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前面我们所学的凝胶过滤法、离子交换法以及电泳等一系列分离纯化生物大分子的 手段,比起早期采用的盐析法,有机溶剂及等电点沉淀法等,分离效果要好得多。但是, 这些方法中,或是利用生物大分子在一定条件下不同的溶解度、电荷分布、总电荷的不 同,或是依据其分子的大小和形状的不同。一句话,多是利用生物分子间物理和化学性 质的差异来进行分离纯化的。由于这些方法的特异性比较低,加之待分离物质之间的物 化性质差异较小,常常要综合不同的分离方法。经过许多步骤才能使生物分子达到一定 的纯度
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实验一 利用 TSL 从全血中直接制备人类染色体 DNA 实验二 外周血基因组 DNA 的提取 实验三 基因突变分析(PCR-SSCP) 实验四 质粒 DNA 的提取 实验五 DNA 的限制性酶切和琼脂糖凝胶电泳 实验六 DNA 片段的回收与纯化 实验七 大肠杆菌感受态细胞的制备及转化
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《医学微生物学与免疫学实验指导》为适应我国高等医学教育改革和发展的需要,培养新世纪的实用型医学人才,提高学生的动手、合作能力,在院校有关部门的组织支持下,经过教研室全体教师的共同努力,编写了这本实用性医学微生物学和免疫学实验指导,为了使学生在有限的时间内熟练掌握基础理论知识和基本技能。希望能借此提高学生的实验课质量,为今后的临床工作打下扎实的基础。 实验一 细菌基本形态的观察 实验二 细菌特殊结构的染色和观察 实验三 细菌培养 实验四 细菌的分布与无菌操作技术 实验五 消毒灭菌 实验六 抗链球菌溶血素“O”试验 实验七 厌氧性细菌 实验八 分枝杆菌属 实验九 螺旋体 实验十 其他细菌 实验十一 病原性真菌的检测 实验十二 病毒的分离培养 实验十三 病毒血凝试验 综合设计性实验 实验十四 细菌的生化反应 实验十五 病原性球菌感染检查与鉴定 实验十六 肠道杆菌的检测 免疫学部分 实验室规则 实验一 凝集反应 实验二 沉淀反应 实验三 细胞分离技术及 E 花环形成试验 实验四 变态反应试验 实验五 免疫标记技术 实验六 吞噬功能的检测 实验七 白细胞介素-2(IL-2)生物学活性测定
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一、实验目的 二、实验原理 三、试剂配制及关键仪器使用 四、实验操作步骤及注意事项 五、相关理论知识(自学)
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第一章生物的类群 实验一动物界的主要类群 实验二植物的主要类群 实验三实验动物解剖基础知识 实验四家兔的解剖 实验五大白鼠的解剖 第二章细胞生物学相关实验 实验一光学显微镜的构造和使用 实验二细胞的基本形态与结构 实验三细胞器的观察 实验四细胞膜的通透性和细胞的吞噬活动 实验五细胞组分的分离和鉴定 实验六 细胞骨架的显示与观察 实验七 细胞的显微测量 实验八 细胞的有丝分裂 实验九减数分裂 实验十细胞原代培养 实验十一细胞传代培养 实验十二培养细胞的换液 实验十三细胞的保存 实验十四细胞的复苏 实验十五细胞计数 实验十六细胞生长曲线(计数法) 实验十七培养细胞的分裂指数和集落形成率的测定 实验十八培养细胞的形态观察 实验十九细胞融合 第三章染色体制备与分析 实验一大白鼠骨髓细胞染色体的制备及观察 实验二人类外周血淋巴细胞培养及染色体标本制备 实验三人类非显带染色体核型分析 实验四人类染色体G显带技术及G带核型分析 实验五人类性染色质标本的制备与观察 实验六绒毛细胞染色体标本的制备 实验七脆性X染色体标本的制备与观察 实验八羊水细胞培养及染色体制备 实验九人类外周血淋巴细胞姐妹染色单体(SCE)互换技术 实验十人类染色体C带技术 实验十一人类高分辨染色体的制备和观察 第四章分子遗传学相关实验 实验一利用TSL从全血中直接制备人类染色体DNA 实验二外周血基因组DNA的提取 实验三基因突变分析(PCR-SSCP) 实验四质粒DNA的提取 实验五DNA的限制性酶切和琼脂糖凝胶电泳 实验六DNA片段的回收与纯化 实验七大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 第五章人类遗传性状及系谱分析 实验一人类某些遗传性状的观察 实验二遗传病的系谱分析 实验三人类皮肤纹理分析 第六章分子细胞遗传学相关实验 实验一荧光原位杂交技术 第七章附录 一、培养液和常用试剂配制 二、常用缓冲液配制 三、生物学与遗传学相关学科数据库网址 四、人类染色体非显带和G带核型分析报告
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目录 实验一采精 实验二精子活率、密度、畸形率和精液PH值的测定 实验三公畜精液的稀释及低温保 实验四精液的冷冻保存 实验五活体母牛的直肠触诊及直肠握输精 实验六母牛的发情鉴定 实验七妊娠诊断 实验八兔的超数排卵和卵子、胚胎的收集
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免疫化学实验包括免疫血清的制备、沉淀反应定量法、对流免疫电泳、单向定量免疫电 泳(火箭电泳)、双向定量免疫电泳(交叉免疫电泳)、微量免疫电泳以及单向双向免疫扩散、 酶联免疫吸附测定等。从内容上看这几个实验具有一定的连贯性,是免疫化学最基本的实验 方法
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实验一 细菌的简单染色 实验二 细菌的革兰氏染色 实验三 细菌的特殊染色 实验四 酵母菌的形态观察 实验五 霉菌的形态观察 实验六 微生物大小的测定 实验七 培养基的制备 实验八 干热灭菌 实验九 高压蒸汽灭菌 实验十 紫外线灭菌 实验十一 微孔滤膜过滤除菌 实验十二 微生物接种技术 实验十三 微生物的分离与纯化 实验十四 微生物的培养特征 实验十五 厌氧微生物的培养 实验十六 微生物血球计数板直接计数法 实验十七 微生物的平板菌落计数法 实验十八 细菌生长曲线的测定 实验十九 土壤中放线菌的筛选及形态观察 附录 1 实验室意外事故的处理 附录 2 实验器皿的清洗与包扎 附录 3 实验用培养基的配制 附录 4 酸碱指示剂的配制(按笔画顺序排列) 附录 5 实验用染色液及试剂的配制
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第一章 绪论 第一节 功能学科实验概述 第二节 实验室守则 第三节 实验报告 第二章 常用实验动物简介 第一节 常用实验动物的生物学特性 第二节 常用实验动物的品系 第三节 实验动物保护 第三章 动物实验基本技术 第一节 选择动物的一般方法 第二节 实验动物编号的标记方法 第三节 实验动物的捕捉和固定 第四节 实验动物的麻醉方法 第五节 实验动物常用手术方法 第六节 实验动物的采血方法 第七节 实验动物的给药途径和方法 第八节 实验动物的处死方法 第四章 实验室常用仪器、设备及手术器械 第一节 生物信号处理系统 第二节 生物信号传感器 第三节 功能学科实验常用仪器和设备 第四节 常用手术和实验器械 第五章 功能学科实验 第一节 神经、肌肉、感官系统实验 实验11 神经干动作电位电生理实验 实验12 骨骼肌的单收缩与复合收缩、神经肌接头兴奋的传递 实验13 诱发脑电实验 实验14 耳蜗微音器电位 实验15 有机磷中毒机理、症状及药物治疗 实验16 用热板法观察哌替啶等药物对小鼠的镇痛作用 第二节 心血管系统实验 实验21 心血管活动调节及药物的影响 实验22 某些因素和药物对离体蛙心活动的影响 实验23 心肌兴奋性的变化及蛙心起搏点的确定 实验24 药物对哇巴因诱发豚鼠心律失常的保护作用 实验25 在位兔心脏生理性调节及离子、药物的作用 实验26 家兔失血性休克 实验27 家兔高钾血症 实验28 家兔实验性缺血-再灌注损伤 实验29 左心室内压分析 实验210 急性右心衰竭 第三节 呼吸系统实验 实验31 呼吸调节及药物影响 实验32 缺氧 实验33 家兔急性呼吸衰竭 第四节 血液系统实验 实验41 血液凝固 实验42 红细胞渗透脆性 实验43 家兔实验性弥散性血管内凝血(DIC) 第五节 消化系统实验 实验51 胆汁分泌的调节 实验52 消化道平滑肌生理特性及药物对离体肠段的作用 第六节 泌尿系统实验 实验61 神经、体液和药物等因素对尿生成的影响 实验62 急性肾功能衰竭 第七节 人体功能实验 实验71 感觉器官生理实验 实验72 人体血压、心脏和肺功能测定 实验73 人体心率变异性分析 第八节 其它实验 实验81 药物半致死量(LD50)测定 实验82 水杨酸钠半衰期的测定 实验83 纳洛酮的催促戒断反应及药物的预防
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第一节 生物医学研究的基本途径 一、临床研究 二、实验室研究 三、临床研究和实验室研究的比较 第二节 动物实验基本方法 一、动物实验的常用方法 二、实验动物的抓取固定方法 三、实验动物编号标记方法 四、实验动物的随机分组方法 五、实验动物被毛的去除方法 六、实验动物给药途径和方法 七、实验动物用药量的确定及计算方法 八、实验动物的麻醉 九、实验动物采血方法 十、急性动物实验中常用的手术方法 十一、实验动物的急救措施 十二、实验动物的处死方法 第三节 影响动物实验效果的动物因素 一、种属 二、种系 三、年龄和体重 四、性别 五、生理状态 第四节 影响动物实验效果的动物饲养环境和营养因素 一、温度 二、湿度 三、空气的流速及清洁度 四、光照 五、音响噪音 六、动物饲养密度 七、动物营养 第五节 影响动物实验效果的动物实验技术环节因素 一、动物选择 二、实验季节 三、昼夜过程 四、麻醉浓度 五、手术技巧 六、实验药物 七、对照问题
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