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一、概述 二、限制性内切核酸酶 1、限制性核酸内切酶的分类 2、限制性核酸内切酶的命名原则 3、限制性核酸内切酶的基本特征 4、影响限制性内切酶的活性因素 5、限制性核酸内切酶的应用 三、DNA连接酶 1、DNA连接酶的基本特性 2、DNA片段的连接方式 3、影响连接反应的因素 四、其他工具酶 1、DNA聚合酶 2、DNA及RNA的修饰酶 3、核酸酶
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Chapter 1: Plasmids and Their Usefulness in Molecular Cloning Chapter 2: Bacteriophage and Its Vectors Chapter 3: Working with Bacteriophage M13 Vectors Chapter 4: Working with High-Capacity Vectors Chapter 5: Gel Electrophoresis of DNA and Pulsed-Field Agarose Chapter 6: Preparation and Analysis of Eukaryotic Genomic DNA Chapter 7: Extraction, Purification, and Analysis of mRNA from Eukaryotic Cells Chapter 8: In Vitro Amplification of DNA by the Polymerase Chain Reaction Chapter 9: Preparation of Radiolabeled DNA and RNA Probes Chapter 10: Working with Synthetic Oligonucleotide Probes Chapter 11: Preparation of cDNA Libraries and Gene Identification Chapter 12: DNA Sequencing Chapter 13: Mutagenesis Chapter 14: Screening Expression Libraries Chapter 15: Expression of Cloned Genes in Escherichia coli Chapter 16: Introducing Cloned Genes into Cultured Mammalian Cells Chapter 17: Analysis of Gene Expression in Cultured Mammalian Cells Chapter 18: Protein Interaction Technologies
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染色体 DNA的结构 DNA的复制 DNA的修复 DNA的转座
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第三节 DNA重组技术过程 1、制备目的基因和相关载体 2、将目的基因和有关载体进行连接 3、将重组本DNA导入受体细胞 4、DNA重组体的筛选和鉴定 5、DNA重组体的扩增、表达和其他研究 第五节 利用重组DNA技术可对基因进行改造 第六节 克隆基因在适当宿主细胞内表达
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第一节 概 述 第二节 从植物组织提取基因组 DNA 第三节 从动物组织提取基因组 DNA 第四节 细菌基因组 DNA 的制备 第五节 基因组 DNA 的检测
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把一个有用的目的DNA片段通过重组DNA技术送进受体细胞中去进行繁殖和表达的工具叫 载体(Vector).细菌质粒是重组DNA技术中常用的载体。 质粒(Plasmid)是一种染色体外的稳定遗传因子,大小从1-200kb不等,为双链、闭环的DNA分子, 并以超螺旋状态存在于宿主细胞中。质粒主要发现于细菌、放线菌和真菌细胞中,它具有自主复制 和转录能力能在子代细胞中保持恒定的拷贝数并表达所携带的遗传信息
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1.掌握:重组DNA技术、限制性核酸内切酶、载体的概念;II型限制性内切酶的作用特点;重组DNA技术的操作步骤。2.熟悉:转化、转导及转染的概念;抗生素抗性基因筛选和蓝白斑筛选的原理。3.了解:DNA重组技术的应用及与医学的关系
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一、染色体 二、DNA的结构 三、DNA的复制 四、DNA的修复 五、DNA的转座
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第一节DNA的生物合成(复制) 一、DNA复制方式 二、参与DNA复制的因子 三、DNA复制过程 四、逆转录 五、DNA损伤的修复 第二节RNA的生物合成(转录) 第三节蛋白质的生物合成(翻译)
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第一节 DNA 的生物合成. 294 一、半保留复制 . 294 二、逆向转录 . 306 三、DNA 突变. 306 四、DNA 损伤与修复. 307 第二节 RNA 的生物合成. 312 一、DNA 的转录. 312 二、转录后加工 . 316 三、RNA 的复制. 317 第三节 基因工程简介 . 318 一、基因工程的概念 . 318 二、基因工程的操作技术 . 319 三、DNA 的固相合成. 323 四、PCR 技术. 324 五、基因工程的应用与展望 . 325
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