第十五章酶类药物 第一节酶类药物的原料来源 一、原料选择 (1)不同酶的用料选择 乙酰化酶(鸽肝)、凝血酶(牛血)、透明质酸酶(羊睾丸) 二、溶菌酶(鸡蛋清),超氧化物歧化酶(血、肝) (2)注意不同生长发育情况及营养状况 (3)原料来源丰富 (4)从简化提纯步骤着手 (5)如用动物组织作原料,应在此动物宰杀后立即取材

第一节 菌种选育 一 菌样采集 二 富集 三 菌种纯化和分离 四 新种性能的测试 五 高产菌株的选育 1 诱变育种 2 基因重组育种 第二节 酶的生产方式 第三节 培养基 第四节 灭菌 第五节 发酵过程的控制 第六节 酶的工业提取 第七节 酶的改造与模拟

本实验为学生提供一个较全面的实践机会，学习如何提取纯化、分析鉴定一种酶， 并对这种酶的性质，尤其是动力学性质作初步的研究。 自 1860 年 Bertholet 从酒酵母 Sacchacomyces Cerevisiae 中发现了蔗糖酶以来，它已 被广泛地进行 了研究

分离气体混合物吸收;分离液体混合物-蒸馏与萃取 一、取适用范围 相对挥发度a=1的液体混合物(或两相沸点接近)另外还适用于蒸馏的热稳定性很差的物 质、分解或聚合、用萃取分离。如:从发酵液中提取青酶素、咖啡因。 如组分浓度很稀,且沸点较高,用液液萃取较为合适。 如从醋酸水溶液中分离醋酸;从稀醋酸水溶液制备无水醋酸。(因为醋酸浓度很低,用水蒸气 蒸馏、需能量很高,经济上不合理,用萃取合适。如:多种金属物质的分离、钴一镍分离等

第一章 蛋白质（酶）、核酸的分离纯化 第一节 引言 一、分离纯化的意义 二、分离纯化的要求 三、分离纯化的一般程序 第二节 蛋白质（酶）、核酸分离纯化的前处理 一、材料的选择与预处理 二、细胞的破碎 三、细胞器的分离 四、提取 第三节 分离纯化 一、 粗提纯 二、 精提纯 三、 纯度鉴定 第四节 生物大分子的浓缩、干燥及保存 第二章 离心技术 ▪ 离心技术概论 ▪ 一般制备离心 ▪ 超离心技术 第三章 层析技术 引言 层析法的基本原理 层析法的分类 第一节 吸附层析技术 第二节 分配层析技术 第三节 凝胶过滤层析技术 第四节 离子交换层析法 第五节 亲和层析法 第六节 高压液相层析（HPLC） 第四章 电泳技术 引言 第一节 电泳的基本原理 第二节 聚丙烯酰胺凝胶电泳 第三节 琼脂糖凝胶电泳 第四节 免疫电泳 一、概述 二、聚丙烯酰胺凝胶的制备 三、凝胶浓度和交联度与孔径大小的关系 四、不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳

实验一 细菌感受态的制备和质粒的转化 实验二 碱变性法提取质粒 DNA 实验三 水平式琼脂糖凝胶电泳法检测 DNA 实验四 DNA 的限制性内切酶酶切 实验五 DNA 的回收与连接 实验六 基因的 PCR 扩增 实验七 用温度敏感型启动子表达系统表达目的基因 实验八 基因组合生物合成新化合物 实验九 药用甘草片中甘草酸含量的分析及其质量评价 实验十 牛奶中酪蛋白和乳蛋白素粗品的制备 实验十一 固定化细胞法生产 L-天冬氨酸和 L-丙氨 实验十二 重组水蛭素Ⅲ的制备 实验十三 酸醇提取法制备猪胰岛素 实验十四 多肽缩宫素的 Fmoc 固相合成 实验十五 酵母 RNA 的制备和单核苷酸的离子交换柱层析分析 实验十六 单核苷酸衍生物制备 实验十七 胰弹性蛋白酶的制备及活力测定 实验十八 超氧化物歧化酶的分离纯化 实验十九 重组门冬酰胺酶Ⅱ的纯化与分析

1. 实验基本常识 1.1 几种常用实验仪器操作方法介绍 1.2 实验材料的采取、处理与保存 1.3 实验数据的处理 2. 水分生理 2.1 气孔运动及其影响因素 2.2 露点法测定植物叶片水势和渗透势 2.3 液体交换法测定植物组织水势（小液流法、折射仪法、电导法） 3. 矿质营养 3.1 植物溶液培养和缺素培养 3.2 植物伤流液的成分分析 3.3 根系活力的测定(TTC 法) 3.4 硝酸还原酶(NR)活性的测定 4. 光合作用和呼吸作用 4.1 叶绿体色素的提取、分离、理化性质和定量测定 4.2 红外线 CO2气体分析仪法测定植物光合与呼吸速率 4.3 抗坏血酸氧化物酶和多酚氧化酶活性的测定 4.4 水溶性碳水化合物的测定 5. 植物激素 5.1 植物组织培养技术 5.2 酶联免疫法（ELISA）测定植物激素含量 6. 植物生长发育 6.1 种子萌发和活力测定 6.2 花粉活力测定 7. 逆境生理 7.1 电导法测定植物细胞透性 7.2 植物组织中超氧物歧化酶活性的测定 7.3 植物体内游离脯氨酸含量的测定 7.4 植物组织中丙二醛含量的测定 7.5 植物体内氧自由基的测定和清除 8. 综合性实验