生物体内的各种蛋白质经常处于动态更新之中,蛋白质的更新包括蛋白质的分解代 谢和蛋白质的合成代谢;前者是指蛋白质分解为氨基酸及氨基酸继续分解为含氮的代谢 产物、二氧化碳和水并释放出能量的过程。构成蛋白质的氨基酸共有20种,其共同点 是均含氨基和羧基,不同点是它们的碳骨架各不相同,因此,脱去氨基后各个氨基酸的 碳骨架的分解途径有所不同,这就是个别氨基酸的代谢,也可称之为氨基酸的特殊代 谢

第十三章多肽与蛋白质类药物 第一节多肽及蛋白质类药物的生产方法 一、蛋白质类药物的分离与纯化 (一)材料的选择 蛋白质类药物的来源有动植物组织和微生物等,原则是要选择富含所需蛋白质多肽成分的,易于提取得无害生物材料。对天然蛋白质类药物,为了提高质量、产量和降低生产成本,对原料的种属,发育阶段、生物状态、来源、解剖部位、生物技术产品的宿主菌或细胞都有一定要求,使得纯化工作相对容易

(一)蛋白质分子量测定 (1)根据化学组成测最低分子量 1.肌红蛋白、血红蛋白均含铁0335%,分别求它们的最低分子量: 肌红蛋白为558(Fe原子量)÷0.335×100=16700,与其他方法测分 子量相符。 血红蛋白含铁也是0.35%,最低分子量也为16700,但用其他方法测 分子量为68000,即每一个血红蛋白含有4个铁原子,由此计算更为准确 分子量为:16700×4=66800

一、蛋白质的定义 蛋白质(protein,简写pro):是由20种L-a-氨基 酸按一定的序列通过酰胺键(肽键)缩合而成的, 具较稳定构象并具一定生物功能的生物大分子。 Protein一词来自希腊文“Proteios”,意即“第 一位的”、“最重要的”。 18世纪 Beccari中叶首次报道应用稀酸、稀碱核 盐类可从动、植物组织中分离到含氮类物质。 1838年荷兰Mulder化学家将之应用于从动植物 细胞中所发现的复杂的有机含氮化合物。 蛋白质是一类含氮的生物高分子,分子量大,结 构复杂

实验一 细菌感受态的制备和质粒的转化 实验二 碱变性法提取质粒 DNA 实验三 水平式琼脂糖凝胶电泳法检测 DNA 实验四 DNA 的限制性内切酶酶切 实验五 DNA 的回收与连接 实验六 基因的 PCR 扩增 实验七 用温度敏感型启动子表达系统表达目的基因 实验八 基因组合生物合成新化合物 实验九 药用甘草片中甘草酸含量的分析及其质量评价 实验十 牛奶中酪蛋白和乳蛋白素粗品的制备 实验十一 固定化细胞法生产 L-天冬氨酸和 L-丙氨 实验十二 重组水蛭素Ⅲ的制备 实验十三 酸醇提取法制备猪胰岛素 实验十四 多肽缩宫素的 Fmoc 固相合成 实验十五 酵母 RNA 的制备和单核苷酸的离子交换柱层析分析 实验十六 单核苷酸衍生物制备 实验十七 胰弹性蛋白酶的制备及活力测定 实验十八 超氧化物歧化酶的分离纯化 实验十九 重组门冬酰胺酶Ⅱ的纯化与分析

实验一 细菌感受态的制备和质粒的转化. 2 实验二 碱变性法提取质粒 DNA . 6 实验三 水平式琼脂糖凝胶电泳法检测 DNA . 11 实验四 DNA 的限制性内切酶酶切 . 15 实验五 DNA 的回收与连接 . 18 实验六 基因的 PCR 扩增. 23 实验七 用温度敏感型启动子表达系统表达目的基因. 29 实验八 基因组合生物合成新化合物. 36 实验九 药用甘草片中甘草酸含量的分析及其质量评价. 47 实验十 牛奶中酪蛋白和乳蛋白素粗品的制备. 48 实验十一 固定化细胞法生产 L-天冬氨酸和 L-丙氨酸. 50 实验十二 重组水蛭素Ⅲ的制备. 57 实验十三 酸醇提取法制备猪胰岛素. 65 实验十四 多肽缩宫素的 Fmoc 固相合成法. 70 实验十五 酵母 RNA 的制备和单核苷酸的离子交换柱层析分析. 76 实验十六 单核苷酸衍生物制备. 82 实验十七 胰弹性蛋白酶的制备及活力测定. 85 实验十八 超氧化物歧化酶的分离纯化. 89 实验十九 重组门冬酰胺酶Ⅱ的纯化与分析. 97

常见有大豆、蚕豆、豌豆、赤小豆 、绿豆、云豆、豇豆等. 大豆含有较高蛋白质和脂肪,而碳 水化合物则相对较少. 蚕豆、豌豆等,含有较多碳水化合 物,中等量蛋白质及少量脂肪

从厌氧生物转化为好氧生物是生物进化中的一大进步。脊椎动物中血红蛋白 在血液中起到载氧和输氧的作用,肌红蛋白在肌肉中起贮氧和氧在肌肉中分配的作用。 (一)肌红蛋白(Mb)的结构与功能 (1)三维结构:由一条多肽链和一个血红素辅基构成,相对分子量16700, 含153个氨基酸残基。分子中多肽链由8段α-螺旋组成,分子结构致密 结实,带亲水基团侧链的氨基酸分布在分子外表面,疏水氨基酸侧链几乎 全埋在分子内部,见P253图6-1

1.1本章简介 本章旨在介绍生物信息学的基本概念,指出它在现代生物学中的重要地位。首先,我们 将简要回顾生物信息学发展的几个历史阶段,从早期的蛋白质手工测序,到今天的DNA自 动测序。读完本章,你将会发现,DNA测序自动化引起的生物信息爆炸,使生物大分子序 列数据库的数据量急剧增长,而蛋白质结构测定的速度远不能与之相比。因此,从序列信息 直接推断其可能的生物学功能就显得十分必要。本章还将简述蛋白质结构预测的现状,从蛋 白质一级结构中各种氨基酸所包含的折叠信息入手,重点说明蛋白质三级结构预测的意义, 并指出分子伴侣的本质及其在蛋白质折叠过程中的作用

由于食品和食品服务业中产生的废弃物含有大量碳水化合物 蛋白质 脂肪和无机 盐 因此废弃物成为食品行业中的难题之一 例如 如果不能合理处理乳品厂 食品冷 冻厂 食品脱水厂 肉禽制品和海洋食品加工企业的废弃物 将产生异味 并造成严重 污染 因此 在废弃物进入下水道前 必须对其中的有机物质进行生物稳定化处理 不 恰当的废水处理将给人类和水栖生物带来危害 联邦政府 地方管理部门以及公众要求各企业更好地处理废弃物的呼吁日益增加 加工企业和管理机构应该承担起及时处理废弃物的职责