一 重组蛋白分离纯化方法选择的基本原则 二 常用的分离方法 三 基因重组蛋白包涵体的分离和复性 四 重组蛋白质的鉴定

第一节 概述 ➢ 遗传、变异和环境是生物进化的三大因素 ➢ 拉马克主义（Lamarckism）：用进废退 ➢ 达尔文主义（Darwinism）：优胜劣汰 ➢ 孟德尔遗传学 — 分子遗传学 第二节 表观遗传机制 表观遗传机制 DNA甲基化 组蛋白修饰和组蛋白密码 染色质重塑 非编码RNA调控 第三节 表观遗传现象 表观遗传 调控作用 基因组印迹 基因表达重新编程 X染色体失活 基因表达模式 第四节 表观遗传与肿瘤

9外源基因表达产物的分离纯化 A重组蛋白分离纯化方法选择的基本原则 B离子交换层析 C凝胶层析 D亲和层析 E膜分离 F原核生物表达的重组蛋白质量检测

一、针对不同的产物表达形式采取不同的策略 二、针对不同性质的重组蛋白选择不同的层析类型 三、多种分离纯化技术的联合运用 四、合适分离纯化介质的选择

组蛋白密码进展 非编码RNA进展 母系父系表观遗传 DNA甲基化进展 DNA的甲基化是表观遗传中最重要的一种修饰形式，几乎与所有的生物学过程相关，在调控基因表达、维持染色质结构、基因印记、X染色体失活以及胚胎发育中发挥着重大的作用。 DNA异常甲基化与疾病的发生、发展有着密切的联系。 表观遗传记忆

概述 表观遗传学机制 DNA 甲基化 组蛋白修饰 染色质重塑 RNA调控 基因印迹 染色质重塑与胚胎发育

基因工程制药概述 基因工程制药的基本流程 重组蛋白分离纯化技术 基因工程药物的修饰改造 基因工程在制药工业中的应用 基因工程制药的优点 基因工程菌的构建与筛选 基因工程制药基本环节 选择宿主细胞的原则 凝胶过滤 (gel filtration chromatography) 特异结合亲和性-亲和层析 纯化后蛋白的质量检测与保存 修饰与改造的主要手段 基因工程药物的质量控制与应用 成品理化性质的检定

RNA聚合酶Ⅱ CTD的磷酸化促进转录延长 转录调控 顺式作用元件调控转录起始 转录激活因子促进基因转录 转录抑制因子抑制基因转录 CTD的磷酸化挽救不成功转录 常染色质区内基因有转录活性 组蛋白修饰改变染色质活性 转录活性基因启动子区甲基化程度低 非编码RNA参与调控染色质结构 染色质水平调控 转录后调控 mRNA 加帽和脱帽的调控 CTD参与调节RNA的转录后加工 剪接过程的调控 mRNA 加尾的调控 mRNA转运及细胞质定位的调控 mRNA稳定性的调控 翻译调控 翻译起始因子的磷酸化调节翻译 RBP结合UTR抑制翻译 通过5  -AUG调控翻译起始效率 miRISC结合靶mRNA抑制翻译 lncRNA调控mRNA的翻译 真核基因表达调控 1 Background 2 microRNA 3 lncRNA

• 疫苗的基本概念 • 疫苗的分类 • 减毒疫苗 • 灭活疫苗 • 类毒素疫苗 • 重组蛋白疫苗 • 结合疫苗 • 核酸疫苗

A高等哺乳动物基因工程的基本概念 B高等哺乳动物的受体系统 C高等哺乳动物的载体系统 D高等哺乳动物的基因转移 E利用哺乳动物工程细胞生产重组蛋白