基本原理 双重或多重标记是利用免疫学和细胞 化学原理,在同一张切片上同时采用或先 后采用不同颜色的荧光色素或酶促产物, 或采用不同直径大小颗粒胶体金来原位示 踪组织或细胞内不同抗原大分子物质的一 项标记染色技术

1895年, BordetSerum在中发现的一组(几十 种成分)不耐热的能帮助抗体进行免疫反应,并 有杀菌作用及溶解细胞功能物质,统称补体。 定义: 补体是血清中一组不耐热的具有酶活 性的球蛋白分子,能增强抗体的作用同时 具有溶菌灭活病毒溶解细胞作用占血 清球蛋白总量的10-15%,在>56度时,可使 其失活

第一章生物化学实验基本知识与操作 第一节生物化学实验基本知识 第二节 第二章分光光度技术 实验一双缩脲法测定蛋白质浓度 实验二 Folin-酚试剂法(Lowry 法)测定蛋白质浓度 实验三紫外分光光度法测定蛋白质浓度 实验四考马斯(Comessie)亮兰结合法测定蛋白质浓度 实验五BCA 法测定蛋白质浓度 实验六激素对血糖浓度的影响及血糖的测定 第三章生物大分子的提取、沉淀和离心分离技术 第一节生物材料的选取与预处理 第二节生物大分子的沉淀分离技术 第三节生物大分子离心分离技术 实验七鸡血SOD的提取、分离及活力测定 实验八碱性磷酸酶的制备及活力测定 实验九酪蛋白的制备 实验十动物肝脏中提取DNA 实验十一猪心肌细胞线粒体可溶性ATP合酶的提 第四章电泳技术 实验十二DNA 琼脂糖凝胶电泳 实验十三血浆脂蛋白琼脂糖凝胶电泳 实验十四聚丙烯酰胺凝胶电泳分离乳酸脱氢酶同工酶 实验十五蛋白质分子量的测定——SDS-聚丙烯凝胶电泳 实验十六聚丙烯酰胺等电聚焦电泳 第五章层析技术 第一节 层析技术概述 吸附层析 第三节 分配层析 第四节 离子交换层析 第五节 凝胶层析 第六节亲和层析 第七节 高效液相层析 实验十七氨基酸的纸上层析与氨基酸的转氨基作用 实验十八血清-球蛋白的分离纯化与鉴定 实验十九 亲和层析纯化胰蛋白酶 实验十二离子交换层析分离氨基酸 实验二十一蛋白质分子量测定——凝胶过滤层析法 第六章 分子生物学基本技术 核酸分子杂交 聚合酶链反应 第三节分子克隆 实验二十二Southern杂交分析 实验二十三 Northern 杂交分析 实验二十四 PCR 基因扩增 验二十五质粒DNA的提取及酶切 实验二十六 DNA重组实验 实验二十七大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 附录一常用缓冲液的配制方法 附录二易变质及需要特殊方法保存的试剂 附录三一般化学试剂的分级 附录四 English words in the lab

第一节 核糖体的类型与结构 一、 核糖体的基本类型与成分 二、 核糖体的结构 三、 核糖体蛋白质与rRNA的功能 第二节 多聚核糖体与蛋白质的合成 一、 多聚核糖体 二、 蛋白质的合成 三、 RNA在生命起源中的地位

蛋白质合成后的分泌及加工修饰 不论是原核还是真核生物,在细胞浆内合成的蛋白质需定位于细胞特定的区 域,有些蛋白质合成后要分泌到细胞外,这些蛋白质叫做分必蛋白。在细菌细 胞内起作用的蛋白质一般靠扩散作用而分布到它们的目的地。如内膜含有参与 能量代谢和营养物质转运的蛋白质;外膜含有促进离子和营养物质进入细胞的 蛋白质;在内膜与外膜之间的间隙称为周质,其中含有各种水解酶以及营养物 质结合蛋白

第二章生物制药工艺技术基础 第一节生物材料与生物活性物质 一、生物材料的来源 供生产生物药物的生物资源主要有动物、植物、微生物的组织、器官、细胞与代谢产物。应用动植物细胞培养与微生物发酵技术也是获得生物制药原料的重要途径。基因工程技术与细胞工程技术和酶工程技术更是开发生物制药资源的新途径。 (一)动物脏器 (1)胰脏(激素、酶、多肽、核酸、多糖、氨基酸等 (2)脑脑磷脂、肌醇磷脂、经磷脂、经肽等)

细胞代谢包括物质代谢和能量代谢。细胞代谢是一个完整统一 的网络,并且存在复杂的调节机制,这些调节机制都是在基 因表达产物(蛋白质或RNA)的作用下进行的。 重点:物质代谢途径的相互联系,酶活性的调节

• 现代生物技术概况 • 基因工程与环境污染治理 • 细胞工程与环境污染治理 • 酶学工程与环境污染治理 • 发酵工程与环境污染治理 • 生态工程与污水处理系统

DNA是贮藏遗传信息的最重要的生物大分子。DNA分子中的核苷酸排列顺序不但决定了胞内所有RNA及蛋白质的基本结构,还通过蛋白质(酶)的功能间接控制了细胞内全部有效成份的生产、运转和功能发挥

第一章 概论（2 学时）.3 第二章 核酸制备（6 学时）.9 第三章 目的基因的分离（6 学时）. 17 第四章 基因操作的工具酶（4 学时）. 27 第五章 载体（6 学时）. 32 第六章 重组基因导入受体细胞（2 学时）. 42 第七章 外源目的基因的表达与调控（2 学时） . 48 第八章 基因操作中的前言技术（4 学时）. 50 第九章 植物基因工程（4 学时）. 59 第十章 动物基因工程（4 学时）. 69 第十一章 微生物基因工程（6 学时）. 77 第十二章 医药基因工程（2 学时）. 97