目录 目录 1 实验一植物病害的症状观察 2 实验二植物病原真菌的一般形态观察 4 实验三鞭毛菌与接合菌亚门真菌形态观察 6 实验四子囊菌和半知菌亚门真菌形态观察 8 实验五担子菌亚门真菌形态观察 10 实验六植物病原细菌的一般形态观察和染色 12 实验七植物病毒的一般形态电镜观察 15 实验八麦类病害的识别与诊断 16 实验九水稻病害的识别与诊断 22 实验十杂薯类病害的识别与诊断 28 实验十一棉花病害的识别与诊断 31 实验十二油料作物病害的识别与诊断 37 实验十三蔬菜病害的识别与诊断 42 实验十四果树病害的识别与诊断 46 实验十五杀菌剂田间药效实验 50 实验十六病害田间调查及标本采集 53 实验十七病原菌的分离培养 55 附录 57 1
实验一植物病害的症状观察 一、目的要求 植物病害的症状观察是诊断和认识植物病害的重要依据。常见病害可由症状做 出正确诊断：未知病害，经症状观察和镜检，可作出初步诊断，再经过分离培养、 接种等工作，做出最后结论。通过实验初步认识病害的主要类型，掌握各种症状类 型的特点，为病害诊断奠定一定基础。 二、基本原理 植物病害的症状是植物患病后由于异常生理活动而发生在细胞和组织上、形态 上的变化。既发生于患病内部，又表现于其外表。一般常指植物外部病变的综合特 点，包括形态、形状、质地、颜色、味道和存在的病原体等方面的变化。 症状分为“病状”和“病征”。病状是植物本身患病后所表现的综合变化特征 病征是致病微生物在植物病部表面的特殊结构的特征，一般为病原体菌体或繁殖器 官，但并不是所有植物病害都有病征表现，如病毒性病害在病部表面就没有病征表 现。 每一种植物病害的症状具有相对的特殊性和稳定性，因此通过症状诊断植物病 害必须经过一定时间的实践和一定数量的病害种类的积累，才能逐步掌握。而且最 好的办法是进行大量的田间实际观察逐步积累。 三、实验材料 稻瘟病、水稻白叶枯病、小麦条锈病、小麦赤霉病、小麦白粉病、玉米大斑病、 玉米小斑病、玉米黑粉病、马铃薯环腐病、马铃薯晚疫病、马铃薯黑斑病、油菜菌 核病、烟草花叶病、苹果花叶病、苹果腐烂病、果树根癌病、葡萄白粉病、枣疯病、 柿圆斑病、莴苣霜霉病、大白菜软腐病、小麦粒线虫病、大豆胞囊线虫病等病害症 状标本。 光学显微镜、载玻片、盖玻片、蒸馏水、拨针、刮刀、纱布等。 四、实验步骤 1,首先观察各类植物病害标本。按照变色、坏死、斑点、腐烂、畸形等归纳各 种标本的病状类型。 利病表病 3。根据附录的描述，归纳总结各类病害症状类型，填写下表
五、作业 根据实验观察的标本，将观察结果填写下表。 寄主植物名称病害名称发病部位病状类型及特征病征类型及特征
实验二植物病原真菌的一般形态观察 一、目的要求 1.了解真菌营养体及其变态类型的形态特点 2.了解真菌的繁殖方式及其孢子类型。 二、基本原理 真菌的主要特征有：(1)为真核生物，具有真正的细胞核：(2)营养体通常是 丝状分支的菌丝体，细胞壁主要成分为几丁质，有的为纤维素，少数真菌的营养体 是不具细胞壁的原生质团：(3)没有叶绿素，不能进行光合作用，营养方式为异养： (4)典型的繁殖方式是产生各种类型的孢子： 三、实验材料 1.病菌培养菌种及新鲜病菌 瓜类猝倒病菌Pythium SP一菌丝 黑霉菌Rhizopus nigricans-孢子囊 十字花科白锈病菌Albugo Candida---萌发的游动孢子囊 2.病菌玻片或切片 链格孢菌Alternaria Sp--菌丝，分生孢子梗及分生孢子 苹果白粉病Podosphaera leucotricht---休眠菌丝体 豆类菌核菌Sclerotinia SP.--菌核剖面 棉枯菱病菌Fusarium vasinfectum---厚垣孢子 马齿苋白锈病菌Albugo bliti---卵孢子 黑霉菌Peziza Sp-子囊盘剖面 罩菌一菌摺剖面 菌索 3.用具 显微镜、载玻片、盖玻片，拨针、蒸馏水、表面皿、纱布等。 四、实验步骤 1.真菌的营养体南丝及其变态 (1)菌丝：分为有隔菌丝和无隔菌丝两种。 有隔菌丝：观察所供示范片。无隔菌丝：用猝倒病菌(Pyhtium SP)或 (Rhizopus SP)自制玻片观察。 (2)休眠菌丝体：潜伏在寄主体内，有休眠作用以抵抗不良环境，形态与原来 4
菌丝相似。如苹果白粉病菌(Podosphaera leucotricha)。 (3)茵核：由菌丝体结成团形成。典型的菌核内部是硫丝组织，外层是拟海壁 组织，特别是表层细胞的细胞壁很厚，颜色深，较坚硬。是真菌的一种休 眠结构。观察莴苣菌核病菌的菌核，注意其形状、颜色，注意其内部结构。 (4)菌索：由菌丝纵向排列组成（森林病害中常见）。 2.直菌的警殖体及其狗子类型： (1)真菌的无性繁殖体及其孢子类型： []游动孢子：是鞭毛菌的无性孢子，无细胞壁，球形或肾形，具鞭毛一根或 两根，可以游动。产生于无性产孢器游动孢子囊中。观察十字花科白锈病 (Albugo condida)的示范片，注意其游动孢子囊、子囊梗的形态特点，并 在示范镜下观察游动孢子的形状和是否游动。 [2]孢囊孢子：无鞭毛不能游动，有固定的细胞壁，产生于孢子囊中。如黑霉 (Rhizopus nigricans）。 [3]分生孢子：高等真菌中常见，种类较多。分生孢子外生于分生孢子梗上 其形状大小、细胞数目、色泽变化较大，这里仅举一例作为代表，用葱紫 斑病菌(Alternaria porri)自制玻片观察 [4)厚垣孢子：由菌丝细胞壁加厚，原生质浓缩而成，生于菌丝中部或顶端。 观察棉花枯菱病菌(Fusarium vesinfectum)厚垣孢子示范片。 (2)真菌的有性繁殖体及孢子类型 [1]接合孢子：接合菌的有性孢子，由配子囊配合方式产生。观察示范片。 [2]卵孢子：由两个异形配子囊（雄器和藏卵器）交配形成，壁厚且多为圆形， 为鞭毛菌所特有。观察马齿苋白锈病菌(Abug0bli)卵孢子示范片。 [3)子囊孢子：子囊菌的有性孢子，产生于子囊内，每个子囊通常含有8个子 囊孢子。观察示范片。 [4担孢子：担子菌的有性孢子，若生于一种称为担子的结构上，每个担子上 着生4个担子。观察示范片。 五、作业： 绘以下病菌简图 1.十字花科白锈病菌孢子囊和孢子梗。 2.葱紫斑病菌的分生孢子及分生孢子梗 3.首蓿黄斑病菌子囊孢子
实验三鞭毛菌与接合菌亚门真菌形态观察 一、目的要求 1.一般地了解鞭毛菌亚门与接合南亚门的分类概况，并着重掌握鞭毛南亚门卵 菌纲中霜霉目和接合菌亚门毛霉目的分类特点。 2.了解鞭毛菌亚门和接合菌亚门与农作物病害有关的主要致病真菌种类。 二、基本原理 鞭毛菌亚门真菌营养体是单细胞或没有隔膜的菌丝体，无性繁殖产生游动 孢子，有性繁殖产生卵孢子或休眠孢子囊。本亚门真菌能够引起植物病害的主 要是卵菌纲真菌，其中有不少是高等植物的重要病原南。接合南无性繁殖产生 孢囊孢子，有性生殖产生接合孢子。该菌大多是腐生的，经济上重要的属是毛 霉目中的根霉属(Rhizopus)毛霉属(Mucor)及笄霉属(Choanephore)。前两 者危害块根、果实和种苗，引起组织坏死腐烂，后者引起瓜类花腐。 三、实验材料与用具 有关病原切片，有关病害症状标本，显微镜，载玻片，盖玻片，蒸馏水， 拨针等。 四、实验步骤 观察以下病原菌的示范片： 1.马铃薯软腐病菌(Rhizopus Stolonifer)培养物，接合孢子的玻片及瓶装标本 注意观察葡萄状菌丝，与基质接触处形成的褐色假根、假根相对应的菌丝长出24根 直生的褐色孢囊梗，顶端形成的黑色孢子囊。孢子囊破裂散出孢囊孢子。镜检玻片 观察两个同型配子囊及黑色、厚壁、带瘤状突起的接合孢子。 2.瓜类腐霉菌(Pythium aphanidermatum)培养物：将瓜类猝倒病病土置于大培养 皿中，加水至饱和，然后将无病的黄瓜横切面插入土中，用湿麻纸保湿加盖，17℃培 养数日，即可看到黄瓜上长出白色絮状物。挑取白色絮状菌丝，用无菌水冲洗，放入 盛有无菌水的小培养皿内，置24℃温箱过夜。在显微镜下观察成熟的不规则的瓣状 孢子囊，孢子囊与菌丝没有明显的分化。孢子囊萌发形成膨大的圆形泡囊，泡囊破裂 释放出游动狗子。并观察实物标本。 3.十字花科白锈病(Albugo candida):病菌无性时期切片，瓶装标本：注意观察 在寄主表皮下平行排列短棍棒形不分枝的孢囊梗，顶端串生圆球形孢子囊的特征。 4.马铃薯晚疫病(Phytoph thora infestans)、十字花科霜霉病（Peronospora Parasitica)实验材料和盒装标本、玻片：观察病苦的危苦部位及症状、病征特点。然 6
后取实验材料自己制片观察两种病害的病原菌形态特征。疫霉菌无性繁殖是从菌丝体 上形成细长的孢囊梗，单轴分枝，分枝顶端膨大形成稍突起的柠檬形无色孢子囊，孢 子囊脱落后，继续伸长，再形成新的孢子囊。因此孢囊梗有连续生长的特点。霜霉菌 的菌丝长出纤细的重复二叉分枝的无色孢囊梗，分枝末端尖细，若生单个、无色、卵 圆形孢子囊，孢子囊萌发产生游动孢子或直接产生芽管。 5.谷子白发病病原菌(Sclerospora graminicola):无性时期的切片，有性时期的黄 褐色粉状物和盒装标本。观察病害标本，由于在谷子不同生长时期发病，所以表现不 同的症状。肢片镜拾，狗囊梗知短，顶瑞23个分技，每个分枝顶瑞着生25个小梗， 小梗上顶生一个孢子囊，孢子囊倒卵形或椭圆形，有乳状突起：取病穗上黄褐色粉末， 制片、镜检，可以看到卵孢子近球形，黄褐色，厚壁，表面有皱折。 五、作业 1.绘出十字花科白锈病、十字花科霜霉病病原菌形态图。 2.比校所观察的病害的定状特点
实验四子囊菌和半知菌亚门真菌形态观察 一、实验目的 1.了解子囊菌亚门的分类概况，重点掌握白粉南科的分类特点。了解子囊菌亚 门真菌与植物病害有关的主要致病菌种类。 2.了解半知菌亚门的分类概况，重点掌握丛梗孢目、黑盘孢目和球壳孢目的分 类特点。了解半知菌亚门真菌与植物病害有关的主要致病菌种类。 二、基本原理 子囊菌亚门真菌的共同特征是营养体发达，是有隔膜的菌丝体。无性繁殖产生 分生孢子。有性生殖产生子囊孢子，子囊孢子变化很大，有近球形、椭圆形、腊肠 形或线形，单胞、双胞或多胞，颜色从无色到黑色，细胞壁表面光滑或具有条纹、 密状突起路。子囊是有性生殖的产囊体，内含8个子囊狗子。许多引起植物病害的 子囊菌无性阶段的寄生性强，产生分生孢子，引起再侵染：而有性阶段多在生长未 期产生子实体，子座或菌核等形态越冬、行腐生生活，故子囊孢子是子囊菌病害越 冬和初侵染来源。子囊菌菌丝体在寄主体内扩展是局限性的，因此子囊菌病害多为 点发性病害。 半知菌是一大类重要的真菌，大多数农作物病害由它引起。所谓半知菌是指未 发现有性阶段的真菌，事实上它们多为子囊菌和少数担子菌的无性时期。半知菌的 分生孢子梗和分生孢子有不同的形状和颜色，按着生方式和位置可以分为三种不同 类型(1)分生孢子梗散生、丛生或产生在分生孢子座上。(2)分生孢子梗产生在分 生孢子盘上。(3)分生孢子梗产生在分生孢子器内。 三、实验材料 有关病原菌切片，有关病害标本，显微镜等。 四、实验步骤 l.观察下列小麦白粉病(Erysiphe graminis)病叶上的白粉，即寄生叶表面的 病菌的无性阶段繁殖体：后期白粉层变为灰褐色，并散生许多黑色小粒，即 病菌有性阶段闭囊壳。用刮刀刮取黑色球形闭囊壳制作玻片。先观察其附属 丝形状，然后轻轻用力压盖玻片使闭囊壳破裂，逸出子囊，看其数目、形状 以及子囊内的子囊孢子。 2.取小麦赤霉病(Gibberella zeae)玻片镜检，子囊果为囊壳、瓶形有孔口， 深紫色，子囊棍棒形，子囊孢子纺锤形多细胞。观察病害标本，在颗片上合 逢处和小穗基部产生的粉红色胶质霉，即病菌分生孢子座和分生孢子。大型 8
分生孢子镰刀形、顶端钝，有明显脚胞，3-5个分隔。 3.观察油菜南核病(Sclerotinia Sclerotiorum)的瓶装及盒装标本。盒装标本是 油菜由菌核病所造成的症状，主茎的随部已被蚀空，内有许多老鼠屎状的黑 色菌核。瓶装标本是菌核在土壤中萌发产生的子囊盘柄，柄伸出地面后展开 形成褐色子龚盘，子囊盘表面由许多子囊和子囊间的侧丝所组成。 4.玉米大斑病(Exserohilum turcicum)、棉花茎枯病(A.scochyta gossypii)高粱 炭疽病均属半知菌类病害，但三种类型的病害所造成的症状以及病原菌形态 有所不同。玉米大衡房的病什表现为有510厘米长，1匣米资的黄据伍或吉 黑色棱形坏死病斑，潮湿情况下形成黑色霉层。将霉层刮下制片，分生孢于 梗单生、不分枝，分生孢子棱形，29个隔膜，多数直立，基细胞尖锥形， 脐点明显突出于基细胞之外。棉花茎枯病()在子叶和真叶上形成圆形中间 淡褐色边缘红紫色的病斑，病斑上有同心轮纹并散生小黑点（分生孢子器）。 在棉铃上呈黑褐色腐烂，病部表面及棉絮上产生许多小黑点。挑取棉铃或叶 片上的小黑点镜检，观察球形分生孢子器，吸水后从分生孢子器孔口溢出大 量分生孢子，分生孢子卵圆形或椭圆形，初无色单胞，后褐色双胞。 五、作业 1.绘小麦白粉病、棉花茎枯病的病原图。 2.子囊菌和半知菌的产孢方式和结构有那儿种？用具体病害阐述。 3.描述小麦白粉病、玉米大斑病、棉花茎枯病、小麦赤霉病、油菜菌核病的症 状特点
实验五担子菌亚门真菌形态观察 一、目的要求 3.一般地了解担子菌亚门的分类概况，并者重掌握担子菌亚门冬孢菌纲中的锈 菌和黑粉菌的分类特点。 4.了解担子菌亚门真菌与植物病害有关的主要致病菌种类。 二、基本原理 担子菌亚门真菌是真菌中的最高等的一类。包括很小的锈菌和黑粉菌到具 有很大的子实体的伞菌和腹菌。菌丝体具有隔膜、发达，无性繁殖除黑粉菌芽 生小孢子，锈菌产生双核的锈孢子和夏孢子起相当于分生孢子作用外，一般不 产生分生孢子。有性生殖产生担孢子和性孢子，一般没有特殊分化的性细胞和 性器官。在担子菌中与农作物病害有关的是冬孢菌纲的黑粉菌目和锈菌目，它 们没有担子果，在寄主体内或表面产生分散或成堆的冬孢子。黑粉菌都是植物 寄生菌，主要危害禾谷类作物：锈菌都是专性寄生菌，主要危害植物的茎叶， 引起局部侵染。 三、实验材料与用具 有关病原切片，有关病害症状标本，显微镜，载玻片，盖玻片，蒸馏水， 拨针等。 四、实验步骤 1.分别挑取小麦散黑穗病(Ustilago trinici)、小麦网腥黑穗病(Tilletiacaires) 小麦秆黑粉病(Urocysti心tritici)病部的黑粉制片，并进行。小麦散黑穗病 冬孢球形至卵圆形，表面有细刺，身褐色，半边较淡：小麦腥黑穗病冬孢 子多为球形或近球形，褐色至深褐色，表面有网纹：小麦秆黑粉病冬孢了 结成孢子球，由14个冬孢子组成，冬孢子球形至卵圆形，红褐色，表面光 滑，外面有一层淡色不孕细胞。 2.将已萌发好的冬孢子悬浮液置显微镜下，观察小麦散黑穗病菌、玉米瘤黑 粉病菌和小麦网腥黑穗病菌萌发情况，玉米黑粉病菌冬孢子萌发产生有隔 相子，再产生4个相孢子：散黑藕病菊冬孢子萌发产生有隔相子，分成个 细胞，每一个细胞伸出接合管，异性结合产生双核的侵染丝，不产生担孢 子：腥黑穗病菌的冬孢子萌发，产生管状的担子，粗而短，其顶上簇生316 个线形、无色的担孢子。 3.取小麦条锈病(Puccinia striiformis)标本。用刮刀刮取虚线形、枯黄色的 10