第一节病毒感染的检查方法
第一节 病毒感染的检查方法
一、标本的采集与送检
一、标本的采集与送检
1.采集急性期标本；2.无菌操作，抗生素处理易污染标本：3.冷藏保存、快速送检：50%甘油缓冲盐水低温保存；-70℃保存；4.血清学诊断双份血清：发病初期和病后2～3周各取1份；
1.采集急性期标本； 3.冷藏保存、快速送检： 50%甘油缓冲盐水低温保存；-70℃保存； 4.血清学诊断双份血清：发病初期和病后2～3周 各取1份； 2.无菌操作，抗生素处理易污染标本；
二、 病毒的分离与鉴定
二、病毒的分离与鉴定
（一）病毒的分离培养
（一）病毒的分离培养
（知识点）分离培养方法动物接种鸡胚培养细胞培养
分离培养方法 动物接种 鸡胚培养 细胞培养
1.动物接种>最早的病毒培养方法，根据病毒亲嗜性选择敏感动物及适宜接种部位：>观察动物发病情况，进行血清学检测，测定ID50和LD50等：目前用的不多
1.动物接种 Ø最早的病毒培养方法，根据病毒亲嗜性选择 敏感动物及适宜接种部位； Ø观察动物发病情况，进行血清学检测，测定 ID50和LD50等； 目前用的不多
（知识点）2.鸡胚培养鸡胚准备 >卵检>定胚位>接种美#书#6面的持
2.鸡胚培养 鸡胚准备 卵检 定胚位 接种
采用孵化9-14天的鸡胚绒毛尿囊膜接种：壳膜适用于痘苗病毒、人类疱疹病毒等：T气星保装腔绒毛尿粪腔羊膜腔尿囊腔接种：卵黄翼卵白适用于流感病毒、腮腺炎病毒等：2绒毛尿囊膜接种法1卵黄囊的接种法三、羊膜腔接种：适用于流感病毒的初次分离：四、卵黄囊接种：适用于嗜神经病毒等；3尿囊腔接种法4羊膜腔换种法
一、绒毛尿囊膜接种： 适用于痘苗病毒、人类疱疹病毒等； 二、尿囊腔接种： 适用于流感病毒、腮腺炎病毒等； 三、羊膜腔接种： 适用于流感病毒的初次分离； 四、卵黄囊接种：适用于嗜神经病毒等； 采用孵化9-14天的鸡胚
（知识点）3.细胞培养单层细胞培养(monolayercellculture)分类悬浮细胞培养(suspended cell culture)原代细胞细胞种类二倍体细胞人传代细胞系Jsb单层细胞细胞培养瓶
3.细胞培养 单层细胞培养(monolayer cell culture) 悬浮细胞培养(suspended cell culture) 分类 原代细胞 二倍体细胞 传代细胞系 细胞种类