第17章高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography, HPLC)
第17章 高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography, HPLC)
概述 经典Lc与HPLC比较 经典LC HPLC 柱之内径 1~5cm ~0.4cm 长度 50~100cm 15~50cm 填充材料粒度150m-200m4m-10m 使用压力 1-10atm 50~200atm 分离时间 0.5h~天 10min HPLc:.用高压输液泵,高效微粒固定相和高灵敏度检测器 HPLC特点:高压、高速、高效、高灵敏度、样品回收方便
概述 经典LC HPLC 柱之内径 1~5cm ~0.4cm 长度 50~100cm 15~50cm 填充材料粒度 150µm~200µm 4µm~10µm 使用压力 1~10atm 50~200atm 分离时间 0.5h~天 ~10min 经典LC与HPLC比较 HPLC特点:高压、高速、高效、高灵敏度、样品回收方便 HPLC:采用高压输液泵,高效微粒固定相和高灵敏度检测器
与气相色谱法比较,HPLC的优点 气相色谱只限于分析气体和沸点较低的化合物; HPLc不受样品挥发性和热稳定性的限制,适用于高沸点、热稳 定性差、摩尔质量大的物质。原则上讲,几乎可以分析除永久气 体外所有的有机和无机化合物 气相色谱的流动相仅起运载作用,对组分 不产生相互作用力;HPLc的流动相对组分产生相互作用力,相 当于增加了一个控制和改进分离条件的参数。 气相色谱法一般在较高温度下进行 缺点:仪器设备费用昂贵,操作严格
与气相色谱法比较,HPLC的优点 1. 分析对象广 气相色谱只限于分析气体和沸点较低的化合物; HPLC不受样品挥发性和热稳定性的限制,适用于高沸点、热稳 定性差、摩尔质量大的物质。原则上讲,几乎可以分析除永久气 体外所有的有机和无机化合物。 2. 流动相对分离起作用 气相色谱的流动相仅起运载作用,对组分 不产生相互作用力;HPLC的流动相对组分产生相互作用力,相 当于增加了一个控制和改进分离条件的参数。 3. 经常在室温条件下操作 气相色谱法一般在较高温度下进行 缺点:仪器设备费用昂贵,操作严格
高效液相色谱法的分类 根据分离机理 液液分配色谱 化学键合相色谱 液固吸附色谱 离子交换色谱 离子色谱 离子对色谱 尺寸排阻色谱 亲和色谱
高效液相色谱法的分类 根据分离机理 • 液-液分配色谱 • 化学键合相色谱 • 液-固吸附色谱 • 离子交换色谱 • 离子色谱 • 离子对色谱 • 尺寸排阻色谱 • 亲和色谱
高效液相色谱仪 Sample ervoir Solvent sOlvent 2 pump splitter Pressure 2 gauge Degasser 1 Degasser 2 column lixing vessel Analytical High pressure pump differential detector to fraction collector 1.储液瓶(输液管入口端安装有过滤 器);2高压输液泵;3混合器和阻 尼器;4进样器(闯);5色谱柱; 6检测器;7.废液瓶;8数据处理和 控制系统
高效液相色谱仪 1.储液瓶(输液管入口端安装有过滤 器);2.高压输液泵;3.混合器和阻 尼器;4.进样器(阀);5.色谱柱; 6.检测器;7.废液瓶;8.数据处理和 控制系统