一、制备大量目的基因片段 二、重组DNA 三、宿主细胞 四、重组子的筛选 五、表达蛋白的收集，纯化

• 基因工程 ( genetic engineering)、基因 克隆、DNA重组、DNA克隆、分子克隆 • 克隆（clone） 无性繁殖 – 应用酶学的方法，在体外将目的基因与载体 DNA结合成一具有自我复制能力的DNA分 子（复制子、重组体），继而通过转化或转 染宿主细胞、筛选出含有目的基因的转化子 细胞，再进行扩增、提取获得大量同一DNA 分子拷贝，或其表达产物

一、突变的分子基础 二、重组的分子基础 三、转座遗传因子 四、DNA损伤的修复

一、 概念（每题 2 分，共 16 分） 1、单体 2、整倍体 3、重组修复 4、转基因动物 5、DNA 重组技术 6、基因重排 7、DNA 指纹 8、Chi 结构

第一节 基因组DNA片断化 第二节 化学合成目的基因 第三节 目的基因的保存与文库构建 第四节 目的基因的分离和扩增 第五节 DNA片段的体外连接 第六节 重组体导入细菌细胞 第七节 外源基因导入真核细胞 第一节 载体表型选择法 第二节 根据插入基因的表型选择 第三节 DNA电泳检测法 第四节 核酸杂交检测法 第五节 免疫化学检测法 第六节 转译筛选法 第七节 几种常用的真核生物重组基因选择方法

▪ 第一节 遗传变异的物质基础 ▪ 第二节 细菌基因转移和重组 ▪ 第三节 真菌的基因重组 ▪ 第四节 微生物的突变 ▪ 第五节 微生物遗传变异应用 ▪ 第六节 菌种退化,复壮和保藏

• 基础知识 • 克隆载体及基因克隆 • cDNA文库/Genomic DNA文库 • 表达载体 • 重组DNA技术的应用

1 噬菌体的突变型及基因重组的特点； 2 噬菌体的互补测验与顺反子测定； 3 用两点测交与三点测交测定噬菌体交换值; 4 噬菌体基因组结构特点； 5 原噬菌体对细菌基因重组的影响(合子诱导）;

1.质粒DNA的小量快速制备 2.质粒DNA的限制性内切酶酶切 3.DA的琼脂糖凝胶电泳

第三节 基因重组和杂交育种 第四节 基因工程 第五节 菌种的衰退、复壮和保藏