基因工程制药概述 基因工程制药的基本流程 重组蛋白分离纯化技术 基因工程药物的修饰改造 基因工程在制药工业中的应用 基因工程制药的优点 基因工程菌的构建与筛选 基因工程制药基本环节 选择宿主细胞的原则 凝胶过滤 (gel filtration chromatography) 特异结合亲和性-亲和层析 纯化后蛋白的质量检测与保存 修饰与改造的主要手段 基因工程药物的质量控制与应用 成品理化性质的检定

利用插入突变的方式获得了一株衣藻不运动突变体ift81,该突变体表现出鞭毛缺失或者短鞭毛的性状.基因序列分析表明,外源基因aphⅧ插入了突变体中IFT81(intraflagellar transport,IFT)基因的第五个外显子内,并导致该外显子原有的52个碱基对被替换.把含有完整IFT81基因的重组质粒导入突变体ift81后,其鞭毛恢复为野生型且可以检测到IFT81-HA融合蛋白的表达,这证明突变体的鞭毛缺陷确实是由于IFT81基因突变所导致.电镜观察显示突变体中鞭毛的显微结构发生改变,免疫荧光实验证实IFT81蛋白主要定位于基体和鞭毛部位.上述结果表明:IFT81蛋白缺失会导致衣藻鞭毛组装缺陷,在鞭毛组装所需蛋白的运输过程中,IFT81蛋白是必不可少的

为研究环境化合物与雌激素受体的相互作用,在大肠杆菌中异源表达了人雌激素受体ERβ的配体结合区(hERβ-LBD)蛋白。在诱导剂(IPTG)浓度为0.2mmol·L-1,培养温度25℃,诱导时间为8h的优化表达条件下,经亲和色谱法纯化后,hERβ(LBD蛋白的产量可达236mg·L-1

9外源基因表达产物的分离纯化 A重组蛋白分离纯化方法选择的基本原则 B离子交换层析 C凝胶层析 D亲和层析 E膜分离 F原核生物表达的重组蛋白质量检测

• 疫苗的基本概念 • 疫苗的分类 • 减毒疫苗 • 灭活疫苗 • 类毒素疫苗 • 基因工程蛋白疫苗 第一种基因工程疫苗-乙肝疫苗 第一种肿瘤疫苗-HPV疫苗 • 结合疫苗 • 核酸疫苗

第一节 基因工程概述 第二节 基因工程的一般技术 第三节 基因工程的应用发展前景 一、基因工程的应用 （1）基因工程在农业方面的应用 （2）基因工程在工业及环境保护方面的应用 （3）基因工程在医药方面的应用 二、基因工程的发展趋势 ①各国对基因的争夺呈现白热化 ②单基因生物性抗逆向持久性抗逆的转变 ③生物性抗逆向非生物性抗逆的转变 ④目标性状的研究重点将从目前的“抗性”向“品质”转变 ⑤利用转基因植物生产稀有蛋白等产品

一、基因克隆的目的与意义 二、基因文库技术 三、功能蛋白组技术 四、图位克隆法 五、mRNA差异显示法 六、转座子、T-DNA标签法 七、同源序列法 八、功能互补法 九、基因组扣除杂交法 十、酵母双杂交系统

从烟草根际土壤中成功筛选出10株解钾细菌,并选择其中四种透明圈明显且生长量较大的菌种进行了解钾活性测定,其中解钾细菌GJ07的发酵液中K+离子质量浓度高出空白对照组54.5%.对GJ07进行16S rDNA的鉴定,确定其为巨大芽孢杆菌.采用批量发酵培养,通过改变碳源、氮源、碳氮比、温度、pH值、装液量等研究了解钾细菌GJ07生长的优化控制条件.结果表明蔗糖和蛋白胨为GJ07生长的最佳碳源和氮源（碳氮质量比为10：1）,最适宜生长温度为35℃,最适宜初始pH值为7.00,最佳装液量为25 mL

A高等哺乳动物基因工程的基本概念 B高等哺乳动物的受体系统 C高等哺乳动物的载体系统 D高等哺乳动物的基因转移 E利用哺乳动物工程细胞生产重组蛋白

1培养基的组成及配制 1.2种子培养基 培养基组成: 200ml:豆粉6g,饴糖1g,酵母膏0.2g,MSO40.4g,KH2P40.4g.放入高压灭菌锅,121℃,20min灭菌。 灭菌操作完毕,将上述物品并洗耳球转入超净台,接种前20min进行紫外空气灭菌。 1.3产酶培养基 培养基组成: