牛物宇垫跨 实验 乳酸菌的分离及初步鉴定 主讲：郑海涛
实验一 乳酸菌的分离及初步鉴定 主讲：郑海涛
一、实验目的 1、学习掌握食品中乳酸杆菌的常规分 离方法并作初步的鉴别。 2、学会十倍系列稀释和倒平板的方法
一、实验目的 1、学习掌握食品中乳酸杆菌的常规分 离方法并作初步的鉴别。 2、学会十倍系列稀释和倒平板的方法
二、实验原理 乳酸杆菌为厌氧和微好氧菌，革兰氏 染色阳性，可以发酵葡萄糖或乳糖产生乳 酸，并将培养基中的碳酸钙溶解。有些菌 如保加利亚乳杆菌在15℃时不生长，在 45℃甚至50℃时生长，最适生长温度为 40一43℃；而有些菌如植物乳杆菌在15℃ 生长，45℃时一般不生长，最适生长温度 为30℃左右。通常我们利用这些特点可作 初步的鉴别
乳酸杆菌为厌氧和微好氧菌，革兰氏 染色阳性，可以发酵葡萄糖或乳糖产生乳 酸，并将培养基中的碳酸钙溶解。有些菌 如保加利亚乳杆菌在 15℃时不生长，在 45℃甚至 50℃时生长，最适生长温度为 40 —43℃；而有些菌如植物乳杆菌在15℃ 生长，45℃时一般不生长，最适生长温度 为30℃左右。通常我们利用这些特点可作 初步的鉴别。 二、实验原理
二、实验原理
二、实验原理
三、实验材料和仪器 1、酸牛奶1瓶，泡菜汁1管，9m1生理盐水5管， MRS培养基100m1,灭菌CaC033克（用纸包）。 2、40℃和30℃恒温箱，振荡器，超净工作台，1m1 无菌吸管5支，培养皿6套，革兰氏染色液1套
1、酸牛奶1瓶，泡菜汁1管，9ml生理盐水5管， MRS培养基100ml，灭菌CaCO3 3克（用纸包）。 2、40℃和30℃恒温箱，振荡器，超净工作台，1ml 无菌吸管5支，培养皿6套，革兰氏染色液1套。 三、实验材料和仪器
四、实验方法与步骤 1 ml 1 ml 1 ml Imi 1 ml 1相 自-nl brath Sample to 110 1/100 1/10 1/10 1/10 be counted 1/10 159 Too many to count 169X103 。159x05 P月e Dilution Organisma per ml oount fector of original sample
1. 将酸奶和泡菜汁分别制成10倍系列稀释液。 2. 取适当稀释度之稀释液0．5或1ml于培养皿中。 3. 以无菌操作把无菌CaCO3 加入融化了的MRS培养基 中，于自来水中迅速冷却培养基至45℃左右。轻摇使 CaCO3混均，但不得产生气泡。立即倒入培养皿中，摇 匀。 4. 待培养基凝固后，倒置放于40℃和30℃恒温箱中培 养（酸牛乳样品在40℃下培养；酸泡菜汁样品在30℃ 下培养） 四、实验方法与步骤
五、实验结果观察 24或48小时后取出检查。 (1)泡菜汁样品中，菌落周围产生CaC03 圈，菌落直径为1~3mm,乳白色偶有浓色 或暗黄色。用接种环挑少许涂片。革兰氏 染色镜检为G+,菌体大小约0.9~1.2×3~ 8μm,单生，成对或短链
24或48小时后取出检查。 （1）泡菜汁样品中，菌落周围产生CaCO3 圈，菌落直径为1～3mm，乳白色偶有浓色 或暗黄色。用接种环挑少许涂片。革兰氏 染色镜检为G+，菌体大小约0.9～1.2×3～ 8 μm，单生，成对或短链。 五、实验结果观察
五、实验结果观察 24或48小时后取出检查。 (2)酸牛奶样品中菌落直径1~3mm,无 色素，呈白色至淡灰色。通常菌落表面粗 糙，革兰氏染色镜检为G+,细胞宽2um, 细胞较长有时呈线形，幼龄培养物中单生 或成对
24或48小时后取出检查。 （2）酸牛奶样品中菌落直径1～3mm，无 色素，呈白色至淡灰色。通常菌落表面粗 糙，革兰氏染色镜检为G+，细胞宽2 μm， 细胞较长有时呈线形，幼龄培养物中单生 或成对。 五、实验结果观察
五、实验结果观察
五、实验结果观察
六、思考题 1、融化后的培养基为什么要迅速冷却 到50℃左右倒平板？ 2、培养基中加入CaC03的目的是什么？
1、融化后的培养基为什么要迅速冷却 到50℃左右倒平板？ 2、培养基中加入CaCO3的目的是什么？ 六、思考题