• Characteristics of HPLC(特点) • Structure of high performance liquid chromatographer (仪器构造） • Types and separation principles of HPLC methods(方法的类型及其分离原理） • Factors influencing broadening of chromatographic peaks and separation(影响色谱峰扩展及色谱分离的因素) • Stationary phase of HPLC(液相色谱固定相) • Mobile phase of HPLC(液相色谱流动相) • Selection of chromatographic methods(色谱方法的选择) • Requirements:要求掌握HPLC法的基本原理 • Emphases: 重点学会色谱分析方法的选择

第一节 概述 高效液相色谱法：以气相色谱为基础，在经典液相色谱实验和技术基础上建立的一种液相色谱法； 一、HPLC与经典LC区别 二、HPLC与GC差别 三、高效液相色谱仪流程图 四、特点 第二节 基本理论和条件选择 热力学理论：塔板理论——平衡理论 基础 动力学理论：速率理论——Vander方程 一、塔板理论 二、速率理论 三、HPLC法中分离条件的选择 第三节 各类高效液相色谱法 一、液固吸附色谱法（LSC） 二、液液分配色谱法（LLC） 三、化学键合相色谱法（BPC） 第四节 影响分离的因素 第五节 高效液相色谱仪

与气相色谱法比较，HPLC的优点 1. 分析对象广 气相色谱只限于分析气体和沸点较低的化合物； HPLC不受样品挥发性和热稳定性的限制，适用于高沸点、热稳 定性差、摩尔质量大的物质。原则上讲，几乎可以分析除永久气 体外所有的有机和无机化合物

第一节概述 高效液相色谱法:以气相色谱为基础,在经典液相色谱实验和技术基础上建立的一种液相色谱法。 一、HPLC与经典LC区别 二、HPLC与GC差别 三、高效液相色谱仪流程图 四、特点

一、HPLC与经典LC区别 二、HPLC与GC差别 三、高效液相色谱仪流程图 四、特点

高效液相色谱法在中成药检验中的应用 Application of HPLC to Quality Control of Traditional Chinese Patent Medicine 1. HPLC的定义、特点和类型 2. 色谱仪的组成及其工作原理 3. 药检的一般步骤和方法

4.4 HPLC固定相、流 4.4.1 液固（吸附）色谱固定相 4.4.2 流动相 4.4.3 液固吸附色谱 4.4.4 分配色谱 4.4.5 反相色谱与正相色谱 4.4.6 体积排阻色谱法 4.4.9 亲和色谱法 4.4.10 手性色谱（CC）

实验一 水分的测定（烘重量法） 实验二 食品水分活度的测定（直接测定法） 实验三 食品水分活度（aw）的测定（水分活度仪测定法） 实验四 粗灰分的测定（干式灰化法） 实验五 总酸的测定（滴定法） 实验六 还原糖的测定 实验七 淀粉含量的测定 实验八 淀粉含量的测定（碘量法） 实验九 美拉德反应初始阶段的测定 实验十 果胶的提取和果酱的制备 实验十一 淀粉糊化及酶法制备淀粉糖浆及其葡萄糖值的测定 实验十二 豆类淀粉和薯类淀粉的老化（粉丝的制备与质量感官评价） 实验十三 粗脂肪的测定（索氏抽提法） 实验十四 脂肪氧化、过氧化值及酸价的测定（滴定法） 实验十五 大豆中油脂和蛋白质的分离 实验十六 蛋白质的盐析和透析 实验十七 蛋白质的功能性质（一） 实验十八 蛋白质的功能性质（二） 实验十九 粗蛋白质的测定（微量凯氏定氮法） 实验二十 可溶性蛋白质的测定（考马斯亮蓝G-250法） 实验二十一 茚三酮法测定氨基酸总量 实验二十二 维生素C含量的测定 (2,6-二氯酚靛酚法) 实验二十三 维生素C含量的测定（紫外快速测定法） 实验二十四 总抗坏血酸含量的测定（荧光法） 实验二十五 从番茄中提取番茄红素和β—胡萝卜素 实验二十六 β-胡萝卜素含量的测定（HPLC法） 实验二十七 类黄酮含量的测定（HPLC法） 实验二十八 绿色果蔬分离叶绿素及其含量测定 实验二十九 水果皮颜色和淀粉白度的测量（测色色差计的使用） 实验三十 食品感官质量评价

In recent years, high performance liquid chromatography (HPLC) has grown in popularity as a determinative step for residue analysis, until today it is accepted as complementary to the more traditional gas liquid

1. 杂质检查 水分：有烘干法、减压干燥法、甲苯法、GC法 灰分：包括总灰分和酸不溶性灰分的测定 重金属及有害元素：指砷、铅、镉、汞和铜等，采用原子吸收分光光度法和电感耦合等离子体质谱法测定 二氧化硫残留：采用酸碱滴定法、GC法和离子色谱法 农药残留量：采用GC法和色-质联用(LC-MS,GC-MS)法测定 黄曲霉毒素：采用HPLC法和LC-MS/MS法测定 浸出物：指用适宜溶剂提取的有效物质，重量法测定 2. 含量测定： ⚫ 色谱法——包括HPLC法，GC法，TLC-扫描法，LC-MS法 ⚫ 光谱法——直接紫外法，比色法 ⚫ 化学法——滴定法 3. 鉴别试验： ⚫ 指纹图谱/特征图谱法——通过对中药整体特性的图谱识别，提供一种比较全面的控制中药质量的方法 ⚫ DNA条形码分子鉴定（聚合酶链式反应）法——是一种分子生物学技术，主要步骤：供试品处理→DNA提取→PCR扩增→电泳检测