体工程制药在医学中的应用； 什么是抗体工程制药技术： 掌握：单克隆抗体的制备技术；杂交瘤技术的基本原理；基因工程抗体的类型与特点； 抗体工程制药的发展趋势； 基因工程抗体 人鼠嵌合抗体 人源化抗体 全人抗体 抗体工程的发展历程 全球抗体药物研究现状 我国抗体药物研究现状 抗体工程制药的应用 抗体工程制药技术 单克隆抗体制备技术 Fab抗体药物 二、人源性抗体 噬菌体抗体库技术 转基因动物表达抗体 B细胞技术

DNA是储存遗传信息的物质,亲代的遗传信息如何真实地传给子代,这个问题的实质就 是DNA分子如何复制(replication)成完全相同的两个拷贝,即DNA的合成,可见通过复 制,遗传信息得以在传代中保留。 DNA分子中的遗传信息又如何表达呢?现知基因表达的第一步是通过转录 (transcription),即DNA的碱基按互补配对(g-c,a-t,a-u)的原则转变为RNA分子上相 应的碱基序列,接着RNA通过翻译(translation),以三个碱基的序列作为一个氨基酸的遗 传密码,从而决定蛋白质的一级结构

实验一 细菌感受态的制备和质粒的转化 实验二 碱变性法提取质粒 DNA 实验三 水平式琼脂糖凝胶电泳法检测 DNA 实验四 DNA 的限制性内切酶酶切 实验五 DNA 的回收与连接 实验六 基因的 PCR 扩增 实验七 用温度敏感型启动子表达系统表达目的基因 实验八 基因组合生物合成新化合物 实验九 药用甘草片中甘草酸含量的分析及其质量评价 实验十 牛奶中酪蛋白和乳蛋白素粗品的制备 实验十一 固定化细胞法生产 L-天冬氨酸和 L-丙氨 实验十二 重组水蛭素Ⅲ的制备 实验十三 酸醇提取法制备猪胰岛素 实验十四 多肽缩宫素的 Fmoc 固相合成 实验十五 酵母 RNA 的制备和单核苷酸的离子交换柱层析分析 实验十六 单核苷酸衍生物制备 实验十七 胰弹性蛋白酶的制备及活力测定 实验十八 超氧化物歧化酶的分离纯化 实验十九 重组门冬酰胺酶Ⅱ的纯化与分析

实验一 细菌感受态的制备和质粒的转化. 2 实验二 碱变性法提取质粒 DNA . 6 实验三 水平式琼脂糖凝胶电泳法检测 DNA . 11 实验四 DNA 的限制性内切酶酶切 . 15 实验五 DNA 的回收与连接 . 18 实验六 基因的 PCR 扩增. 23 实验七 用温度敏感型启动子表达系统表达目的基因. 29 实验八 基因组合生物合成新化合物. 36 实验九 药用甘草片中甘草酸含量的分析及其质量评价. 47 实验十 牛奶中酪蛋白和乳蛋白素粗品的制备. 48 实验十一 固定化细胞法生产 L-天冬氨酸和 L-丙氨酸. 50 实验十二 重组水蛭素Ⅲ的制备. 57 实验十三 酸醇提取法制备猪胰岛素. 65 实验十四 多肽缩宫素的 Fmoc 固相合成法. 70 实验十五 酵母 RNA 的制备和单核苷酸的离子交换柱层析分析. 76 实验十六 单核苷酸衍生物制备. 82 实验十七 胰弹性蛋白酶的制备及活力测定. 85 实验十八 超氧化物歧化酶的分离纯化. 89 实验十九 重组门冬酰胺酶Ⅱ的纯化与分析. 97

把一个有用的目的DNA片段通过重组DNA技术送进受体细胞中去进行繁殖和表达的工具叫 载体(Vector).细菌质粒是重组DNA技术中常用的载体。 质粒(Plasmid)是一种染色体外的稳定遗传因子,大小从1-200kb不等,为双链、闭环的DNA分子, 并以超螺旋状态存在于宿主细胞中。质粒主要发现于细菌、放线菌和真菌细胞中,它具有自主复制 和转录能力能在子代细胞中保持恒定的拷贝数并表达所携带的遗传信息

9.1DNA作为主要遗传物质的证据 9.2DNA的结构、复制及其损伤修复 9.3基因的概念与发展 9.4遗传信息的表达与调控 9.5核酸研究技术简介 9.6人类基因组计划简介 9.7遗传工程及其应用

什么是信息?信息是“含义”,是一种“代码”,它被用来精确地描述物体或事 件(以消除不确定性)。信息是独立于物质和能量以外的自然的第二属性。例 如,生物基因包含了物种遗传所需的生物信息,语言是人们用来表达思想、情感 和传递知识的人类信息。计算机和网络通讯中的二进制编码是现代信息技术的 基础。当今世界是信息社会,信息已经成为与材料、能源同等甚至更为重要的资 源,成为促进和发展科学、教育、政治、经济的基础

◼ 什么是DNA芯片？ ◼ DNA芯片的原理 ◼ DNA芯片的种类 ◼ DNA芯片的应用领域 ◼ DNA表达谱数据分析 ◼ DNA芯片技术的发展与展望