第十 动物基因二 (Animal Genetic Engineering)
动物基因工程 （Animal Genetic Engineering） 第十章
生戛內容 第一节目的基因的获取 第二节基因体外重组 第三节转基因 第四节基园敲除与基因诊断 第五节动物克隆技术
主要内容 第一节 目的基因的获取 第二节 基因体外重组 第三节 转基因 第四节 基因敲除与基因诊断 第五节 动物克隆技术
什么是动物基因工程? 动物基因工程,原称遗传工程,是应用DNA重组 技术,按照人们的意愿,在基因水平上改变生物遗传 性,创造新生物物种,通过工程化为人类提供有用产 品及服务的技术;或指应用现代化的生物科学和遗传 学技术,对动物基因进行操纵或改造的科学工程。 基因工程的核心技术是DNA的重组技术,还包括基因 的表达技术,基因的突变技术,基因的导入技术等
动物基因工程，原称遗传工程，是应用DNA重组 技术，按照人们的意愿，在基因水平上改变生物遗传 性，创造新生物物种，通过工程化为人类提供有用产 品及服务的技术；或指应用现代化的生物科学和遗传 学技术，对动物基因进行操纵或改造的科学工程。 基因工程的核心技术是DNA的重组技术，还包括基因 的表达技术，基因的突变技术，基因的导入技术等。 什么是动物基因工程？
基因工程的基本操诈 基因工程一般分为4个步骤 一是取得符合人们要求的DNA片段,这种DNA片段 被称为“目的基因”; 二是将目的基因与质粒或病毒DNA连接成重组DNA; 是把重组DNA引人某种细胞; 四是把目的基因能表达的受体细胞挑选出来
基因工程一般分为4个步骤： 一是取得符合人们要求的DNA片段，这种DNA片段 被称为“目的基因” ； 二是将目的基因与质粒或病毒DNA连接成重组DNA； 三是把重组DNA引人某种细胞； 四是把目的基因能表达的受体细胞挑选出来。 基因工程的基本操作
目的基因取
第一节 目的基因获取
1基因组DNA及总RNA的提取 动物DNA的来源(核DNA、线粒体DNA、 质粒DNA) 1.血液、毛发、皮屑(口腔上皮细胞)、精液、化石 及耳朵等活体组织; 2.固定和包埋的组织标本:脱蜡、蛋白酶K消化 RNA来源:新鲜组织或细胞
1 基因组DNA及总RNA的提取 动物DNA的来源（核DNA、线粒体DNA、 质粒DNA） 1. 血液、毛发、皮屑（口腔上皮细胞）、精液、化石 及 耳朵等活体组织； 2. 固定和包埋的组织标本：脱蜡、蛋白酶K消化 RNA来源：新鲜组织或细胞
DNA提取方法:常规苯酚氯仿方法、试剂盒 方法一; RNA提取:所用器皿和试剂必需经高温灭菌 或DEPC处理 (3.8kb) 18(2.0kb)u Genome dNA TotaI rNa
DNA提取方法：常规苯酚-氯仿方法、试剂盒 方法---； RNA提取：所用器皿和试剂必需经高温灭菌 或DEPC处理 Genome DNA Total RNA
2基因文 基因文库( Gene library)包括cDNA文库 ( CDNAlibrary和基因组文库( Genome library). 文库: cDNA是指以 mRNA为模板,经反转录酶催化合成DNA, 则此DNA序列与mRNA互补,称为互补DNA或cDNA。 RPCR:反转录PCR( Reverse Transcription PCR)
2 基因文库 基因文库(Gene library)包括cDNA文库 (cDNA library)和基因组文库(Genome library)。 文库: cDNA是指以mRNA为模板,经反转录酶催化合成DNA， 则此DNA序列与mRNA互补，称为互补DNA或cDNA。 RT-PCR：反转录PCR（Reverse Transcription PCR）
cDNA文床 (CDNA library) cDNA文库;提取出组织细胞的全部 mRNA,在体外反转录成cDNA,与适当的载体常 用噬菌体或质粒载体连接后转化受体菌,则每 个细菌含有一段cDNA,并能繁殖扩增,这样包 含着细胞全部 mRNA信息的cDNA克隆集合称为该 组织细胞的cDNA文库。 实际为不包含内含子的基因组文库
cDNA文库：提取出组织细胞的全部 mRNA，在体外反转录成cDNA，与适当的载体常 用噬菌体或质粒载体连接后转化受体菌，则每 个细菌含有一段cDNA，并能繁殖扩增，这样包 含着细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合称为该 组织细胞的cDNA文库。 实际为不包含内含子的基因组文库。 cDNA文库 (cDNA library)
基因组文 (Genomic DNA Library) 从生物组织细胞提取出全部DNA,用物理方法或酶法 将DNA降解成预期大小的片段,然后将这些片段与适 当的载体连接,转入受体细菌或细胞,这样每一个细 胞接受了含有一个基因组DNA片段与载体连接的重组 DNA分子,而且可以繁殖扩增,许多细胞一起组成 个含有基因组各DNA片段克隆的集合体,就称为基因 组DNA文库。如果这个文库足够大,能包含该生物基 因组DNA全部的序列,就是该生物完整的基因组文库, 能从这文库中钓取该生物的全部基因或DNA序列
基因组文库 （Genomic DNA Library） 从生物组织细胞提取出全部DNA ，用物理方法或酶法 将DNA降解成预期大小的片段，然后将这些片段与适 当的载体连接，转入受体细菌或细胞，这样每一个细 胞接受了含有一个基因组DNA片段与载体连接的重组 DNA分子，而且可以繁殖扩增，许多细胞一起组成一 个含有基因组各DNA片段克隆的集合体，就称为基因 组DNA文库。如果这个文库足够大，能包含该生物基 因组DNA全部的序列，就是该生物完整的基因组文库， 能从这文库中钓取该生物的全部基因或DNA序列