一、实验目的 通过对细茵性、真菌性、藻类性鱼病的病变标本和病原体的观察,掌握病变症状和病原体的 形态特征,为今后诊断传染性鱼病打下基础。 二、实验用具、药品 显微镜解剖镜小镊子小剪刀解剖针凹玻片盖玻片酒精灯吸管火柴 载玻片草酸铵结晶紫液革兰氏碘液番红液95%酒精0.85%生理盐水蒸馏水 三、实验材料 1·烂鳃病、肠炎病、赤皮病、肤霉病、鳃霉病、嗜酸卵甲藻等鱼类病变标本。 2水霉、鳃霉活体或固定标本。 3,烂鳃、肠炎、赤皮等病原细菌活体或其他标本。 4。嗜酸卵甲藻标本。 四、实验内容 (一)病变标本观察 1·烂鳄病观察:肉眼观察病鱼头部颜色特别暗黑,鳃丝腐烂发白,常带有许多污泥,严 重时鳃丝尖端软骨外露,鳃盖骨内表皮充血,中间部分表皮被腐蚀成一个圆形小洞,从外表 看像透明的天窗。 2·肠炎病变观察:病鱼头部黑,肛门红肿,严重时用手轻压病鱼腹部就有血黄色粘液从 肛门流出。解剖观察全肠呈紫红色,肠壁形成血浓或乳黄色的粘液。 3·赤皮病的观察(又称出血性腐败病和赤皮遮):主要病变是病鱼体表局部或大部出血 发炎,鳞片脱落,特别在鱼体腹部两侧,更为明显,基部充血及鳍条腐烂
一、实验目的 通过对细菌性、真菌性、藻类性鱼病的病变标本和病原体的观察,掌握病变症状和病原体的 形态特征,为今后诊断传染性鱼病打下基础。 二、实验用具、药品 显微镜 解剖镜 小镊子 小剪刀 解剖针 凹玻片 盖玻片 酒精灯 吸管 火柴 载玻片 草酸铵结晶紫液 革兰氏碘液 番红液 95 %酒精 0 . 85 %生理盐水 蒸馏水 三、实验材料 1 .烂鳃病、肠炎病、赤皮病、肤霉病、鳃霉病、嗜酸卵甲藻等鱼类病变标本。 2 .水霉、鳃霉活体或固定标本。 3 .烂鳃、肠炎、赤皮等病原细菌活体或其他标本。 4 .嗜酸卵甲藻标本。 四、实验内容 (一)病变标本观察: 1 .烂鳃病观察: 肉眼观察病鱼头部颜色特别暗黑,鳃丝腐烂发白,常带有许多污泥,严 重时鳃丝尖端软骨外露,鳃盖骨内表皮充血,中间部分表皮被腐蚀成一个圆形小洞,从外表 看像透明的天窗。 2 .肠炎病变观察: 病鱼头部黑,肛门红肿,严重时用手轻压病鱼腹部就有血黄色粘液从 肛门流出。解剖观察全肠呈紫红色,肠壁形成血浓或乳黄色的粘液。 3 .赤皮病的观察(又称出血性腐败病和赤皮瘟): 主要病变是病鱼体表局部或大部出血 发炎,鳞片脱落,特别在鱼体腹部两侧,更为明显,鳍基部充血及鳍条腐烂
4·.肤毒病:引起这种病的病原体常见的有绵霉属(Achlya)和水霉属(Saprolegnia)。 水霉主要寄生在鱼的表皮,其菌丝是细长的丝状体,繁殖多了,呈灰白色的棉花状,又称为 “生毛病”。肉眼容易辨别出来 5鳃病:病变主要特点是病原体侵入鰓丝,鳃微血管被堵塞,鰓失去正常的鲜红色而 呈苍白成粉红色,但由于鳃霉肉眼不易观察到,特别是菌丝体在鳃组织内寄生的情形,须用 显微镜检查。 6,嗜酸卵甲藻病变标本和病原体的观察卵甲藻病(又称打粉病):病原体嗜酸卵甲藻 (0 odiniumacidophilum)。寄生的成熟个体呈肾脏状,中部有明显凹陷,体内充满碎末 淀粉粒,淡绿色的质体和色素体。中央有一个大而圆的细胞核,随着卵甲藻的生长和发有, 寄生增生的粘液细胞就愈多愈厚,严重感染病鱼,肉眼看时,就好像涂了一层高低不平的朱 粉样子,故有打粉病之称。 (二)病原体的观察: 1.烂鳃病的病原体柱状屈桡杆菌(Flexibacter colnmnaris):赤皮病的病原体荧光 毛杆菌(Pseudomonas f1 uorescens),,用载玻片和凹玻片进行高倍镜或油镜观察细菌活 体的运动、繁殖方法。 2·固定染色观察:细菌可用镜检做活体检查,但由于体内很小,胞质透明,细胞结构不 易辨别,用革兰氏染色,根据对染料的不同反应,可区别细茵为两大类,即革兰氏染色阴性 或阳性。 在干净的载玻片上滴上一滴蒸馏水,用无菌操作挑取少量的菌种,在玻片上与蒸馏水混合均 匀并涂成薄层,自然凉干或通过火焰二、三次,用结晶紫染色1分钟,水洗、碘液媒染1分 钟,水洗,然后用95%酒精脱色,立即水洗,再用番红进行复染0.5一1分钟,水洗、 凉干、进行镜检。 在高倍镜或油镜下可见赤皮和肠炎病原体都是短小的杆菌,单个或两个相连,因为都是革兰 氏染色阴性细菌,染色后均呈红色,烂鳃的病原是粘细菌,经染色也呈红色,但菌体呈细长 杆状,较前两种为长
4 .肤霉病: 引起这种病的病原体常见的有绵霉属 (Achlya) 和水霉属 (Saprolegnia) 。 水霉主要寄生在鱼的表皮,其菌丝是细长的丝状体,繁殖多了,呈灰白色的棉花状,又称为 “生毛病”。肉眼容易辨别出来。 5 .鳃霉病: 病变主要特点是病原体侵入鳃丝,鳃微血管被堵塞,鳃失去正常的鲜红色而 呈苍白成粉红色,但由于鳃霉肉眼不易观察到,特别是菌丝体在鳃组织内寄生的情形,须用 显微镜检查。 6 .嗜酸卵甲藻病变标本和病原体的观察卵甲藻病(又称打粉病): 病原体嗜酸卵甲藻 ( Oodinium acidophilum )。寄生的成熟个体呈肾脏状,中部有明显凹陷,体内充满碎末 淀粉粒,淡绿色的质体和色素体。中央有一个大而圆的细胞核,随着卵甲藻的生长和发育, 寄生增生的粘液细胞就愈多愈厚,严重感染病鱼,肉眼看时,就好像涂了一层高低不平的朱 粉样子,故有打粉病之称。 (二)病原体的观察: 1 .烂鳃病的病原体柱状屈桡杆菌( Flexibacter colnmnaris ): 赤皮病的病原体荧光 毛杆菌( Pseudomonas fluorescens ),用载玻片和凹玻片进行高倍镜或油镜观察细菌活 体的运动、繁殖方法。 2 .固定染色观察: 细菌可用镜检做活体检查,但由于体内很小,胞质透明,细胞结构不 易辨别,用革兰氏染色,根据对染料的不同反应,可区别细菌为两大类,即革兰氏染色阴性 或阳性。 在干净的载玻片上滴上一滴蒸馏水,用无菌操作挑取少量的菌种,在玻片上与蒸馏水混合均 匀并涂成薄层,自然凉干或通过火焰二、三次,用结晶紫染色 1 分钟,水洗、碘液媒染 1 分 钟,水洗,然后用 95 %酒精脱色,立即水洗,再用番红进行复染 0.5 ~ 1 分钟,水洗、 凉干、进行镜检。 在高倍镜或油镜下可见赤皮和肠炎病原体都是短小的杆菌,单个或两个相连,因为都是革兰 氏染色阴性细菌,染色后均呈红色,烂鳃的病原是粘细菌,经染色也呈红色,但菌体呈细长 杆状,较前两种为长
3·观察肤霉和鳃霉:肤霉肉眼可辨出来,再用低倍显微镜观察可清晰看到肤霉菌丝体构 造,并常看到幼孢子来。 观察鳃霉,一方面观察鳃霉寄生鳃片表面部分情况,另一方面观察鳃的切片,可看到象蚯蚓 一般在鳃丝表面或鳃轴软骨中穿来穿去,经过的地方,组织受破坏,微血管堵塞。 五、作业 1,烂鳃、肠炎、赤皮病病变得主要特征和病原体特征,请绘图。 2,鳃霉与水霉病变及菌丝体有哪些区别?请绘图并注明结构
3 .观察肤霉和鳃霉: 肤霉肉眼可辨出来,再用低倍显微镜观察可清晰看到肤霉菌丝体构 造,并常看到幼孢子来。 观察鳃霉,一方面观察鳃霉寄生鳃片表面部分情况,另一方面观察鳃的切片,可看到象蚯蚓 一般在鳃丝表面或鳃轴软骨中穿来穿去,经过的地方,组织受破坏,微血管堵塞。 五、作业 1 .烂鳃、肠炎、赤皮病病变得主要特征和病原体特征,请绘图。 2 .鳃霉与水霉病变及菌丝体有哪些区别?请绘图并注明结构