第六章微生物的生长及其控制 第一节测定生长繁殖的方法 第二节微生物的生长规律 第三节影响微生物生长的主要因素 第四节微生物的纯培养 第五节有害微生物的控制
第六章 微生物的生长及其控制 第一节 测定生长繁殖的方法 第二节 微生物的生长规律 第三节 影响微生物生长的主要因素 第四节 微生物的纯培养 第五节 有害微生物的控制
第七章微生物的生长及其控制 生长 growth):微生物在适宜的条件下,不断从周围环境 中吸收营养物质转化为构成细胞物质的组分和结构,使 个体细胞质量增加和体积增加,称为生长。 繁殖〔 reproduction):细胞个体数目的增加称为繁殖。 个体和群体的关系: 个体生长→→个体繁殖→→群体生长 群体生长=个体生长+个体繁殖
第七章 微生物的生长及其控制 生长(growth)：微生物在适宜的条件下，不断从周围环境 中吸收营养物质转化为构成细胞物质的组分和结构，使 个体细胞质量增加和体积增加，称为生长。 繁殖(reproduction)：细胞个体数目的增加称为繁殖。 个体和群体的关系： 个体生长→→个体繁殖→ → 群体生长 群体生长=个体生长+个体繁殖
第一节测定生长繁殖的方法 目前测定微生物群体生长的方法大致不外乎二大类:一类 是测定细胞物质量的增加;一类是测定细胞数目的增加。 1、侧生长量(细胞量的测定) (1)干重法:该方法是将单位体积培养液中的菌体,用清 水洗净,然后放入干燥器内加热或减压干燥,最后再用精 密仪器测定其干重。一般来说,干重约为湿重的10~20%, 即1mg干菌=5~10mg湿菌-4-5×109个菌体
第一节 测定生长繁殖的方法 • 目前测定微生物群体生长的方法大致不外乎二大类：一类 是测定细胞物质量的增加；一类是测定细胞数目的增加。 1、侧生长量（细胞量的测定） （1）干重法：该方法是将单位体积培养液中的菌体，用清 水洗净，然后放入干燥器内加热或减压干燥，最后再用精 密仪器测定其干重。一般来说，干重约为湿重的10~20%， 即1mg干菌=5~10mg湿菌=4~5×109个菌体
(2)间接法 ①比浊法:其原理是根据在一定的浓度范围内,菌悬液的 微生物细胞浓度与液体的光密度成正比,与透光度成反 比。菌数越多,透光量越低。因此,可使用光电比色计 测定,通过测定菌悬液的光密度或透光率反映细胞的浓 度 ②生理指标法测含氮量法:微生物细胞的含氮量一般 比较稳定,所以常作为生长量的指标。如细菌含氮量约 为菌体干重的14%。含氮量乘以6.25即可粗测出其蛋白质 含量 ③其他法:另外还有测定耗氧量或其它代谢产物作为细胞 量的指标
（2）间接法 ①比浊法：其原理是根据在一定的浓度范围内，菌悬液的 微生物细胞浓度与液体的光密度成正比，与透光度成反 比。菌数越多，透光量越低。因此，可使用光电比色计 测定，通过测定菌悬液的光密度或透光率反映细胞的浓 度。 ②生理指标法——测含氮量法：微生物细胞的含氮量一般 比较稳定，所以常作为生长量的指标。如细菌含氮量约 为菌体干重的14%。含氮量乘以6.25即可粗测出其蛋白质 含量。 ③其他法：另外还有测定耗氧量或其它代谢产物作为细胞 量的指标
支盖玻片的部位 2、测繁殖数(细胞数的测定) 适用范围:单细胞状态(细菌、放 线菌),以计算个体数目为计算 样品加在此处,务必小心不要出现 溢流,玻片和玻片之间的间隔 原则。 为0.02mm(/50mm),整个格了由 25个大正方形組成,总面积为1mm 总体积为0.002mm3 常用的方法有 (1)显微直接计数法 即在显微镜下直接进行计数,常 利用细菌计数板和血球计数板进班 计算一个大正方形 细胞数,在此是12个细胞 行计数 (实际上是计算几个正方形中总的 团胞数,然后算平均值) 总菌数(活菌、死菌) 50x1o 细胞数/n2 细胞数/m3 细胞数/m(m 图5.5使用 Petroff- Hausser计数室,直接 用显微镜计数步骤
2、测繁殖数（细胞数的测定） 适用范围：单细胞状态（细菌、放 线菌），以计算个体数目为计算 原则。 常用的方法有： （1）显微直接计数法 • 即在显微镜下直接进行计数，常 利用细菌计数板和血球计数板进 行计数。 • 总菌数（活菌、死菌）
(2)平板菌落计数法:这是实践中最常用的一种方法。 常用来测定牛奶、食品、水及其它材料中的含菌数。 有些细菌如无法在固体培养基中生长或其他原因,可 用液体稀释法,借助统计学来判断其活菌数。通过查 MPN( Most probable number)来测知样品中活菌的 可能数目。 (3)薄膜过滤计数法:将定量的样品(空气或水通过薄 膜后,菌体被阻留在滤膜上取下薄膜迸行培养,计算上 面的菌数而求出样品中所含菌数。这种方法适用于测 定量大但含菌数少的样品
（2）平板菌落计数法：这是实践中最常用的一种方法。 常用来测定牛奶、食品、水及其它材料中的含菌数。 有些细菌如无法在固体培养基中生长或其他原因，可 用液体稀释法，借助统计学来判断其活菌数。通过查 MPN（Most Probable Number）来测知样品中活菌的 可能数目。 （3）薄膜过滤计数法：将定量的样品(空气或水)通过薄 膜后,菌体被阻留在滤膜上,取下薄膜进行培养,计算上 面的菌数而求出样品中所含菌数。这种方法适用于测 定量大但含菌数少的样品
涂布平板法 平板表面菌落 用移液管把样品 用无菌玻璃刮刀把 滴在琼脂板表面 保湿 典型的涂布平板结果 样品均匀地涂布在 (0.lml或更少 琼脂板表面 倾注平板法 表层菌落深层菌落 把样品吸入 倒入无菌培养基与 无菌平板中 接种物充分混合 典型的倾注平板结果 图5.6运用活菌计数(平板计数)的两种方法。在每一种情况下,一般样品在铺平板前要经过稀释
1.0ml 1.0ml 1.0ml 1.0ml Original 9 ml H O 9 ml Ho 9 ml H o 9 ml H o sample (10-1 dilution) (10-2 dilution) (10-3 dilution (10-4 dilution 1.0ml 1.0ml Mix with warm agar and pour
第二节微生物的生长规律 细菌的个体生长和同步生长 1、研究微生物生长变化规律的方法 (1)用电子显微镜观察细菌细胞的超薄切片 (2)采用同步培养技术,观察群体生长变化来研究个体的 生长变化。 2、同步培养 同步培养:设法使群体中的所有细胞尽可能都处于同样细胞 生长和分裂周期,这种培养方法称为同步培养。 同步生长:利用同步培养技术而使细胞群体处于分裂步调一 致的状态(在培养物中的所有细菌,都处于同样细胞生长 和分裂周期中生理状态),称为同步生长
第二节 微生物的生长规律 一、细菌的个体生长和同步生长 1、研究微生物生长变化规律的方法 （1）用电子显微镜观察细菌细胞的超薄切片； （2）采用同步培养技术，观察群体生长变化来研究个体的 生长变化。 2、同步培养 同步培养：设法使群体中的所有细胞尽可能都处于同样细胞 生长和分裂周期，这种培养方法称为同步培养。 同步生长：利用同步培养技术而使细胞群体处于分裂步调一 致的状态（在培养物中的所有细菌，都处于同样细胞生长 和分裂周期中生理状态），称为同步生长
3、获得同步生长的方法:诱导法和筛选法 (1)诱导法:通过环境条件 化学诱导法:利用停止或限制供给微生物细胞分裂所必需 的某种养料,使所有的细胞都处于临分裂状态(但不分裂) 然后在某一时刻供给细胞分裂所必需的养分,就能诱导出同 步细胞群体。 物理诱导法:是利用某些物理因子,使处于即将分裂的细 胞的代谢活动受到抑制,从而使细胞在分裂阶段前停止,以 求得以后分裂的同步
3、获得同步生长的方法：诱导法和筛选法 （1）诱导法：通过环境条件 化学诱导法：利用停止或限制供给微生物细胞分裂所必需 的某种养料，使所有的细胞都处于临分裂状态（但不分裂）， 然后在某一时刻供给细胞分裂所必需的养分，就能诱导出同 步细胞群体。 物理诱导法：是利用某些物理因子，使处于即将分裂的细 胞的代谢活动受到抑制，从而使细胞在分裂阶段前停止，以 求得以后分裂的同步