上海中医药大学：《分子生物学技术在中医药研究中的应用》教学资源（PPT实验课件）酶切电泳回收（酶切重组质粒电泳分离所插入的DNA）

教学重点、难点、学时 一、概述 (一)酶的定义 (二)分类及命名 (三)酶工程的研究内容(四)催化特性 二、酶作用原理 三、酶的生产及分离纯化 四、酶分子修饰 五、酶的固定化 六、酶反应器 七、酶的应用及发展展望

1、 酶的概念、分类，酶促反应特点。 2、 酶分子结构与功能，作用机制。 3、 酶促动力学。 4、 酶的分离、提纯及活性测定。 5、 重要的酶类。 6、 维生素与辅酶

第一节 酶的分子结构与功能 Section 1 The Molecular Structure and Function of Enzyme 第二节 酶促反应的机制 Section 2 The Characteristics and Mechanisms of Enzyme-Catalyzed Reaction 第三节 酶促反应动力学 Section 3 Kinetics of Enzyme-Catalyzed Reaction 第四节 酶的调节 Section 4 The Regulation of Enzyme 第五节 酶的分离、纯化、保存及活力测定 第六节 酶在工业上的应用及酶工程

华南理工大学：《酶工程》课程教学资源（教案讲义）第三章 酶的提取与分离纯化

第一节酶的催化性质 一、酶是生物催化剂 二、酶的化学本质 第二节酶的命名与分类 一、分类 二、系统命名及编号 三、其它命名分类法 第三节酶的作用机制 一、活化能与酶的催化作用 二、中间产物学说 三、酶的活性中心 四、诱导契合学说 五、催化机理 六、酶原和酶原激活 第四节影响酶反应速度的因素 一、底物浓度的影响 二、酶浓度对酶反应速度的影响 三、温度对酶促反应速度的影响 四、pH对酶促反应速度影响 五、抑制剂与激活剂 第五节酶的分离提纯及活力测定 一、酶的分离提纯 二、活力测定 第六节多酶体系与调节酶 一、多酶体系及其自我调节 二、调节酶

第一节 菌种选育 一 菌样采集 二 富集 三 菌种纯化和分离 四 新种性能的测试 五 高产菌株的选育 1 诱变育种 2 基因重组育种 第二节 酶的生产方式 第三节 培养基 第四节 灭菌 第五节 发酵过程的控制 第六节 酶的工业提取 第七节 酶的改造与模拟

第一章生物化学实验基本知识与操作 第一节生物化学实验基本知识 第二节 第二章分光光度技术 实验一双缩脲法测定蛋白质浓度 实验二 Folin-酚试剂法(Lowry 法)测定蛋白质浓度 实验三紫外分光光度法测定蛋白质浓度 实验四考马斯(Comessie)亮兰结合法测定蛋白质浓度 实验五BCA 法测定蛋白质浓度 实验六激素对血糖浓度的影响及血糖的测定 第三章生物大分子的提取、沉淀和离心分离技术 第一节生物材料的选取与预处理 第二节生物大分子的沉淀分离技术 第三节生物大分子离心分离技术 实验七鸡血SOD的提取、分离及活力测定 实验八碱性磷酸酶的制备及活力测定 实验九酪蛋白的制备 实验十动物肝脏中提取DNA 实验十一猪心肌细胞线粒体可溶性ATP合酶的提 第四章电泳技术 实验十二DNA 琼脂糖凝胶电泳 实验十三血浆脂蛋白琼脂糖凝胶电泳 实验十四聚丙烯酰胺凝胶电泳分离乳酸脱氢酶同工酶 实验十五蛋白质分子量的测定——SDS-聚丙烯凝胶电泳 实验十六聚丙烯酰胺等电聚焦电泳 第五章层析技术 第一节 层析技术概述 吸附层析 第三节 分配层析 第四节 离子交换层析 第五节 凝胶层析 第六节亲和层析 第七节 高效液相层析 实验十七氨基酸的纸上层析与氨基酸的转氨基作用 实验十八血清-球蛋白的分离纯化与鉴定 实验十九 亲和层析纯化胰蛋白酶 实验十二离子交换层析分离氨基酸 实验二十一蛋白质分子量测定——凝胶过滤层析法 第六章 分子生物学基本技术 核酸分子杂交 聚合酶链反应 第三节分子克隆 实验二十二Southern杂交分析 实验二十三 Northern 杂交分析 实验二十四 PCR 基因扩增 验二十五质粒DNA的提取及酶切 实验二十六 DNA重组实验 实验二十七大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 附录一常用缓冲液的配制方法 附录二易变质及需要特殊方法保存的试剂 附录三一般化学试剂的分级 附录四 English words in the lab

1.酶发酵生产的细胞必需具备如下条件 ①酶的产量高; ②产酶稳定性好; 3容易培养和管理;发酵周期短,营养需求 简单; ④产物杂质少,利于酶的分离纯化; ⑤安全可靠,非致病性

山东师范大学：《分子生物学实验》课程教学课件（PPT讲稿）实验二 质粒的酶切、琼脂糖凝胶电泳分离DNA