一、针对不同的产物表达形式采取不同的策略 二、针对不同性质的重组蛋白选择不同的层析类型 三、多种分离纯化技术的联合运用 四、合适分离纯化介质的选择

第一节 菌种的分离简介 第二节 培养分离 第三节 工业菌种的育种方针 第四节 诱变育种 第五节 营养缺陷型的选育 第六节 基因育种 第七节 杂交育种 第八节 原生质体育种 第九节 筛选新的代谢产物 第十节 工业微生物菌种保藏技术

蛋白质的分类 蛋白质的组成单位-氨基酸 肽 蛋白质的结构 蛋白质结构与功能的关系 蛋白质的性质与分离、分析技术

通过对本章的学习，使学生熟悉临床样本处理的一般原则；常见临床样本的处理方法（血液标本、棉拭子等）。掌握DNA、RNA的分离纯化与质量鉴定。意识到检验前的质量 控制对保证检验结果重要性。同时也要清楚检验前是整个检验环节中最难控制的环节，也是导致检验结果差错最多的环节。 第一节 临床标本的处理 第二节 生物样本分离纯化与质量鉴定

第一章 蛋白质（酶）、核酸的分离纯化 第一节 引言 一、分离纯化的意义 二、分离纯化的要求 三、分离纯化的一般程序 第二节 蛋白质（酶）、核酸分离纯化的前处理 一、材料的选择与预处理 二、细胞的破碎 三、细胞器的分离 四、提取 第三节 分离纯化 一、 粗提纯 二、 精提纯 三、 纯度鉴定 第四节 生物大分子的浓缩、干燥及保存 第二章 离心技术 ▪ 离心技术概论 ▪ 一般制备离心 ▪ 超离心技术 第三章 层析技术 引言 层析法的基本原理 层析法的分类 第一节 吸附层析技术 第二节 分配层析技术 第三节 凝胶过滤层析技术 第四节 离子交换层析法 第五节 亲和层析法 第六节 高压液相层析（HPLC） 第四章 电泳技术 引言 第一节 电泳的基本原理 第二节 聚丙烯酰胺凝胶电泳 第三节 琼脂糖凝胶电泳 第四节 免疫电泳 一、概述 二、聚丙烯酰胺凝胶的制备 三、凝胶浓度和交联度与孔径大小的关系 四、不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳

第一章生物化学实验基本知识与操作 第一节生物化学实验基本知识 第二节 第二章分光光度技术 实验一双缩脲法测定蛋白质浓度 实验二 Folin-酚试剂法(Lowry 法)测定蛋白质浓度 实验三紫外分光光度法测定蛋白质浓度 实验四考马斯(Comessie)亮兰结合法测定蛋白质浓度 实验五BCA 法测定蛋白质浓度 实验六激素对血糖浓度的影响及血糖的测定 第三章生物大分子的提取、沉淀和离心分离技术 第一节生物材料的选取与预处理 第二节生物大分子的沉淀分离技术 第三节生物大分子离心分离技术 实验七鸡血SOD的提取、分离及活力测定 实验八碱性磷酸酶的制备及活力测定 实验九酪蛋白的制备 实验十动物肝脏中提取DNA 实验十一猪心肌细胞线粒体可溶性ATP合酶的提 第四章电泳技术 实验十二DNA 琼脂糖凝胶电泳 实验十三血浆脂蛋白琼脂糖凝胶电泳 实验十四聚丙烯酰胺凝胶电泳分离乳酸脱氢酶同工酶 实验十五蛋白质分子量的测定——SDS-聚丙烯凝胶电泳 实验十六聚丙烯酰胺等电聚焦电泳 第五章层析技术 第一节 层析技术概述 吸附层析 第三节 分配层析 第四节 离子交换层析 第五节 凝胶层析 第六节亲和层析 第七节 高效液相层析 实验十七氨基酸的纸上层析与氨基酸的转氨基作用 实验十八血清-球蛋白的分离纯化与鉴定 实验十九 亲和层析纯化胰蛋白酶 实验十二离子交换层析分离氨基酸 实验二十一蛋白质分子量测定——凝胶过滤层析法 第六章 分子生物学基本技术 核酸分子杂交 聚合酶链反应 第三节分子克隆 实验二十二Southern杂交分析 实验二十三 Northern 杂交分析 实验二十四 PCR 基因扩增 验二十五质粒DNA的提取及酶切 实验二十六 DNA重组实验 实验二十七大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 附录一常用缓冲液的配制方法 附录二易变质及需要特殊方法保存的试剂 附录三一般化学试剂的分级 附录四 English words in the lab

1、掌握： （1）体外受精的概念及意义，卵母细胞的采集和成熟培养，精子的获得与获能，体外受精的基本程序，早期胚胎的培养与保存； （2）动物克隆的概念，动物克隆的种类，动物克隆技术、方法与程序； （3）转基因动物的概念, 动物性别控制的概念与方法, 动物嵌合体的概念，动物嵌合体生产方法，干细胞，胚胎干细胞，组织干细胞。 2、理解： （1）胚胎移植的意义，辅助受精技术意义，转基因动物生产的意义； （2）转基因动物技术的主要环节,性别控制技术与意义,动物克隆技术的意义 （3）动物嵌合体的意义,胚胎干细胞的分离、克隆与培养，胚胎干细胞诱导分化，组织干细胞的分离与培养 3、了解： 胚胎干细胞与组织干细胞的应用

离心技术在生物科学，特别是在生物化学和分子生物学研究领域，已得到十分广 泛的应用，每个生物化学和分子生物学实验室都要装备多种型式的离心机。离心技术 主要用于各种生物样品的分离和制备，生物样品悬浮液在高速旋转下，由于巨大的离 心力作用，使悬浮的微小颗粒（细胞器、生物大分子的沉淀等）以一定的速度沉降， 从而与溶液得以分离，而沉降速度取决于颗粒的质量、大小和密度

离心技术在生物科学，特别是在生物化学和分子生物学研究领域，已得到十分广 泛的应用，每个生物化学和分子生物学实验室都要装备多种型式的离心机。离心技术 主要用于各种生物样品的分离和制备，生物样品悬浮液在高速旋转下，由于巨大的离 心力作用，使悬浮的微小颗粒（细胞器、生物大分子的沉淀等）以一定的速度沉降， 从而与溶液得以分离，而沉降速度取决于颗粒的质量、大小和密度

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