一 重组蛋白分离纯化方法选择的基本原则 二 常用的分离方法 三 基因重组蛋白包涵体的分离和复性 四 重组蛋白质的鉴定

第一节 概述 ➢ 遗传、变异和环境是生物进化的三大因素 ➢ 拉马克主义（Lamarckism）：用进废退 ➢ 达尔文主义（Darwinism）：优胜劣汰 ➢ 孟德尔遗传学 — 分子遗传学 第二节 表观遗传机制 表观遗传机制 DNA甲基化 组蛋白修饰和组蛋白密码 染色质重塑 非编码RNA调控 第三节 表观遗传现象 表观遗传 调控作用 基因组印迹 基因表达重新编程 X染色体失活 基因表达模式 第四节 表观遗传与肿瘤

第一节 核被膜 核膜与核孔复合体；核孔通道物质转运。 第二节 染色质 染色质DNA组成；染色质组蛋白与非组蛋白；染色质的组装；染色质结构与基因活化。 第三节 染色体 染色体结构；核型与染色体显带；巨大染色体。 第四节 核仁 核仁结构；核仁的功能；核仁周期；亚核结构。 第五节 核基质 核基质的构成及功能

9外源基因表达产物的分离纯化 A重组蛋白分离纯化方法选择的基本原则 B离子交换层析 C凝胶层析 D亲和层析 E膜分离 F原核生物表达的重组蛋白质量检测

—主要是非组蛋白对基因组的作用 细胞增殖、分化、凋亡的相互关系及其调控 细胞信号转导的研究

A高等哺乳动物基因工程的基本概念 B高等哺乳动物的受体系统 C高等哺乳动物的载体系统 D高等哺乳动物的基因转移 E利用哺乳动物工程细胞生产重组蛋白

RNA聚合酶Ⅱ CTD的磷酸化促进转录延长 转录调控 顺式作用元件调控转录起始 转录激活因子促进基因转录 转录抑制因子抑制基因转录 CTD的磷酸化挽救不成功转录 常染色质区内基因有转录活性 组蛋白修饰改变染色质活性 转录活性基因启动子区甲基化程度低 非编码RNA参与调控染色质结构 染色质水平调控 转录后调控 mRNA 加帽和脱帽的调控 CTD参与调节RNA的转录后加工 剪接过程的调控 mRNA 加尾的调控 mRNA转运及细胞质定位的调控 mRNA稳定性的调控 翻译调控 翻译起始因子的磷酸化调节翻译 RBP结合UTR抑制翻译 通过5  -AUG调控翻译起始效率 miRISC结合靶mRNA抑制翻译 lncRNA调控mRNA的翻译 真核基因表达调控 1 Background 2 microRNA 3 lncRNA

第三章 核 酸 . 64 第一节 概 述 . 64 第二节 核酸的种类与分布 . 66 一、分 类 . 66 二、分 布 . 67 第三节 核酸的化学组成 . 68 一、碱 基 . 68 二、戊 糖 . 70 三、磷 酸 . 70 四、核 苷 . 71 五、核苷酸 . 72 六、细胞中的游离核苷酸及其衍生物. 73 第四节 脱氧核糖核酸 . 74 一、DNA 的碱基组成. 74 二、DNA 的一级结构. 74 三、DNA 的空间结构. 75 四、DNA 的三级结构. 79 第五节 核糖核酸 . 82 一、RNA 的结构. 82 第六节 核酸的理化性质与最常用的研究方法. 87 一、一般物理性质 . 87 二、核酸的紫外吸收 . 87 三、核酸的沉降特性 . 88 四、核酸的两性解离及凝胶电泳 . 89 五、核酸的变性、复性 . 90 六、核酸的酸解、碱解与酶解 . 94 第七节 染色体结构 . 97 一、染色体 . 97 二、组蛋白 . 98 三、核小体 . 99 四、核小体包装的高级形式 . 99 五、细菌染色体 DNA 的高级形式. 100

基因工程制药概述 基因工程制药的基本流程 重组蛋白分离纯化技术 基因工程药物的修饰改造 基因工程在制药工业中的应用 基因工程制药的优点 基因工程菌的构建与筛选 基因工程制药基本环节 选择宿主细胞的原则 凝胶过滤 (gel filtration chromatography) 特异结合亲和性-亲和层析 纯化后蛋白的质量检测与保存 修饰与改造的主要手段 基因工程药物的质量控制与应用 成品理化性质的检定

概述 表观遗传学机制 DNA 甲基化 组蛋白修饰 染色质重塑 RNA调控 基因印迹 染色质重塑与胚胎发育