《改变生活的生物技术》课程教学资源（阅读材料）利用荧光定量PCR技术进行产前诊断

遵义医科大学附属医院医学检验科：《临床分子生物学检验技术》课程教学资源（课件讲稿）实验四 PCR-荧光探针法检测亚甲基四氢叶酸还原酶基因677C/T

一、标本采集 二、实时荧光RT-PCR 方法检测新型冠状病毒核酸 三、病原生物安全实验活动要求

实验一 质粒的制备 实验二 DNA 的琼脂糖凝胶电泳 实验三 外源 DNA 片段在质粒载体中的克隆 实验四 感受态细胞的制备 实验五 质粒的转化及转化子的鉴定 实验六 PCR 技术 实验七 植物总 DNA 的快速少量抽提（ CTAB 法） 实验八 总 DNA 质量检测及酶切 实验九 电泳、转膜 实验十 RNA Extraction (mini prep) 实验十一 RT-PCR 实验 附录 试剂配方 一 细菌培养试剂 二 质粒抽提试剂 三 DNA 操作试剂 四 RNA 操作试剂

核酸的基本操作技术： 1）核酸的简介 2）基因组DNA提取 3）质粒DNA提取 4）真核细胞总RNA提取 5）琼脂糖凝胶电泳 6）核酸分子杂交 7）聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction ,PCR) 8） RT-PCR

第一节 分子杂交与印迹技术 Molecular Hybridization and Blotting Technique 第二节 PCR技术的原理与应用 The Principle and Application of PCR Technology 第三节 基因文库 Gene Library 第四节 生物芯片技术 Biological Chip Technique

1.了解某一特定组织或细胞某一特定mRNA转录量的变化,如 RT-PCR、 Northernblot等 2.了解某一特定组织或细胞全部mRNA转录量的变化,如 DD-PCR、基因芯片等。 3.获得某一特定组织或细胞全部mRNA,以便建立cDNA库等

DNA的三级结构 核酸的分离纯化及测定 DNA一级结构的分析 -测序（Sequencing） 分子杂交、PCR等技术简介 重组DNA技术的基础 Basis of Recombinant DNA Technology

学习本门课程的总体要求 1.熟悉免疫组织化学和原位PCR的技术特点及其原理 2.掌握免疫组织化学染色的操作流程 3熟悉免疫化学反应相关术语及其所用免疫试剂的来源和质量控制 4.了解多克隆抗体制备程序与操作要求 5.了解单克隆抗体制备原理和步骤

1985年PE -cetusMullis-公司的人类遗传研究室等人发 明了具有划时代意义的聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)。此技术能够特异地扩增任何所希望的目 的基因或DNA片段。在基础和临床医学、法医、考古等方 面有重要的应用价值,并对分子生物学技术的发展给予巨 大的推动