实验三杀虫剂触杀毒力(LD50)测定（点滴法) 目前使用的杀虫剂大多数都具有较强的触杀作用，所以杀虫剂的触杀毒力测定显得特别 重要。触杀毒力测定有药膜法、点滴法、喷雾法、喷粉法和浸液法等 室内比较精确的触杀毒力测定方法是点滴法和药膜法。本实验采用点滴法(topical pplication)。是将一定量农药丙酮液点滴在虫体的一定部位上，药剂可能自体壁进入体内。 目的要求 通过本实验可以学习到一种比较准确的杀虫剂触杀毒力测定方法，并进行有关毒力数掘 整理及其。 性检脸 实验用具 容量瓶(10、25、50及100ml)、微量点滴器或毛细管微量点滴器、吸管、培养皿、烧 杯、滤纸、平头摄子、计算纸。 实验材料 乙酰甲胺磷，辛硫磷，丙酮，可选用室内人工饲养的粘虫(Mythimna separta Walker) 玉米螟(Ostrinia furnacalis G)、棉铃虫(Heliothis armigera Hubner)或直接采自田间的菜青 虫等4龄幼虫，荔枝椿象成虫(Tessaratoma papillosa Drury)也可根据不同地区或不同季节 任选一种试虫。 测试方法（选用玉米螟为实验材料） 1)预 先用丙酮将乙酰甲胺磷配制成若干个不同浓度，选取4龄玉米螟幼虫若 干，每个浓度用点滴器（或微量进样器）点滴药液于幼虫的胸部背面，每头虫点滴1山，每 度点滴虫数不少于30头，待药液干后，把5一8头虫盛于一皿中，加入少量饲料，盖好培养 皿，写好标记，经24小时后检查试虫的生存及死亡头数，计算其死亡率。从这些浓度中找 出适合的浓度，即找出其死亡率在20一90%之间的5一7个不同剂量的等比浓度供下一步试 哈用 2)根据上步预备试验结果，如本实验可用乙酰甲胺磷有如下浓度：500、 1000、2000 4000、8000、12000和16000ppm。可设7组，每组选择4龄玉米暝幼虫210头，分别放在 垫有滤纸的培养皿中（滤纸预先加湿），每皿放10头，每种浓度设有3个重复。 3)用微量点滴器盛装药液，从低浓度到高浓度点滴，每虫点滴1山于幼虫部背板处 待药液挥发后，添加适量人工饲料于皿中。对照虫仅点滴丙酮，其他处理与上不同。 4)试验观察及结果整理试验期间记录温湿度，施药后24小时检查每种处理的生或死 虫数。统计各浓度幼虫的死亡率和校正死亡率%。计算公式如下 校正死亡率(96)=处理组死亡率(6-：对照组死亡率(0×1O0 100%-对照组死亡率(%) 或 校正死亡率(%)=处理组生 100 最后采用绘图法或直线回归方程求LD50,并用方差分析法检定其可靠性程度。 例如：乙酰甲胺磷对玉米螟幼虫触杀LD0毒力测定结果及检验。 1陆甲胺砖对玉米幼中触杀结果（见表6 -1 2.绘图法求LD 此方法以剂量对 数作 横坐标 机率值作纵坐标，绘制直角坐标系。在 直角坐标中找出该次试验的坐标点，并用一直线连接起米，该直线称“剂量对数一死亡率机 率直线”。从机率值“5”处引一与横坐标平行的直线与“剂量对数一死亡机率直线”相交， 以相交点引一线垂直于横轴，此垂线与横坐标的交点，即为乙酰甲胺磷对玉米螟D0的剂
实验三 杀虫剂触杀毒力（LD50）测定（点滴法） 目前使用的杀虫剂大多数都具有较强的触杀作用，所以杀虫剂的触杀毒力测定显得特别 重要。触杀毒力测定有药膜法、点滴法、喷雾法、喷粉法和浸液法等。 室内比较精确的触杀毒力测定方法是点滴法和药膜法。本实验采用点滴法（topical application）。是将一定量农药丙酮液点滴在虫体的一定部位上，药剂可能自体壁进入体内。 目的要求 通过本实验可以学习到一种比较准确的杀虫剂触杀毒力测定方法，并进行有关毒力数据 整理及其可靠性检验。 实验用具 容量瓶（10、25、50 及 100ml）、微量点滴器或毛细管微量点滴器、吸管、培养皿、烧 杯、滤纸、平头镊子、计算纸。 实验材料 乙酰甲胺磷，辛硫磷，丙酮，可选用室内人工饲养的粘虫（Mythimna separta Walker）、 玉米螟（Ostrinia furnacalis G）、棉铃虫（Heliothis armigera Hubner）或直接采自田间的菜青 虫等 4 龄幼虫，荔枝椿象成虫（Tessaratoma papillosa Drury）也可根据不同地区或不同季节 任选一种试虫。 测试方法（选用玉米螟为实验材料） 1) 预备试验 先用丙酮将乙酰甲胺磷配制成若干个不同浓度，选取 4 龄玉米螟幼虫若 干，每个浓度用点滴器（或微量进样器）点滴药液于幼虫的胸部背面，每头虫点滴 1ul,每浓 度点滴虫数不少于 30 头，待药液干后，把 5－8 头虫盛于一皿中，加入少量饲料，盖好培养 皿，写好标记，经 24 小时后检查试虫的生存及死亡头数，计算其死亡率。从这些浓度中找 出适合的浓度，即找出其死亡率在 20－90％之间的 5－7 个不同剂量的等比浓度供下一步试 验用。 2) 根据上步预备试验结果，如本实验可用乙酰甲胺磷有如下浓度：500、1000、2000、 4000、8000、12000 和 16000ppm。可设 7 组，每组选择 4 龄玉米螟幼虫 210 头，分别放在 垫有滤纸的培养皿中（滤纸预先加湿），每皿放 10 头，每种浓度设有 3 个重复。 3) 用微量点滴器盛装药液，从低浓度到高浓度点滴，每虫点滴 1ul 于幼虫胸部背板处， 待药液挥发后，添加适量人工饲料于皿中。对照虫仅点滴丙酮，其他处理与上不同。 4) 试验观察及结果整理 试验期间记录温湿度，施药后 24 小时检查每种处理的生或死 虫数。统计各浓度幼虫的死亡率和校正死亡率％。计算公式如下： 或 100 100% (%) (%) (%) % − − = 对照组生存率 处理组生存率 对照组生存率 校正死亡率（ ） 最后采用绘图法或直线回归方程求 LD50，并用方差分析法检定其可靠性程度。 例如：乙酰甲胺磷对玉米螟幼虫触杀 LD50 毒力测定结果及检验。 １．乙酰甲胺磷对玉米螟幼虫触杀结果（见表 6—1）。 2．绘图法求 LD50 此方法以剂量对数作横坐标，机率值作纵坐标，绘制直角坐标系．在 直角坐标中找出该次试验的坐标点，并用一直线连接起来，该直线称“剂量对数－死亡率机 率直线”。从机率值“5”处引一与横坐标平行的直线与“剂量对数－死亡机率直线”相交， 以相交点引一线垂直于横轴，此垂线与横坐标的交点，即为乙酰甲胺磷对玉米螟 LD50 的剂 100 100% (%) (%) (%) % − − = 对照组死亡率 处理组死亡率 对照组死亡率 校正死亡率（ ）
量对数值，再查反对数表，即为LD值。（见图6一1）. 因此，乙酰甲胺磷对玉米螟4龄幼虫触杀毒力LD0为0.0072ug/头（试验时如把幼虫称 重则其单位可为gg 3·剂量对数机率值直线的验证及LD0的计算 1)求直线回归方程y=a+bx 2)求LD50(用回归直线计算)。 因为当机率y=5时即为50%的死亡率，所以将y=5代入回归方程中，即可求出D0 3)方差分析检定 4.LD0标准误差和置信区间（可靠范围）上面所求出的LD是人工饲料饲养的玉米 螟幼虫LD0,其值往往受到所取样本影响，与昆虫的群体有一定的差距，即所求的LD50不一 定代表群体的实际情况。因此，还需计算出LD的标准误差以及置信区间（可能的实际所 在的范围)。 I)LD标准误差 2)置信区间当机率P-0.05,群体自由度df=∞时，查t表：05=1.96，因此，当LD05%最 小显著性差异(1SD)0s=tos(df=o∞)×Sm=1.96×0.0328-00064.但是.由于Sm是LDs1 标准误的对数值，要换算成本来数值时，不能直接由对数表查回，因为我们前面用的时 og10.因此标准误差(S)由对数查回的计算方法为：LDs0X1og10XS=0.0078X23X 0.00640.0012 因此玉米螟幼虫群体LD0的95%置信区间是 0.0078±0.0012=0.0089.0.0067ug头之间 习作 将实验结果列成表格，分别用作图法即回归方程求LC知或Do,并且进行可靠性的检 验
量对数值，再查反对数表，即为 LD50 值。（见图 6－1）。 因此，乙酰甲胺磷对玉米螟 4 龄幼虫触杀毒力 LD50为 0.0072ug/头（试验时如把幼虫称 重则其单位可为 ug/g）。 ３．剂量对数机率值直线的验证及 LD50 的计算 1) 求直线回归方程 y=a+bx 2) 求 LD50（用回归直线计算）。 因为当机率 y=5 时即为 50％的死亡率，所以将 y=5 代入回归方程中，即可求出 LD50。 3) 方差分析检定 ４. LD50 标准误差和置信区间（可靠范围） 上面所求出的 LD50 是人工饲料饲养的玉米 螟幼虫 LD50,其值往往受到所取样本影响，与昆虫的群体有一定的差距，即所求的 LD50 不一 定代表群体的实际情况。因此，还需计算出 LD50 的标准误差以及置信区间（可能的实际所 在的范围）。 1） LD50 标准误差 2） 置信区间 当机率 P=0.05,群体自由度 df=∞时,查 t 表：t0.05=1.96,因此,当 LD505%最 小显著性差异(LSD)0.05=t0.05(df=∞)×Sm=1.96×0.0328=0.0064.但是,由于 Sm 是 LD50 标准误的对数值,要换算成本来数值时,不能直接由对数表查回,因为我们前面用的时 log10,因此标准误差(Sm)由对数查回的计算方法为:LD50×log10×Sm=0.0078×2.3× 0.0064=0.0012 ．因此玉米螟幼虫群体 LD50 的 95% 置信区间是 0.0078±0.0012=0.0089-0.0067ug/头之间． 习作 将实验结果列成表格，分别用作图法即回归方程求 LC50 或 LD50，并且进行可靠性的检 验