一、实验目的 通过对细茵性、真菌性、藻类性鱼病的病变标本和病原体的观察，掌握病变症状和病原体的 形态特征，为今后诊断传染性鱼病打下基础。 二、实验用具、药品 显微镜解剖镜小镊子小剪刀解剖针凹玻片盖玻片酒精灯吸管火柴 载玻片草酸铵结晶紫液革兰氏碘液番红液95%酒精0.85%生理盐水蒸馏水 三、实验材料 1·烂鳃病、肠炎病、赤皮病、肤霉病、鳃霉病、嗜酸卵甲藻等鱼类病变标本。 2水霉、鳃霉活体或固定标本。 3,烂鳃、肠炎、赤皮等病原细菌活体或其他标本。 4。嗜酸卵甲藻标本。 四、实验内容 (一)病变标本观察 1·烂鳄病观察：肉眼观察病鱼头部颜色特别暗黑，鳃丝腐烂发白，常带有许多污泥，严 重时鳃丝尖端软骨外露，鳃盖骨内表皮充血，中间部分表皮被腐蚀成一个圆形小洞，从外表 看像透明的天窗。 2·肠炎病变观察：病鱼头部黑，肛门红肿，严重时用手轻压病鱼腹部就有血黄色粘液从 肛门流出。解剖观察全肠呈紫红色，肠壁形成血浓或乳黄色的粘液。 3·赤皮病的观察（又称出血性腐败病和赤皮遮）：主要病变是病鱼体表局部或大部出血 发炎，鳞片脱落，特别在鱼体腹部两侧，更为明显，基部充血及鳍条腐烂
一、实验目的 通过对细菌性、真菌性、藻类性鱼病的病变标本和病原体的观察，掌握病变症状和病原体的 形态特征，为今后诊断传染性鱼病打下基础。 二、实验用具、药品 显微镜 解剖镜 小镊子 小剪刀 解剖针 凹玻片 盖玻片 酒精灯 吸管 火柴 载玻片 草酸铵结晶紫液 革兰氏碘液 番红液 95 ％酒精 0 . 85 ％生理盐水 蒸馏水 三、实验材料 1 ．烂鳃病、肠炎病、赤皮病、肤霉病、鳃霉病、嗜酸卵甲藻等鱼类病变标本。 2 ．水霉、鳃霉活体或固定标本。 3 ．烂鳃、肠炎、赤皮等病原细菌活体或其他标本。 4 ．嗜酸卵甲藻标本。 四、实验内容 （一）病变标本观察： 1 ．烂鳃病观察： 肉眼观察病鱼头部颜色特别暗黑，鳃丝腐烂发白，常带有许多污泥，严 重时鳃丝尖端软骨外露，鳃盖骨内表皮充血，中间部分表皮被腐蚀成一个圆形小洞，从外表 看像透明的天窗。 2 ．肠炎病变观察： 病鱼头部黑，肛门红肿，严重时用手轻压病鱼腹部就有血黄色粘液从 肛门流出。解剖观察全肠呈紫红色，肠壁形成血浓或乳黄色的粘液。 3 ．赤皮病的观察（又称出血性腐败病和赤皮瘟）： 主要病变是病鱼体表局部或大部出血 发炎，鳞片脱落，特别在鱼体腹部两侧，更为明显，鳍基部充血及鳍条腐烂
4·.肤毒病：引起这种病的病原体常见的有绵霉属(Achlya)和水霉属(Saprolegnia)。 水霉主要寄生在鱼的表皮，其菌丝是细长的丝状体，繁殖多了，呈灰白色的棉花状，又称为 “生毛病”。肉眼容易辨别出来 5鳃病：病变主要特点是病原体侵入鰓丝，鳃微血管被堵塞，鰓失去正常的鲜红色而 呈苍白成粉红色，但由于鳃霉肉眼不易观察到，特别是菌丝体在鳃组织内寄生的情形，须用 显微镜检查。 6,嗜酸卵甲藻病变标本和病原体的观察卵甲藻病（又称打粉病）：病原体嗜酸卵甲藻 (0 odiniumacidophilum）。寄生的成熟个体呈肾脏状，中部有明显凹陷，体内充满碎末 淀粉粒，淡绿色的质体和色素体。中央有一个大而圆的细胞核，随着卵甲藻的生长和发有， 寄生增生的粘液细胞就愈多愈厚，严重感染病鱼，肉眼看时，就好像涂了一层高低不平的朱 粉样子，故有打粉病之称。 (二)病原体的观察： 1.烂鳃病的病原体柱状屈桡杆菌（Flexibacter colnmnaris):赤皮病的病原体荧光 毛杆菌(Pseudomonas f1 uorescens),，用载玻片和凹玻片进行高倍镜或油镜观察细菌活 体的运动、繁殖方法。 2·固定染色观察：细菌可用镜检做活体检查，但由于体内很小，胞质透明，细胞结构不 易辨别，用革兰氏染色，根据对染料的不同反应，可区别细茵为两大类，即革兰氏染色阴性 或阳性。 在干净的载玻片上滴上一滴蒸馏水，用无菌操作挑取少量的菌种，在玻片上与蒸馏水混合均 匀并涂成薄层，自然凉干或通过火焰二、三次，用结晶紫染色1分钟，水洗、碘液媒染1分 钟，水洗，然后用95%酒精脱色，立即水洗，再用番红进行复染0.5一1分钟，水洗、 凉干、进行镜检。 在高倍镜或油镜下可见赤皮和肠炎病原体都是短小的杆菌，单个或两个相连，因为都是革兰 氏染色阴性细菌，染色后均呈红色，烂鳃的病原是粘细菌，经染色也呈红色，但菌体呈细长 杆状，较前两种为长
4 ．肤霉病： 引起这种病的病原体常见的有绵霉属 (Achlya) 和水霉属 (Saprolegnia) 。 水霉主要寄生在鱼的表皮，其菌丝是细长的丝状体，繁殖多了，呈灰白色的棉花状，又称为 “生毛病”。肉眼容易辨别出来。 5 ．鳃霉病： 病变主要特点是病原体侵入鳃丝，鳃微血管被堵塞，鳃失去正常的鲜红色而 呈苍白成粉红色，但由于鳃霉肉眼不易观察到，特别是菌丝体在鳃组织内寄生的情形，须用 显微镜检查。 6 ．嗜酸卵甲藻病变标本和病原体的观察卵甲藻病（又称打粉病）： 病原体嗜酸卵甲藻 （ Oodinium acidophilum ）。寄生的成熟个体呈肾脏状，中部有明显凹陷，体内充满碎末 淀粉粒，淡绿色的质体和色素体。中央有一个大而圆的细胞核，随着卵甲藻的生长和发育， 寄生增生的粘液细胞就愈多愈厚，严重感染病鱼，肉眼看时，就好像涂了一层高低不平的朱 粉样子，故有打粉病之称。 （二）病原体的观察： 1 ．烂鳃病的病原体柱状屈桡杆菌（ Flexibacter colnmnaris ）： 赤皮病的病原体荧光 毛杆菌（ Pseudomonas fluorescens ），用载玻片和凹玻片进行高倍镜或油镜观察细菌活 体的运动、繁殖方法。 2 ．固定染色观察： 细菌可用镜检做活体检查，但由于体内很小，胞质透明，细胞结构不 易辨别，用革兰氏染色，根据对染料的不同反应，可区别细菌为两大类，即革兰氏染色阴性 或阳性。 在干净的载玻片上滴上一滴蒸馏水，用无菌操作挑取少量的菌种，在玻片上与蒸馏水混合均 匀并涂成薄层，自然凉干或通过火焰二、三次，用结晶紫染色 1 分钟，水洗、碘液媒染 1 分 钟，水洗，然后用 95 ％酒精脱色，立即水洗，再用番红进行复染 0.5 ～ 1 分钟，水洗、 凉干、进行镜检。 在高倍镜或油镜下可见赤皮和肠炎病原体都是短小的杆菌，单个或两个相连，因为都是革兰 氏染色阴性细菌，染色后均呈红色，烂鳃的病原是粘细菌，经染色也呈红色，但菌体呈细长 杆状，较前两种为长
3·观察肤霉和鳃霉：肤霉肉眼可辨出来，再用低倍显微镜观察可清晰看到肤霉菌丝体构 造，并常看到幼孢子来。 观察鳃霉，一方面观察鳃霉寄生鳃片表面部分情况，另一方面观察鳃的切片，可看到象蚯蚓 一般在鳃丝表面或鳃轴软骨中穿来穿去，经过的地方，组织受破坏，微血管堵塞。 五、作业 1,烂鳃、肠炎、赤皮病病变得主要特征和病原体特征，请绘图。 2,鳃霉与水霉病变及菌丝体有哪些区别？请绘图并注明结构
3 ．观察肤霉和鳃霉： 肤霉肉眼可辨出来，再用低倍显微镜观察可清晰看到肤霉菌丝体构 造，并常看到幼孢子来。 观察鳃霉，一方面观察鳃霉寄生鳃片表面部分情况，另一方面观察鳃的切片，可看到象蚯蚓 一般在鳃丝表面或鳃轴软骨中穿来穿去，经过的地方，组织受破坏，微血管堵塞。 五、作业 1 ．烂鳃、肠炎、赤皮病病变得主要特征和病原体特征，请绘图。 2 ．鳃霉与水霉病变及菌丝体有哪些区别？请绘图并注明结构