离体大鼠心脏灌流 前言: 我们知道,实验动物的器官在在体的情况下要受到体内多种因素的影响,象神经、体液等 因素。离体的情况下,由于排除了这些体内因素的影响,就可以相对独立地观察某一个实验因素 的作用。但离体实验必须要模拟在体的环境,比如合适的温度、湿度、营养物质、离子浓度、酸 碱度等。由于离体实验脱离了正常的生理环境,所以椐此得出得结论也有局限性 实验目的 1.学会制备离体大鼠心脏灌流的模型。 2.观察前负荷、温度、药物、离子对心脏的影响。 3.模拟离体心肌缺血/再灌注损伤模型,并观察心功能的改变。 操作过程 1.称重 2.麻醉:腹腔注射乌拉坦1ml/100g,要注意麻醉剂量不能过量,过量后会影响心功能(宁 少勿多) 3.固定 4.舌下静脉注入肝素(0.3m/100g) 固 舌下静脉注射 开胸:找到剑突的位置,在剑突的水平剪开腹部的皮肤和肌层,这样腹腔就暴露出来了, 再沿着胸壁和腹壁这一侧剪断膈膜,沿两侧肋骨向上平行剪开,翻起前胸壁,暴露心脏。 6.用镊子提起心脏根部,用剪刀尽量靠近头端剪断血管,这样的目的是尽量保留较长的主 动脉。(可以剪去右肺,保留左肺,目的:便于分辨左心耳的位置)。放置到4℃的生理盐水平 皿中使心脏停搏
离体大鼠心脏灌流 前言： 我们知道，实验动物的器官在在体的情况下要受到体内多种因素的影响，象神经、体液等 因素。离体的情况下，由于排除了这些体内因素的影响，就可以相对独立地观察某一个实验因素 的作用。但离体实验必须要模拟在体的环境，比如合适的温度、湿度、营养物质、离子浓度、酸 碱度等。由于离体实验脱离了正常的生理环境，所以椐此得出得结论也有局限性。 实验目的 1. 学会制备离体大鼠心脏灌流的模型。 2. 观察前负荷、温度、药物、离子对心脏的影响。 3. 模拟离体心肌缺血/再灌注损伤模型，并观察心功能的改变。 操作过程 1. 称重 2. 麻醉：腹腔注射乌拉坦 1ml/100g，要注意麻醉剂量不能过量，过量后会影响心功能（宁 少勿多） 3. 固定 4. 舌下静脉注入肝素(0.3ml/100g) 麻 醉 固 定 舌下静脉注射 5. 开胸：找到剑突的位置，在剑突的水平剪开腹部的皮肤和肌层，这样腹腔就暴露出来了， 再沿着胸壁和腹壁这一侧剪断膈膜，沿两侧肋骨向上平行剪开，翻起前胸壁，暴露心脏。 6. 用镊子提起心脏根部，用剪刀尽量靠近头端剪断血管，这样的目的是尽量保留较长的主 动脉。（可以剪去右肺，保留左肺，目的：便于分辨左心耳的位置）。放置到 4℃的生理盐水平 皿中使心脏停搏
开胸 暴露心脏 放置到4℃的生理盐水中停搏 7.在平皿中,找到主动脉的位置,并进行修剪经主动脉把心脏挂在灌流装置上,用动脉夹 夹住,然后用线结扎 8.打开灌流液行逆向灌流,心脏很快恢复自主跳动。 修剪心脏 灌流装置 将心脏挂在灌流装置上 插入球囊:关闭灌流液,用眼科剪在左心耳根部剪一个小口,将球囊通过左心耳、房室 瓣插到左心室里 10.在仪器的监测下,向球囊内注入生理盐水,使左室的舒张末期压调整在0~10mmHg之 11.预灌注几分钟,观察心率、心室内压、±dp/dt等指标。 号 插入球囊 开始灌流 观察指标 1.前负荷对心功能的影响:向球囊内注入少量生理盐水,使左室舒张压升高到40mmHg,观察心 功能的变化。 2.离子对心功能的影响:无钙灌流液灌流20秒,观察心功能的变化:打开高钙灌流液,灌流
开 胸 暴露心脏 放置到 4℃的生理盐水中停搏 7. 在平皿中，找到主动脉的位置，并进行修剪经主动脉把心脏挂在灌流装置上，用动脉夹 夹住，然后用线结扎。 8. 打开灌流液行逆向灌流，心脏很快恢复自主跳动。 修剪心脏 灌流装置 将心脏挂在灌流装置上 9. 插入球囊：关闭灌流液，用眼科剪在左心耳根部剪一个小口，将球囊通过左心耳、房室 瓣插到左心室里。 10. 在仪器的监测下，向球囊内注入生理盐水，使左室的舒张末期压调整在 0～10mmHg 之 间。 11. 预灌注几分钟，观察心率、心室内压、±dp/dt 等指标。 插入球囊 开始灌流 观察指标 1. 前负荷对心功能的影响：向球囊内注入少量生理盐水，使左室舒张压升高到 40mmHg，观察心 功能的变化。 2. 离子对心功能的影响：无钙灌流液灌流 20 秒，观察心功能的变化；打开高钙灌流液，灌流
1-2分钟,观察心功能的变化 3.温度对心功能的影响:升高灌流液的温度至39℃,观察心功能的变化 4.药物对心功能的影响:含有西地兰的灌流液观察5分钟;含有异丙肾上腺素的灌流液观察1 分钟:含有心得安的灌流液观察5分钟 5.缺血/再灌注损伤:停灌20-40分钟,恢复灌流20分钟,观察心功能的变化 思考题 1.与正常血液相比,本实验所用的K-H灌流液对心脏有什麽影响? 2.心脏进行正常的舒缩活动应具备什麽条件? 3.用无钙灌流液灌注,心脏会收缩吗?为什麽?什麽是钙反常? 4.用高钙灌流液灌注心脏其收缩会增加吗?为什麽?什麽是钙僵? 5.发热病人的心率有什麽变化?为什麽?
1-2 分钟，观察心功能的变化。 3. 温度对心功能的影响：升高灌流液的温度至 39℃，观察心功能的变化 4. 药物对心功能的影响：含有西地兰的灌流液观察 5 分钟；含有异丙肾上腺素的灌流液观察 1 分钟；含有心得安的灌流液观察 5 分钟。 5. 缺血/再灌注损伤：停灌 20-40 分钟，恢复灌流 20 分钟，观察心功能的变化。 思考题 1.与正常血液相比，本实验所用的 K-H 灌流液对心脏有什麽影响？ 2.心脏进行正常的舒缩活动应具备什麽条件？ 3.用无钙灌流液灌注，心脏会收缩吗？为什麽？什麽是钙反常？ 4.用高钙灌流液灌注心脏其收缩会增加吗？为什麽？什麽是钙僵？ 5.发热病人的心率有什麽变化？为什麽？