3.1蛋白质表达系统 3.1.1 E. coli蛋白表达系统 3.1.2哺乳动物表达系统 3.1.3昆虫表达系统 3.1.4硒代蛋白表达 3.2蛋白纯化技术 3.2.1 AKTA使用规则及使用实例 3.2.2蛋白纯化柱子的介绍及清洁方法 3.2.3透析袋的使用 3.2.4浓缩管的使用 3.2.5 TEV蛋白酶的使用 3.2.6金属螯合层析 3.2.7分子筛 3.2.8疏水作用层析 3.2.9离子交换层析 3.2.10 Protein A/G 纯化抗体 3.2.11谷胱甘肽转移酶 (GST) 亲和层析 3.2.12 Fab的蛋白表达 3.2.13植物种子蛋白的提取方案 3.2.14包涵体复性 3.2.15 SDS-PAGE凝胶电泳 3.2.16 GraphPad Prism软件的使用 3.3筛选与蛋白互作的分子 3.3.1酵母双杂交技术从文库中筛选与蛋白X结合的蛋白 3.3.2噬菌体展示 3.3.3配体指数富集的系统进化技术筛选核酸适配体 3.4检测蛋白与互作分子的互作 3.4.1酵母双杂交 Yeast two hybrid 3.4.2双分子荧光互补Bimolecular fluorescence complementation 3.4.3 Western Blotting 3.4.4免疫共沉淀Co-Immunoprecipitation 3.4.5差示扫描荧光技术Differential Scanning Fluorimetry 3.4.6荧光偏振Fluorescence polarization 3.4.7等温滴定微量热Isothermal Titration Calorimetry 3.4.8表面等离子共振技术Biacore 3.4.9蛋白质交联Crosslink 3.4.10 Native-PAGE 3.4.11静态光散射Static light scattering 3.4.12凝胶阻滞实验EMSA-electrophoretic mobility shift assay 3.5蛋白生化实验技术 3.5.1蛋白酶活性检测 3.5.2 ATP酶活检测 3.5.3解旋酶活性检测 3.5.4体外转录实验

在酶的分离纯化、性质研究以及酶制剂的生产和应用时,都要遇到对酶的活性、纯度及含量 进行经常的、大量的测定工作,这是必不可少的指标。酶活性是指酶催化一定化学反应的能力, 检查酶的含量及存在,通常是用该酶在一定条件下催化某一特定反应的速度,即酶的活性来表示

在热力学中,我们知道,纯液体在一定温度下具有一定的饱和蒸 气压,把某一纯液体当作溶剂,在其中加入溶质,由于溶液的液而部 分地被溶剂合物占据着,溶剂分子逸出液面的可能性就相就地减少, 当达到平衡时,溶剂(书上为液)的蒸汽压必然比纯溶剂的饱和蒸气 压力要小

第三节 酶的分离纯化（第六节 层析分离） 第七节 酶的分离纯化（电泳分离） 第八节萃取分离

一、针对不同的产物表达形式采取不同的策略 二、针对不同性质的重组蛋白选择不同的层析类型 三、多种分离纯化技术的联合运用 四、合适分离纯化介质的选择

第一节、实验室规则及安全防护 一、实验室规则 二、实验室安全防护 第二节、分子生物学常用研究技术 一、核酸分离纯化 二、聚合酶链反应技术 三、分子杂交技术 四、分子克隆技术 五、其它新技术 第三节、常用仪器使用 一、离心机 二、分光光度计 三、PCR 仪 第四节、如何撰写实验报告 第五节 核酸分离纯化技术 实验一、基因组 DNA 的提取制备与检测 实验二、总 RNA 的提取制备与检测 实验三、质粒 DNA 的提取制备与检测 第六节 PCR 技术 实验四、常规 PCR 技术 实验五、定量 PCR 技术 第七节 分子克隆技术 实验六、DNA 的限制性酶切与电泳 实验七、凝胶中 DNA 片断的纯化回收 实验八、DNA 连接实验 实验九、感受态细胞的制备 实验十、重组 DNA 转化与篮白斑筛选 第八节 分子杂交技术 实验十一、Southern 印迹杂交 实验十二、Northern 印迹杂交 实验十三、Western 印迹 实验十四、核酸原位杂交 第九节 综合性实验 实验十五、蛋白质双向电泳 实验十六、酵母双杂交实验 实验十七、RNA 干扰实验

2.1 国内外酶制剂工业生产及应用现状 2.2 酶的发酵技术 2.3 酶的分离纯化 2.4 酶分离、纯化的评价 2.5 酶的剂型与保存

•1掌握反映体液及酸碱平衡状况的各项指标的含义，正常值•2掌握几种脱水与钾钠紊乱及四种单纯型ABD和混合型ABD概念及英文词汇•3掌握几种脱水与钾钠紊乱及四种单纯型ABD的原因和机制，机体的代偿调节，血气检测特点，对机体的影响•4掌握ABD类型的判断方法（一划五看）与血气分析的基本原理•5了解四种单纯型ABD的防治原则，了解混合型ABD的类型及血气检测特点

• 生物医学材料的发展概况 • 生物材料的分类及性能 • 医用金属材料 • 不锈钢 • 钴（Co）基合金 • 钛（Ti）基合金 • 形状记忆合金 • 贵金属 • 纯金属钽 • 纯金属铌 • 纯金属铬 • 医用高分子材料 4.4.1 天然高分子生物材料 4.4.2 合成高分子生物材料 • 其他生物医学材料 • 生物医学材料的安全性 • 生物材料的发展趋势 • 纳米医学材料简介