《医学微生物学与免疫学实验指导》为适应我国高等医学教育改革和发展的需要，培养新世纪的实用型医学人才，提高学生的动手、合作能力，在院校有关部门的组织支持下，经过教研室全体教师的共同努力，编写了这本实用性医学微生物学和免疫学实验指导，为了使学生在有限的时间内熟练掌握基础理论知识和基本技能。希望能借此提高学生的实验课质量，为今后的临床工作打下扎实的基础。 实验一 细菌基本形态的观察 实验二 细菌特殊结构的染色和观察 实验三 细菌培养 实验四 细菌的分布与无菌操作技术 实验五 消毒灭菌 实验六 抗链球菌溶血素“O”试验 实验七 厌氧性细菌 实验八 分枝杆菌属 实验九 螺旋体 实验十 其他细菌 实验十一 病原性真菌的检测 实验十二 病毒的分离培养 实验十三 病毒血凝试验 综合设计性实验 实验十四 细菌的生化反应 实验十五 病原性球菌感染检查与鉴定 实验十六 肠道杆菌的检测 免疫学部分 实验室规则 实验一 凝集反应 实验二 沉淀反应 实验三 细胞分离技术及 E 花环形成试验 实验四 变态反应试验 实验五 免疫标记技术 实验六 吞噬功能的检测 实验七 白细胞介素-2（IL-2）生物学活性测定

实验一 植物基因组DNA的提取及其定性定量分析. 1 实验二 PCR扩增目的片段和胶回收. 8 实验三 目的片段和载体的连接. 15 实验四 大肠杆菌感受态细胞的制备和转化效率检测. 18 实验五 重组质粒的转化. 20 实验六 重组质粒DNA的提取及酶切鉴定. 23 实验七 RNA的提取（TRIzol法）. 30 实验八 mRNA的分离与纯化. 36 实验九 RT-PCR技术. 38 实验十 用mRNA差异显示法分离特异表达的基因片段 . 40 实验十一 cDNA文库的构建. 46 实验十二 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE） . 51 实验十三 Southern印迹杂交法（Southern blot）. 56 实验十四 RNA分子杂交（Northern blot）. 62 实验十五 固定化蛋白质的免疫生化鉴定（Western blot）. 67 实验十六 RFLP技术. 71 实验十七 RAPD技术. 74 实验十八 细胞分裂中期染色体的荧光原位杂交技术(FISH). 76 附录一 常用缓冲液及其配制. 80 附录二 常用抗生素溶液. 85 附录三 常用贮存液的配制. 85 附录四 常用核酸蛋白换算数据. 93 附录五 染料在凝胶中的迁移速度. 94 附录六 实验中的一些好习惯. 95

实验一 职业（劳动）卫生学调查 实验二 机械制造业职业危害调查 实验三 空气样品和生物材料中有害物质的测定 实验四 职业紧张调查与神经行为功能测试 实验五 职业病危害事故案例分析 实验六 工作场所空气中铅及其化合物的测定 实验七 工作场所空气中汞及其化合物的测定 实验八 工作场所空气中镉及其化合物的测定 实验九 工作场所空气中烷烃类化合物的测定 实验十 工作场所空气无机含碳化合物的测定 实验十一 工作场所空气中卤代不饱和烃类化合物的测定 实验十二 工作场所空气中有机磷农药的测定 实验十三 尿中δ-氨基- γ -酮戊酸（δ-ALA）的含量测定 实验十四 全血胆碱酯酶活性测定 实验十五 外周血淋巴细胞染色体分析 实验十六 粉尘浓度与分散度的测定 实验十七 粉尘中游离二氧化硅含量的测定 实验十八 尘肺阅片技术 实验十九 气象条件测定 实验二十 噪声和振动的测量 实验二十一 物理因素对人体作用的检查 实验二十二 陶瓷制造业职业危害调查 实验二十三 纺织工业职业危害调查 实验二十四 录像 附录一 工作场所空气中有毒物质容许浓度 附录二 工作场所空气中粉尘容许浓度

生物入侵对生物多样性的影响. 1 谁发现了艾滋病病毒？. 5 家蚕：吐出基因的秘密. 9 近视与遗传. 14 孟德尔的幸与不幸. 23 禽类蛋壳颜色及其基因的遗传研究进展. 26 代谢组学技术及其在临床研究中的应用. 31 酒精依赖相关基因的遗传多态性. 45 毒品成瘾与脑组织基因表达谱. 50 人猿超科和旧大陆猴 7 种高等灵长类 FKN 全基因序列的测定及进化. 55 蒙古马遗传多样性研究进展. 59 XY 染色体决定男女. 69 阅读障碍的遗传学研究进展. 77 人类的体能与遗传. 83 肾上腺糖皮质激素与生物钟. 90 新型定点重组酶系统在植物基因转化和基因叠加中的应用前景. 98 新型分子标记——SRAP 与 TRAP 及其应用.104 蛋白质酪氨酸磷酸酶 1B 与 2 型糖尿病及肥胖的关系.109 意识载体：揭开大脑之迷的钥匙.113 人类长寿相关基因研究进展.118 转基因生物技术育种: 机遇还是挑战？.123 神奇的模式植物-拟南芥.130 “率性而为”——自然界中的孤雌生殖.135 组织工程发展概况.139 先天畸形的发生原因.142 抗体—让自身免疫疾病走开.143 衰老过程：随机损害还是基因注定？.144 白化病.147 远缘杂交与小麦的进化.148 生物入侵对生物多样性的影响

实验一 细菌的染色检查法 实验二 细菌的人工培养 实验三 细菌的生化反应 实验四 动物实验技术 实验五 细菌致病作用的测定 实验六 外界因子对细菌的作用 实验七 细菌的变异和药物的抗菌试验 实验八 细菌血清学试验 实验九 血液、骨髓的细菌学检查 实验十 脓液的细菌学检查 实验十一 粪便的细菌学检查 实验十二 尿液的细菌学检查 实验十三 结核病人痰标本的细菌学检查 实验十四 细菌感染后血清中抗体测定 实验十五 病毒感染后的形态学观察 实验十六 病毒组织培养及病毒对细胞致病作用的观察 实验十七 病毒的半数组织感染量（TCID50）和蚀斑分析 实验十八 病毒感染后血清抗体测定 实验十九 酶联免疫吸附试验(ELISA)检测乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg) 实验二十 细菌耐药基因的重组 实验二十一 细菌 DNA 限制性核酸内切酶分析 实验二十二 核酸探针和分子杂交技术 实验二十三 核酸扩增技术 实验二十四 蛋白质的分子检测方法 实验二十五 病原性真菌 实验二十六 病原性螺旋体

第一节 概述 一、工作原理 二、散射光的测定 三、荧光测量 四、细胞分选原理 第二节 数据的显示与分析 一、参数 二、数据显示方式 三、设门分析技术 第三节 流式细胞仪免疫分析的技术要求 一、免疫检测样品制备 二、免疫分析中常用的荧光染料与标记染色 三、免疫胶乳颗粒的应用 四、流式细胞免疫学技术的质量控制 第四节 流式细胞术在免疫学检查中的应用 一、淋巴细胞及其亚群的分析 二、淋巴细胞功能分析 三、淋巴造血系统分化抗原及白血病免疫分型 四、肿瘤耐药相关蛋白分析 五、AIDS病检测中的应用 六、自身免疫性疾病相关HLA抗原分析 七、移植免疫中的应用 思考题 小结

燕麦( Avena sativa L.)具有许多农业上重要的性状。但小麦和燕麦分类上属不同族,亲缘 关系较远,有性杂交十分困难。近年来,在双子叶模式植物上建立的只转移供体亲本部分遗传 物质的原生质体不对称融合技术为将燕麦有益性状导入小麦提供了可能。实现体细胞杂种定 向不对称的途径有两种:是利用细胞周期停滞在间期的叶肉细胞原生质体为供体亲本与作 为受体亲本的培养细胞原生质体融合由于二者分裂速度的差异,使前者染色体大量片段化 ( fragmentation)而被消除( Bravo et al.,1985; Dudits et al.,1988);再是利用高于致死剂量的 电离射线处理供体亲本原生质体使其遗传物质大量消除后再与受体融合( Gleba et al 1990)

第一章 历史与展望 第一节 细胞生物学简史 第二节 当代细胞生物学研究内容 第三节 对未来的展望 第二章 细胞生物学实验技术 第一节 显微技术 第二节 生物化学与分子生物学技术 第三节 细胞分离技术 第四节 细胞培养与细胞杂交 第三章 细胞生物学基础知识 第一节 真核细胞 第二节 原核细胞与古核细胞 第三节 病毒与蛋白质感染因子 第四节 细胞的化学成分 第四章 质膜及其表面结构 第一节 质膜的化学组成 第二节 质膜的结构 第三节 细胞表面的分化 第五章 跨膜运输 第一节 被动运输 第二节 主动运输 第三节 膜泡运输的基本概念 第六章 细胞内功能区隔与蛋白质分选 第一节 蛋白质分选的基本原理 第二节 膜泡运输 第三节 内质网 第四节 高尔基体 第五节 溶酶体与过氧化物酶体 第七章 线粒体与叶绿体 第一节 线粒体 第二节 叶绿体 第三节 线粒体与叶绿体的蛋白质定向转运 第八章 细胞通信 第一节 基本概念 第二节 膜表面受体介导的信号转导 第三节 胞内受体介导的信号传导 第四节 蛋白降解与信号转导 第九章 细胞骨架 第一节 微丝 第二节 微管 第三节 中间纤维 第十章 细胞外基质 第一节 细胞外基质的大分子组成成分 第二节 细胞外基质的生物学作用 第十一章 细胞连接与细胞粘附分子 第一节 细胞连接 第二节 细胞粘附分子 第十二章 细胞核 第一节 核被膜 第二节 染色体 第三节 核仁 第四节 核基质 第十三章 细胞周期 第二节 有丝分裂 第三节 减数分裂 第四节 细胞周期的调控 第十四章 细胞分化 第一节 受精与胚胎发育 第二节 细胞分化的主要机制 第三节 模式动物——果蝇 第四节 细胞的分化潜能 第十五章 细胞衰老与死亡 第一节 细胞衰老 第二节 细胞坏死与凋亡 第三节 细胞凋亡的分子机理 第十六章 肿瘤细胞 第一节 癌细胞的主要特征 第二节 肿瘤形成 第三节 肿瘤的诊断与治疗

第一章 历史与展望 第一节 细胞生物学简史 第二节 当代细胞生物学研究内容 第三节 对未来的展望 第二章 细胞生物学实验技术. 第一节 显微技术. 第二节 生物化学与分子生物学技术. 第三节 细胞分离技术. 第四节 细胞培养与细胞杂交. 第三章 细胞生物学基础知识. 第一节 真核细胞. 第二节 原核细胞与古核细胞. 第三节 病毒与蛋白质感染因子. 第四节 细胞的化学成分. 第四章 质膜及其表面结构. 第一节 质膜的化学组成. 第二节 质膜的结构. 第三节 细胞表面的分化. 第五章 跨膜运输. 第一节 被动运输. 第二节 主动运输. 第三节 膜泡运输的基本概念. 第六章 细胞内功能区隔与蛋白质分选 第一节 蛋白质分选的基本原理 第二节 膜泡运输 第三节 内质网 第四节 高尔基体 第五节 溶酶体与过氧化物酶体 第七章 线粒体与叶绿体 第一节 线粒体 第二节 叶绿体 第三节 线粒体与叶绿体的蛋白质定向转运 第八章 细胞通信. 第一节 基本概念 第二节 膜表面受体介导的信号转导 第三节 胞内受体介导的信号传导 第四节 蛋白降解与信号转导 第九章 细胞骨架 第一节 微丝 第二节 微管 第三节 中间纤维 第十章 细胞外基质. 第一节 细胞外基质的大分子组成成分 第二节 细胞外基质的生物学作用 第十一章 细胞连接与细胞粘附分子 第一节 细胞连接 第二节 细胞粘附分子 第十二章 细胞核 第一节 核被膜 第二节 染色体 第三节 核仁 第四节 核基质 第十三章 细胞周期 第一节 基本概念 第二节 有丝分裂 第三节 减数分裂 第四节 细胞周期的调控 第十四章 细胞分化. 第一节 受精与胚胎发育 第二节 细胞分化的主要机制 第三节 模式动物——果蝇 第四节 细胞的分化潜能 第十五章 细胞衰老与死亡 第一节 细胞衰老 第二节 细胞坏死与凋亡 第三节 细胞凋亡的分子机理 第十六章 肿瘤细胞 第一节 癌细胞的主要特征 第二节 肿瘤形成 第三节 肿瘤的诊断与治疗