中药药理学实验指导山东农业大学农学院实验中心2011.3
中药药理学实验指导 山东农业大学农学院实验中心 2011.3
目录中药药理实验基本知识实验一生大黄、制大黄对小鼠小肠运动的影响实验二复方丹参注射液对小鼠耐常压缺氧的作用实验三大蓟对小鼠凝血时间的影响实验四金钱草对家兔利尿作用的影响实验五复方甘草片对浓氨水致小鼠咳嗽的影响实验六远志对小鼠的祛痰作用
目 录 中药药理实验基本知识 实验一 生大黄、制大黄对小鼠小肠运动的影响 实验二 复方丹参注射液对小鼠耐常压缺氧的作用 实验三 大蓟对小鼠凝血时间的影响 实验四 金钱草对家兔利尿作用的影响 实验五 复方甘草片对浓氨水致小鼠咳嗽的影响 实验六 远志对小鼠的祛痰作用
中药药理实验基本知识一、中药药理实验课的目的中药药理实验是中药药理学教学的一个重要组成部分，是理论联系实际的重要环节，是巩固且加强学生对所学理论知识理解的重要途径，通过中药药理实验课的学习，可达到下列目标1.通过实验课进一步理解并验证中药药理理论，掌握各类中药的主要药理作用和常用研究方法，将传统中医药理论与现代医学研究有机地联系起来。2.通过实验操作训练，正确掌握实验动物捉拿手法、给药技术标记方法：掌握实验动物给药剂量折算方法：了解中药药理实验数据最基本的处理方法：熟悉实验方案的设计与实施、实验条件和实验方法的选择：熟悉常用仪器的性能与规范的操作，进而全面培养学生将来从事中药药理和中医药科学研究的基本技能。3.通过设计性、综合性实验训练，模拟中药药理研究的全过程增强学生的创新意识、创新精神和独立工作的能力，培养学生在科学研究过程中的创新思维及严谨的科学态度、严密的工作方法和实事求是的学风
中药药理实验基本知识 一、中药药理实验课的目的 中药药理实验是中药药理学教学的一个重要组成部分，是理 论联系实际的重要环节，是巩固且加强学生对所学理论知识理解 的重要途径，通过中药药理实验课的学习，可达到下列目标： 1.通过实验课进一步理解并验证中药药理理论，掌握各类中药的 主要药理作用和常用研究方法，将传统中医药理论与现代医学研究有 机地联系起来。 2.通过实验操作训练，正确掌握实验动物捉拿手法、给药技术、 标记方法；掌握实验动物给药剂量折算方法；了解中药药理实验数据 最基本的处理方法；熟悉实验方案的设计与实施、实验条件和实验方 法的选择；熟悉常用仪器的性能与规范的操作，进而全面培养学生将 来从事中药药理和中医药科学研究的基本技能。 3.通过设计性、综合性实验训练，模拟中药药理研究的全过程， 增强学生的创新意识、创新精神和独立工作的能力，培养学生在科学 研究过程中的创新思维及严谨的科学态度、严密的工作方法和实事求 是的学风
二、中药药理实验的基本要求为了保证实验教学的正常进行，创造良好的实验环境，进入中药药理实验室的学生应做到：1.遵纪守规按时进入实验室，不迟到、早退和旷课：进入实验室必须穿白大衣：实验期间要保持实验室的安静，不得高声喧哗、打闹，不准抽烟、随地吐痰乱丢纸屑杂物，注意保持实验室和仪器设备的整齐清洁。2.提前预习实验前要认真预习实验内容、明确实验目的和要求，熟悉实验的基本原理、方法、步骤，了解仅器设备的操作规程和实验动物的特性，做到心中有数，避免实验过程中出现忙乱和差错。3.善待动物动物是人类的朋友，所以在中药药理实验过程中要善待动物，尽量减少动物的使用量：实验操作时要尽量减少动物精神上及生理上的惠惧和痛苦；必须要处死动物时，要采取安乐死措施等。4注意安全实验过程中要小心谨慎，防范触电、火灾、中毒等事故：动物捉拿时一定要戴防护手套，防止咬伤发生意外情况要保持镇静，迅速来取措施（切断电源、气源、清洗伤口等），并及时报告指导教师
二、中药药理实验的基本要求 为了保证实验教学的正常进行，创造良好的实验环 境，进入中药药理实验室的学生应做到： 1.遵纪守规 按时进入实验室，不迟到、早退和旷课；进 入实验室必须穿白大衣；实验期间要保持实验室的 安静，不得高声喧哗、打闹，不准抽烟、随地吐痰、 乱丢纸屑杂物，注意保持实验室和仪器设备的整齐 清洁。 2.提前预习 实验前要认真预习实验内容、明确实验目的 和要求，熟悉实验的基本原理、方法、步骤，了解 仪器设备的操作规程和实验动物的特性，做到心中 有数，避免实验过程中出现忙乱和差错。 3.善待动物 动物是人类的朋友，所以在中药药理实验过 程中要善待动物，尽量减少动物的使用量；实验操 作时要尽量减少动物精神上及生理上的恐惧和痛苦； 必须要处死动物时，要采取安乐死措施等。 4.注意安全 实验过程中要小心谨慎，防范触电、火灾、 中毒等事故；动物捉拿时一定要戴防护手套，防止 咬伤。发生意外情况要保持镇静，迅速采取措施 （切断电源、气源、清洗伤口等），并及时报告指 导教师
5.细心观察严格按照实验教程进行实验，实验中要听从指导教师和实验技术人员的指导，认真仔细观察动物的反应，及时客观地记录实验现象及数据。6.做好善后实验结束后要及时清洗所用器械、清理实验台、打扫实验室卫生按规定进行仪器检查及保养、做好实验动物的户体或器管的处理工作。并对实验结果认真分析，按要求撰写实验报告。三、实验报告的撰写实验报告是实验实施情况的总结报告。实验报告要客观地反映实验结果，不杜撰、修改数据，文学简练，书写工整，措辞科学、逻辑性强，并对实验结果客观地分析讨论。实验报告内容应该包括以下几个方面：（一）实验名称实验名称既可用实验教程的题日，也可自己根据实验内容重新确定。（二）报告人及时间在实验报告中应注明实验者姓名、专业、年级、学号和实验日期。（三）实验日的和原理1.实验自的主要说明通过本实验将学习到的实验方法及需验证的理论2.实验原理简要介绍本实验中涉及动物模型制备原理、指标检测及受试物选择的理论依据
5.细心观察 严格按照实验教程进行实验，实验中要听从指导教师和实验技 术人员的指导，认真仔细观察动物的反应，及时客观地记录实验现象 及数据。 6.做好善后 实验结束后要及时清洗所用器械、清理实验台、打扫实验室卫 生、按规定进行仪器检查及保养、做好实验动物的尸体或器官的处理 工作。并对实验结果认真分析，按要求撰写实验报告。 三、实验报告的撰写 实验报告是实验实施情况的总结报告。实验报告要客观地反映实 验结果，不杜撰、修改数据，文字简练，书写工整，措辞科学、逻辑 性强，并对实验结果客观地分析讨论。实验报告内容应该包括以下几 个方面： （一）实验名称 实验名称既可用实验教程上的题目，也可自己根据实验内容重新确定。 （二）报告人及时间 在实验报告中应注明实验者姓名、专业、年级、学号和实验日期。 （三）实验目的和原理 1.实验目的 主要说明通过本实验将学习到的实验方法及需验证的理论。 2.实验原理 简要介绍本实验中涉及动物模型制备原理、指标检测及受试物 选择的理论依据
（一）实验材料注明实验所用的仪器、药品、动物等条件。实验条件应详细明确，如仪器型号、厂家：试剂规格、产家、批号、浓度：受试物名称、药物组成、规格、厂家、批号、制备方法、给药浓度福剂量等；动物的来源、品种、性别、体重等。实验方法简明要写出实验的主要流程，如实验如何分组、给药途径、具体的观察指标及测定方法等。（三）实验结果实验结果应以实验室为单位进行处理、统计及分析，常用表达形式有：1.统计表采用三线表的格式，表格应有确切恰当的标题，标题要有自明性：表格中实验组别、剂量等项目一般置于表格左侧，具体检测指标置手右侧。数据包括实测值和各实测值的统计数据，统计数据一般采用均数土标准差（X土S）的形式表示。2.统计图统计图有柱形图、折线图、散点图等形式，图也同样应注明标题、计量单位。选用哪种图形，可根据实验数据的类型合理选用
（一）实验材料 注明实验所用的仪器、药品、动物等条件。实验条件应详细、 明确，如仪器型号、厂家；试剂规格、厂家、批号、浓度；受试 物名称、药物组成、规格、厂家、批号、制备方法、给药浓度、 剂量等；动物的来源、品种、性别、体重等。 （二）实验方法 简明扼要写出实验的主要流程，如实验如何分组、给药途径、 具体的观察指标及测定方法等。 （三）实验结果 实验结果应以实验室为单位进行处理、统计及分析，常用表 达形式有： 1.统计表 采用三线表的格式，表格应有确切恰当的标题，标题要 有自明性；表格中实验组别、剂量等项目一般置于表格左侧，具 体检测指标置于右侧。数据包括实测值和各实测值的统计数据， 统计数据一般采用均数±标准差（X±S）的形式表示。 2.统计图 统计图有柱形图、折线图、散点图等形式，图也同样应 注明标题、计量单位。选用哪种图形，可根据实验数据的类型合 理选用
（四）结论与讨论结论是运用专业知识对实验现象和取得结果进行的高度概括。讨论主要包括对实验结果的分析、实验中出现异常现象的分析、体会和建议等方面
（四）结论与讨论 结论是运用专业知识对实验现象和 取得结果进行的高度概括。讨论主要包 括对实验结果的分析、实验中出现异常 现象的分析、体会和建议等方面
实验一生大黄、制大黄对小鼠小肠运动的影响可（炭末法）【实验目的】了解生大黄、制大黄对肠蠕动的影响，掌握整体动物肠运动实验方法。验证炮制对大黄功效的影响。【实验原理】利用黑色炭末作为指示剂，观察炭未在肠道的推进距离。口服生大黄可刺激肠动加速，有泻下作用故对胃肠实热有“釜底抽新”之功。大黄久煎或炮制之后，致泻成份分解，作用减弱。【实验器材】手术剪、眼科镊、直尺、注射器、灌胃针头、天平、烧杯、塘瓷盘。【实验药品】炭末生理盐水混悬液0.1g/m1、生大黄水煎液1g/m1（含炭末0.1g/m1）、制大黄水煎液1g/m1（含炭末0.1g/m1）、苦味酸液。【实验动物】昆明种小白鼠，清洁级，雄性，体重18～22g
实验一 生大黄、制大黄对小鼠小肠 运动的影响（炭末法） 【实验目的】了解生大黄、制大黄对肠蠕动的影响，掌握整 体动物肠运动实验方法。验证炮制对大黄功效的影响。 【实验原理】利用黑色炭末作为指示剂，观察炭末在肠道的 推进距离。口服生大黄可刺激肠蠕动加速，有泻下作用， 故对胃肠实热有“釜底抽薪”之功。大黄久煎或炮制之后， 致泻成份分解，作用减弱。 【实验器材】手术剪、眼科镊、直尺、注射器、灌胃针头、 天平、烧杯、搪瓷盘。 【实验药品】炭末生理盐水混悬液0.1g/m1、生大黄水煎液 1g／m1(含炭末0.1g／m1)、制大黄水煎液1g／m1(含炭 末0.1g／m1)、苦味酸液。 【实验动物】昆明种小白鼠，清洁级，雄性，体重18～22g
【实验方法】取禁食不禁水24小时，体重相近的小鼠，随机分组，用苦味酸液标记。分别用上述3种炭末液0.3m1/10g体重灌胃。给药30min后脱颈椎处死，打开腹腔分离肠系膜，剪取上端至幽门，下端至回盲部的肠管，置于托盘上轻轻将尔肠拉成置线，测量肠管长度作为“小肠意长度”从幽门至炭末前沿的距离作为“炭末推进距离。取各组小鼠平均值，用公式计算炭末推进百分率，并注意观察各组动物小肠容积是否增大。炭未推进距离（cm）炭末推进率（%）=X100%小肠总长度（cm）【实验结果】按表1-1记录分析。表1-1生大黄、制大黄对小鼠小肠蠕动的影响组别小肠总长度（cm）炭末推进距离（cm）炭未推进率（%）和肠容积变化NS生大黄制大黄【注意】1.开始给药至处死动物的时间必须准确，以免时间不同而造成实验误差。2.避免过度牵拉肠管。【思考题】大黄致泻的主要成份及作用机理是什么？
【实验方法】取禁食不禁水24小时，体重相近的小鼠，随机分组，用苦味酸液标 记。分别用上述3种炭末液0.3m1／10g体重灌胃。给药30min后脱颈椎处死， 打开腹腔分离肠系膜，剪取上端至幽门，下端至回盲部的肠管，置于托盘上。 轻轻将小肠拉成直线，测量肠管长度作为“小肠总长度”。从幽门至炭末前 沿的距离作为“炭末推进距离”。取各组小鼠平均值，用公式计算炭末推进 百分率，并注意观察各组动物小肠容积是否增大。 炭末推进距离（cm） 炭末推进率（%）= - X100% 小肠总长度（cm） 【实验结果】按表1-1记录分析。 表1-1 生大黄、制大黄对小鼠小肠蠕动的影响 【注意】1.开始给药至处死动物的时间必须准确，以免时间不同而造成实验误差。 2.避免过度牵拉肠管。 【思考题】大黄致泻的主要成份及作用机理是什么? 组别 小肠总长度（cm） 炭末推进距离（cm) 炭末推进率（%）和肠容积变化 NS 生大黄 制大黄
小白鼠的提拿方法（1）双手法：右手提鼠尾，放在鼠笼盖或其他粗糙面上，向后方轻拉鼠尾，使小鼠前肢固定在粗糙面上。迅速用左手拇指和食指捏其双耳间颈背部皮肤，无名指、小指和掌心夹其背部皮肤和尾部，便可将小鼠牢固捉持（图1）图1小鼠双手提持法2）单手法：小鼠置于笼盖上，先用左手食指和拇指抓住鼠尾，后手掌尺侧和小指夹住鼠尾，然后左手拇指与食指捏住颈部皮肤（图一
• 小白鼠的捉拿方法 • （1）双手法：右手提鼠尾，放在鼠笼盖或其他粗糙面上，向后方轻 拉鼠尾，使小鼠前肢固定在粗糙面上。迅速用左手拇指和食指捏其双 耳间颈背部皮肤，无名指、小指和掌心夹其背部皮肤和尾部，便可将 小鼠牢固捉持（图1） 。 • 图1 小鼠双手捉持法 • （2）单手法：小鼠置于笼盖上，先用左手食指和拇指抓住鼠尾，后 手掌尺侧和小指夹住鼠尾，然后左手拇指与食指捏住颈部皮肤（图 2）