一、制备大量目的基因片段 二、重组DNA 三、宿主细胞 四、重组子的筛选 五、表达蛋白的收集，纯化

一、基因治疗的策略 The Strategy of Gene Therapy 二、基因转移技术 The Technique of Gene Transfer 三、基因干预 Gene Interference 四、治疗基因的受控表达 Regulated Expression of Therapeutic Gene 五、基因治疗的应用研究 The Application of Gene Therapy

随着生物技术的发展和不断完善,许多研究者试图通过生物技术的方法来获得雄性 不育。如 Mariani等, Koltunow等,Li等分别将白喉毒素和两个不同的核糖核酸 酶( Rnase T1和 Barnase)基因进行融合,通过含抗除草剂基因的植物双元表达载体转 化烟草,得到转基因雄性不育烟草和油菜再如 Schmulling等将农杆菌 Rhizogenes A的T-DNA间的rolc基因与CaMV35s启动子串联成嵌合基因转化烟草,结果rolc基因 在转基因植株中的系统表达,出现雄性不育植株

3.1分类 3.2细胞破碎理论 3.3细胞破碎技术 3.4物理法和化学法的比较 3.5破碎方法的选择 3.6细胞破碎的评价 3.7基因工程表达产物

6. 1 基因表达研究技术 6. 2 基因敲除技术 6. 3 蛋白质及RNA相互作用技术 6. 4 基因芯片及数据分析 6. 5 其它分子生物学技术

随着生物技术的发展和不断完善,许多研究者试图通过生物技术的方法来获得雄性 不育。如鼬riai竽,o:tw等,Li等分别将白喉毒素和两个不同的核糖核酸 酶(Ra18和rmse基因进行融合,通过含抗除草剂基因的植物双元表达载体转 化烟草,得到转基因雄性不育烟草和油菜(再如 Schuiling等将农杆:ines 的N间的rolc基因与35启动子串联成嵌合基因转化烟草

第十二章基因工程下册P580 12-1基因工程 是对携带遗传信息的分子进行设计和施工的分子工程,包括基因重组、克隆和 表达。核心是构建重组体DNA的技术

是指对遗传信息的分子操作和施工,即把 分离到的或合成的基因经过改造,插入载体 中,导入宿主细胞内,使其扩增和表达,从而获 得大量基因产物,或者令生物表现出新的性状. 基因工程（genetic engineering）或 重组DNA技术(recombinant DNA technology) 二十世纪生物科学具有划时代意义的巨大 事件,推动了生物科学的迅猛发展,并带动了生 物技术产业的兴起

1.放大某一基因片段,用于探针、基因功能检测、报道基因研究等。方法是:把某 DNA片段插入到相应的载体(比如质粒、噬菌体、哺乳类细胞表达载体等),给予扩 增,用以标记探针、测序、cDNA库建立、基因功能检测等多种分子生物学实验

1、重组DNA技术发展史上的重大事件 2、常见DNA操作技术 3、基因克隆技术 4、基因表达研究技术 5、基因芯片及数据分析 6、蛋白质组学及其研究技术