11.1重组DNA技术是基因工程的核心技术 11.2获得需要的目的基因(外源基因) 11.3构建重组质粒和基因克隆 11.4转化受体细胞和转化子的筛选 11.5转化子的分析 Southern杂交

《园艺植物育种原理与技术》是研究园艺植物品种选育原理与方法的科学,亦是园艺植 物人工进化的科学,他是以现代生物科学及其他自然科学的成就为基础的一门综合性、理论 性较强的应用科学,其主要任务就是根据社会和生产对园艺植物品种的要求,研究园艺植物 遗传变异的规律,并采用系统选择、有性杂交、人工诱变、细胞工程及基因工程等方法,不 断地创造新种质,培育新品种,以满足市场对园艺植物(果、菜、花)品种的需要

一、数量性状 二、数量性状的遗传机制 三、研究数量性状的几个遗传参数 四、近交和杂交 五、数量性状分析的分子方法

基因诊断是利用DNA分子杂交等分子生物学技术,直接探查人体基因组DNA存在的缺陷或是基 因表达产物的异常,从而对人体状态和疾病作出诊断。基因诊断也称DNA诊断或DNA探针技术或基因探针技术,是20世纪70年代末迅速发展起来的一 项应用技术。快速灵敏、准确可靠的现代分子生物学技术是基因诊断的先决条件

一、历史回顾 140年前, Mendel在捷克莫勒温镇一个修道院里沉醉于豌豆杂交实验,也许根本就没有想到,他提出的遗传因子在半个世纪后被 Morgan定义为基因。1944 Avery年证明了基因的物质基础是DNA50年代 WatsonCrick初和又揭示了DNA的分子结构70年代初,DNA已可在体外被随意拼接并转回到细菌体内遗传和表达

(一)基因工程的概念 1.遗传工程广义;细胞工程-体细胞、原生质体的培养与杂交细器---细胞核的移植:回交,克隆羊染色体----条染色体或染色体片断的切割或转移基因工程狭义:基因工程:体外不经过有性繁殖,有目的地使DNA发生重组的技术体系。故又称重组DNA技术

燕麦( Avena sativa L.)具有许多农业上重要的性状。但小麦和燕麦分类上属不同族,亲缘 关系较远,有性杂交十分困难。近年来,在双子叶模式植物上建立的只转移供体亲本部分遗传 物质的原生质体不对称融合技术为将燕麦有益性状导入小麦提供了可能。实现体细胞杂种定 向不对称的途径有两种:是利用细胞周期停滞在间期的叶肉细胞原生质体为供体亲本与作 为受体亲本的培养细胞原生质体融合由于二者分裂速度的差异,使前者染色体大量片段化 ( fragmentation)而被消除( Bravo et al.,1985; Dudits et al.,1988);再是利用高于致死剂量的 电离射线处理供体亲本原生质体使其遗传物质大量消除后再与受体融合( Gleba et al 1990)

在进一步认识原生质膜性质的基础上,深入了解细胞融合的基本原理,掌握电融合和 PEG融合的基本方法

将种子直接用水浸泡12小时,均摆放在铺有吸水纸的培养皿中,于25℃温箱中 培养,当根长长至1-2厘米时取根尖放于0-4℃冰水中预处理22-2小时然后用3: 1(95%乙醇:冰乙酸)卡诺固定液固定2-3天,用1.5%的醋酸洋红染色2-4小对 在45%的冰乙酸中进行压片观察 §1122不同育性基因载体不育系的创制与选 用类BL/IRS小麦雄性不育系为细胞质供体,SP4、莫小麦,9011024 为核供体,采用杂交,连续回交的方法直到不育性稳定

恢复系亲本Rk5451和Rk5253分别和粘、易和二角型非1BL/1RS小麦雄性不育系 ms(kots)-224,ms(var)-224,ms(bior)-22杂交F1,恢复度均较高,除了组合ms(bior)-224 Rk5253育性恢复度为77.3%外,其育组合恢复度均达到80%以上,尤其Rk5451对3 种异质非1BL/1RS小麦雄性不育系具有较高的恢复性,这说明Rk5451对3种异质不育 系有着较强的恢复力(表Ⅱ-1)