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A酵母菌作为表达外源基因受体菌的特征 B酵母菌的宿主系统 C酵母菌的载体系统 D酵母菌的转化系统 E酵母菌的表达系统 F利用重组酵母生产乙肝疫苗
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是指对遗传信息的分子操作和施工,即把 分离到的或合成的基因经过改造,插入载体 中,导入宿主细胞内,使其扩增和表达,从而获 得大量基因产物,或者令生物表现出新的性状. 基因工程(genetic engineering)或 重组DNA技术(recombinant DNA technology) 二十世纪生物科学具有划时代意义的巨大 事件,推动了生物科学的迅猛发展,并带动了生 物技术产业的兴起
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4.1连锁遗传理论的建立 4.2性状连锁遗传规律 4.3连锁与交换的遗传分析 4.4基因定位与连锁遗传图 4.5真菌类的染色体作图(自学) 4.6有丝分裂分离与重组(自学) 4.7连锁交换定律的意义
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医学遗传学的发展使临床诊断和临床检测技术迅速提高,人们对 人类遗传病的研究已经取得了许多重要成果。特别是重组 DNA 技术 在医学中的广泛应用,遗传病的治疗有了突破性的进展,已从传统的 手术治疗,饮食疗法,药物疗法等跨入了基因治疗,为遗传病根治开 辟了广阔的前景
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第一节 细菌的细胞和基因组 第二节 大肠杆菌的突变型及筛选 第三节 细菌的接合与染色体作图 第四节 中断杂交与重组作图 第五节 F`因子与性导 第六节 转化与转导作图
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DNA是储存遗传信息的物质,亲代的遗传信息如何真实地传给子代,这个问题的实质就 是DNA分子如何复制(replication)成完全相同的两个拷贝,即DNA的合成,可见通过复 制,遗传信息得以在传代中保留。 DNA分子中的遗传信息又如何表达呢?现知基因表达的第一步是通过转录 (transcription),即DNA的碱基按互补配对(g-c,a-t,a-u)的原则转变为RNA分子上相 应的碱基序列,接着RNA通过翻译(translation),以三个碱基的序列作为一个氨基酸的遗 传密码,从而决定蛋白质的一级结构
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随着反向遗传学操作技术的快速发展重组新城疫病毒载体已经成为病毒载体研究的热点,本文综述了新城疫病毒载体疫苗的优点及其在外源基因表达方面的研究进展
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实验一 细菌的染色检查法 实验二 细菌的人工培养 实验三 细菌的生化反应 实验四 动物实验技术 实验五 细菌致病作用的测定 实验六 外界因子对细菌的作用 实验七 细菌的变异和药物的抗菌试验 实验八 细菌血清学试验 实验九 血液、骨髓的细菌学检查 实验十 脓液的细菌学检查 实验十一 粪便的细菌学检查 实验十二 尿液的细菌学检查 实验十三 结核病人痰标本的细菌学检查 实验十四 细菌感染后血清中抗体测定 实验十五 病毒感染后的形态学观察 实验十六 病毒组织培养及病毒对细胞致病作用的观察 实验十七 病毒的半数组织感染量(TCID50)和蚀斑分析 实验十八 病毒感染后血清抗体测定 实验十九 酶联免疫吸附试验(ELISA)检测乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg) 实验二十 细菌耐药基因的重组 实验二十一 细菌 DNA 限制性核酸内切酶分析 实验二十二 核酸探针和分子杂交技术 实验二十三 核酸扩增技术 实验二十四 蛋白质的分子检测方法 实验二十五 病原性真菌 实验二十六 病原性螺旋体
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实验一 细菌感受态的制备和质粒的转化. 2 实验二 碱变性法提取质粒 DNA . 6 实验三 水平式琼脂糖凝胶电泳法检测 DNA . 11 实验四 DNA 的限制性内切酶酶切 . 15 实验五 DNA 的回收与连接 . 18 实验六 基因的 PCR 扩增. 23 实验七 用温度敏感型启动子表达系统表达目的基因. 29 实验八 基因组合生物合成新化合物. 36 实验九 药用甘草片中甘草酸含量的分析及其质量评价. 47 实验十 牛奶中酪蛋白和乳蛋白素粗品的制备. 48 实验十一 固定化细胞法生产 L-天冬氨酸和 L-丙氨酸. 50 实验十二 重组水蛭素Ⅲ的制备. 57 实验十三 酸醇提取法制备猪胰岛素. 65 实验十四 多肽缩宫素的 Fmoc 固相合成法. 70 实验十五 酵母 RNA 的制备和单核苷酸的离子交换柱层析分析. 76 实验十六 单核苷酸衍生物制备. 82 实验十七 胰弹性蛋白酶的制备及活力测定. 85 实验十八 超氧化物歧化酶的分离纯化. 89 实验十九 重组门冬酰胺酶Ⅱ的纯化与分析. 97
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实验一 植物基因组DNA的提取及其定性定量分析. 1 实验二 PCR扩增目的片段和胶回收. 8 实验三 目的片段和载体的连接. 15 实验四 大肠杆菌感受态细胞的制备和转化效率检测. 18 实验五 重组质粒的转化. 20 实验六 重组质粒DNA的提取及酶切鉴定. 23 实验七 RNA的提取(TRIzol法). 30 实验八 mRNA的分离与纯化. 36 实验九 RT-PCR技术. 38 实验十 用mRNA差异显示法分离特异表达的基因片段 . 40 实验十一 cDNA文库的构建. 46 实验十二 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) . 51 实验十三 Southern印迹杂交法(Southern blot). 56 实验十四 RNA分子杂交(Northern blot). 62 实验十五 固定化蛋白质的免疫生化鉴定(Western blot). 67 实验十六 RFLP技术. 71 实验十七 RAPD技术. 74 实验十八 细胞分裂中期染色体的荧光原位杂交技术(FISH). 76 附录一 常用缓冲液及其配制. 80 附录二 常用抗生素溶液. 85 附录三 常用贮存液的配制. 85 附录四 常用核酸蛋白换算数据. 93 附录五 染料在凝胶中的迁移速度. 94 附录六 实验中的一些好习惯. 95
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