1 • 熟悉实验原理 2 • 掌握细胞传代的操作 3 • 学习细胞计数

菌种是从事微生物学及生命科学研究的基本 材料，在医学领域中，诊断制品的制备，菌苗的 生产、微生物致病性研究，药物的抑菌试验及药 品微生物检验等都有一套完整的菌种.微生物具 有生命活力，在传代过程中易发生变异甚至死亡， 因此菌种保藏是一项重要的基础工作，是微生物 学基础工作的一项重要内容，也是药品微生物工 作中的一项常用技术

1.重组质粒的鉴定。当质粒的重组或其它载体重组后,通常会发生质粒的重组失 败,包括质粒的自身环化。因而要求进行筛选,把重组成功的质粒找出来。在目前常用的 质粒和其它载体中含有相应的抗生素抗性基因,一旦重组成功,质粒环化(包括自身环 化),抗生素抗性基因表达,被转化的大肠杆菌便具备抗相应抗生素的能力,可以含该抗生 素的培养基中生长传代,不然,重组失败,大肠杆菌便不能抵抗该抗生素而死亡

本病是由BVDV引起的一种牛的急性和慢性传染病，其特征为粘膜发炎、糜烂、坏死和腹泻。 黄病毒科、瘟病毒属的成员，单股RNA，有囊膜，35-55nm。 本病毒能在牛肾、睾丸、鼻甲、气管等细胞增殖传代。 与猪瘟病毒、羊边界病毒同属、有密切抗原关系

第一章生物的类群 实验一动物界的主要类群 实验二植物的主要类群 实验三实验动物解剖基础知识 实验四家兔的解剖 实验五大白鼠的解剖 第二章细胞生物学相关实验 实验一光学显微镜的构造和使用 实验二细胞的基本形态与结构 实验三细胞器的观察 实验四细胞膜的通透性和细胞的吞噬活动 实验五细胞组分的分离和鉴定 实验六 细胞骨架的显示与观察 实验七 细胞的显微测量 实验八 细胞的有丝分裂 实验九减数分裂 实验十细胞原代培养 实验十一细胞传代培养 实验十二培养细胞的换液 实验十三细胞的保存 实验十四细胞的复苏 实验十五细胞计数 实验十六细胞生长曲线（计数法） 实验十七培养细胞的分裂指数和集落形成率的测定 实验十八培养细胞的形态观察 实验十九细胞融合 第三章染色体制备与分析 实验一大白鼠骨髓细胞染色体的制备及观察 实验二人类外周血淋巴细胞培养及染色体标本制备 实验三人类非显带染色体核型分析 实验四人类染色体G显带技术及G带核型分析 实验五人类性染色质标本的制备与观察 实验六绒毛细胞染色体标本的制备 实验七脆性X染色体标本的制备与观察 实验八羊水细胞培养及染色体制备 实验九人类外周血淋巴细胞姐妹染色单体(SCE)互换技术 实验十人类染色体C带技术 实验十一人类高分辨染色体的制备和观察 第四章分子遗传学相关实验 实验一利用TSL从全血中直接制备人类染色体DNA 实验二外周血基因组DNA的提取 实验三基因突变分析(PCR-SSCP) 实验四质粒DNA的提取 实验五DNA的限制性酶切和琼脂糖凝胶电泳 实验六DNA片段的回收与纯化 实验七大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 第五章人类遗传性状及系谱分析 实验一人类某些遗传性状的观察 实验二遗传病的系谱分析 实验三人类皮肤纹理分析 第六章分子细胞遗传学相关实验 实验一荧光原位杂交技术 第七章附录 一、培养液和常用试剂配制 二、常用缓冲液配制 三、生物学与遗传学相关学科数据库网址 四、人类染色体非显带和G带核型分析报告

实验一 光学显微镜的构造和使用 实验二 细胞的基本形态与结构 实验三 细胞器的观察 实验四 细胞膜的通透性和细胞的吞噬活动 实验五 细胞组分的分离和鉴定 实验六 细胞骨架的显示与观察 实验七 细胞的显微测量 实验八 细胞的有丝分裂 实验九 减数分裂 实验十 细胞原代培养 实验十一 细胞传代培养 实验十二 培养细胞的换液 实验十三 细胞的保存 实验十四 细胞的复苏 实验十五 细胞计数 实验十六 细胞生长曲线（计数法） 实验十七 培养细胞的分裂指数和集落形成率的测定 实验十八 培养细胞的形态观察 实验十九 细胞融合

•活细胞观察 •细胞传代培养 •细胞计数

草鱼出血病病毒GCHV-892野毒株在PSF细胞连续传代过程,于培养液中加入一 定浓度的按液,传至19代已达减毒目的。继续传至29代其减毒效果保持稳定27代后不再加入按 液,继续传至37代其减毒效果仍然保持稳定不变。致弱病毒对草鱼的安全性好免疫原性强用该 弱毒株制备的弱毒疫苗免疫草鱼后,草鱼的成活率和免疫保护率均达100%表明液是草鱼出血 病病毒的一种良好减毒剂。经按液减毒的GCHA-892是一株良好的减毒株

菌种衰退的基本原因是变异，变异是不可避免的，而减缓变异速度则是可能的。变异速度与菌种所处的环境有密切的关系，不良环境条件能促进变异，频繁或过多传代也是造成衰退变异的重要原因。为菌种创造良好条件，减缓菌种衰退，这就是菌种保藏与复壮工作

DNA是储存遗传信息的物质,亲代的遗传信息如何真实地传给子代,这个问题的实质就 是DNA分子如何复制(replication)成完全相同的两个拷贝,即DNA的合成,可见通过复 制,遗传信息得以在传代中保留。 DNA分子中的遗传信息又如何表达呢?现知基因表达的第一步是通过转录 (transcription),即DNA的碱基按互补配对(g-c,a-t,a-u)的原则转变为RNA分子上相 应的碱基序列,接着RNA通过翻译(translation),以三个碱基的序列作为一个氨基酸的遗 传密码,从而决定蛋白质的一级结构