生物进化过程中微生物形成完善的代谢调节机制 不会有代谢产物的积累 解除或突破微生物的代谢调节控制 ↓ 目的产物积累 微生物育种的目的方法:突变、体内重组 体外重组(基因工程)

• 基因工程 ( genetic engineering)、基因 克隆、DNA重组、DNA克隆、分子克隆 • 克隆（clone） 无性繁殖 – 应用酶学的方法，在体外将目的基因与载体 DNA结合成一具有自我复制能力的DNA分 子（复制子、重组体），继而通过转化或转 染宿主细胞、筛选出含有目的基因的转化子 细胞，再进行扩增、提取获得大量同一DNA 分子拷贝，或其表达产物

第一节 碱基互补的能力 第二节 限制性内切酶 第三节 重组DNA 第四节 重组DNA方法学 第五节 DNA序列分析 第六节 基因工程 第七节 遗传病——基因诊断和基因治疗 第八节 基因工程生物技术和社会伦理问题

第一节 基因组DNA片断化 第二节 化学合成目的基因 第三节 目的基因的保存与文库构建 第四节 目的基因的分离和扩增 第五节 DNA片段的体外连接 第六节 重组体导入细菌细胞 第七节 外源基因导入真核细胞 第一节 载体表型选择法 第二节 根据插入基因的表型选择 第三节 DNA电泳检测法 第四节 核酸杂交检测法 第五节 免疫化学检测法 第六节 转译筛选法 第七节 几种常用的真核生物重组基因选择方法

9外源基因表达产物的分离纯化 A重组蛋白分离纯化方法选择的基本原则 B离子交换层析 C凝胶层析 D亲和层析 E膜分离 F原核生物表达的重组蛋白质量检测

第十二章基因工程下册P580 12-1基因工程 是对携带遗传信息的分子进行设计和施工的分子工程,包括基因重组、克隆和 表达。核心是构建重组体DNA的技术

一、目的基因( gene of irreresi)的获取 二、目的基因与载体结合成重组DIA 三、重组DNA分子引入受体细胞并表达 四、转化体细胞的扩增、鉴定与筛选

第二章 孟德尔定律 第三章 遗传的染色体学说 第四章 基因的作用及其与环境的关系 第五章 性别决定与伴性遗传 第六章 染色体和连锁群 第七章 细菌和噬菌体的重组和连锁 第八章 数量性状遗传 第九章 遗传物质的改变（一）染色体畸变 第十章 遗传物质的改变（二）基因突变 第十一章 遗传的分子基础 第十二章 突变和重组机理 第十三章 细胞质和遗传 第十四章 遗传与个体发育 第十五章 遗传和进化

(一)基因工程的概念 1.遗传工程广义;细胞工程-体细胞、原生质体的培养与杂交细器---细胞核的移植:回交,克隆羊染色体----条染色体或染色体片断的切割或转移基因工程狭义:基因工程:体外不经过有性繁殖,有目的地使DNA发生重组的技术体系。故又称重组DNA技术

把一个有用的目的DNA片段通过重组DNA技术送进受体细胞中去进行繁殖和表达的工具叫 载体(Vector).细菌质粒是重组DNA技术中常用的载体。 质粒(Plasmid)是一种染色体外的稳定遗传因子,大小从1-200kb不等,为双链、闭环的DNA分子, 并以超螺旋状态存在于宿主细胞中。质粒主要发现于细菌、放线菌和真菌细胞中,它具有自主复制 和转录能力能在子代细胞中保持恒定的拷贝数并表达所携带的遗传信息