1.掌握：重组DNA技术、限制性核酸内切酶、载体的概念；II型限制性内切酶的作用特点；重组DNA技术的操作步骤。2.熟悉：转化、转导及转染的概念；抗生素抗性基因筛选和蓝白斑筛选的原理。3.了解：DNA重组技术的应用及与医学的关系

• 基因工程 ( genetic engineering)、基因 克隆、DNA重组、DNA克隆、分子克隆 • 克隆（clone） 无性繁殖 – 应用酶学的方法，在体外将目的基因与载体 DNA结合成一具有自我复制能力的DNA分 子（复制子、重组体），继而通过转化或转 染宿主细胞、筛选出含有目的基因的转化子 细胞，再进行扩增、提取获得大量同一DNA 分子拷贝，或其表达产物

第三节 DNA重组技术过程 1、制备目的基因和相关载体 2、将目的基因和有关载体进行连接 3、将重组本DNA导入受体细胞 4、DNA重组体的筛选和鉴定 5、DNA重组体的扩增、表达和其他研究 第五节 利用重组DNA技术可对基因进行改造 第六节 克隆基因在适当宿主细胞内表达

一、概述 二、限制性内切核酸酶 1、限制性核酸内切酶的分类 2、限制性核酸内切酶的命名原则 3、限制性核酸内切酶的基本特征 4、影响限制性内切酶的活性因素 5、限制性核酸内切酶的应用 三、DNA连接酶 1、DNA连接酶的基本特性 2、DNA片段的连接方式 3、影响连接反应的因素 四、其他工具酶 1、DNA聚合酶 2、DNA及RNA的修饰酶 3、核酸酶

◼ DNA的结构 ◼ 染色体 ◼ DNA的复制 ◼ DNA的修复 ◼ DNA的转座

Although DNA replication, repair, homologous recombination occur with high fidelity to ensure the genome identity between generations, there are genetic processes that rearrange DNA sequences and thus lead to a more dynamic genome structure Two classes of genetic recombination for DNA rearrangement: • Conservative site-specific recombination (CSSR): recombination between two defined sequence elements • Transpositional recombination (Transposition): recombination between specific sequences and nonspecific DNA sites

◼ 染色体 ◼ DNA的结构 ◼ DNA的复制 ◼ DNA的修复 ◼ DNA的转座

第三节 DNA重组技术过程 1、制备目的基因和相关载体 2、将目的基因和有关载体进行连接 3、将重组本DNA导入受体细胞 4、DNA重组体的筛选和鉴定 5、DNA重组体的扩增、表达和其他研究 第五节 利用重组DNA技术可对基因进行改造 第六节 克隆基因在适当宿主细胞内表达

第一节 DNA复制 Section 2 Enzymes in DNA replication Section 3 process of DNA replication Section 4 Reverse transcription and others Section 5 DNA damage and repair

DNA复制概述 an overview 复制子(Replicons):以单一单位复制的任一段DNA 称为复制子,在单个复制子内部,DNA复制从起始点开始复制,通常复制叉从起始点(origin)两个方 向进行复制,随着双链的解链模板被复制直至终点 (terminus) 每个复制子使用一次,并且在每个细胞周期中只使 用一次。原核基因组中只含一个复制子,细菌染色体本身就是一个最大的复制子