兽医临床诊断学一第20章现代分子诊断技术动物科技学院刘贤侠
—第20章现代分子诊断技术 兽医临床诊断学 动物科技学院 刘贤侠
主要内容第一节：概述第二节：核酸分子杂交检测技术第三节：PCR诊断技术第四节：生物芯片诊断技术第五节：蛋白组织学诊断技术
主要内容 第一节:概述 第二节:核酸分子杂交检测技术 第三节:PCR诊断技术 第四节:生物芯片诊断技术 第五节:蛋白组织学诊断技术
传统疾病的诊断主要以病史、症状、体征和各种辅助检查（血液学、病理学、免疫学等或者说是以细胞形态结构变化、生化代谢产物异常，特定蛋白质分子识别异常等疾病的表型改变为依据来判断疾病的。分子诊断主要涵盖用于DNA检测的基因诊断以及针对RNA、蛋白质分子以及基因组和蛋白质组的各种检测手段
传统疾病的诊断 主要以病史、症状、体征和各种辅助检查（血液学、 病理学、免疫学等）或者说是以细胞形态结构变化、生化 代谢产物异常，特定蛋白质分子识别异常等疾病的表型改 变为依据来判断疾病的。 分子诊断 主要涵盖用于DNA检测的基因诊断以及针对RNA、蛋 白质分子以及基因组和蛋白质组的各种检测手段
第一节概述一概念分子诊断是以DNA、RNA或蛋白质分子为诊断材料，通过检查动物体内源基因或外源基因的存在或缺陷或表达异常，对机体状态或疾病做出特异性诊断的方法和过程
第一节 概述 一 概念 分子诊断是以DNA、RNA或蛋白质分子为诊断材料,通过 检查动物体内源基因或外源基因的存在或缺陷或表达异常, 对机体状态或疾病做出特异性诊断的方法和过程
分子诊断学背景描述性诊断细胞学检查生化指标分析免疫学诊断分子诊断病因学诊断
分子诊断学背景 描述性诊断 细胞学检查 生化指标分析 免疫学诊断 病因学诊断 分子诊断
分子诊断学发展历史：（1）：利用DNA分子杂交技术进行遗传病的基因诊断（2）：以1985年创建的OCR技术为基础的DNA诊断（3）：以生物芯片技术为代表的高通量密集型检测技术
分子诊断学发展历史: (1):利用DNA分子杂交技术进行遗传病的基因诊断 (2):以1985年创建的OCR技术为基础的DNA诊断 (3):以生物芯片技术为代表的高通量密集型检测技术
二分子诊断的基本技术分子诊断基础：是分析组织细胞毛发抗凝血或干血迹，甚至甲醛固定石蜡包埋的组织者的基因及其表达产物诊断技术：分子杂交检测，PCR技术检测，生物芯片为代表的基因组织学检测，双向电泳和质谱为代表的蛋白组织学检测
二 分子诊断的基本技术 分子诊断基础:是分析组织细胞毛发抗凝血或干血迹,甚 至甲醛固定石蜡包埋的组织者的基因及其表达产物. 诊断技术:分子杂交检测,PCR技术检测,生物芯片为代表 的基因组织学检测,双向电泳和质谱为代表的蛋白组织学 检测
三分子诊断学的临床应用（1）感染性疾病的分子诊断（2）遗传性疾病的分子诊断（3）肿瘤的分子诊断（4）其他耐药性的分子诊断、疗效监控、卫生防疫等方面
三 分子诊断学的临床应用 (1)感染性疾病的分子诊断 (2)遗传性疾病的分子诊断 (3)肿瘤的分子诊断 (4)其他 耐药性的分子诊断、疗效监控、卫生防疫等方 面
第二节：核酸分子杂交检测技术分子杂交：不同来源的核酸单链之间或蛋白质亚基之间由于机构互补而发生的非共价键的集合核酸分子杂交：待测单链核酸与已知单链核酸通过碱基对之问的非共价键结合，从而形成稳定的可检测出的双螺旋片段
第二节:核酸分子杂交检测技术 分子杂交: 不同来源的核酸单链之间或蛋白质亚基之间由于 机构互补而发生的非共价键的集合 核酸分子杂交: 待测单链核酸与已知单链核酸通过碱基对之 间的非共价键结合,从而形成稳定的可检测出的双螺旋片段
（一）核酸分子杂交原理：制备待测核酸样本制备核酸探针分离、变性、转移、固化DNA片段标记核酸探针预杂交加人标记核酸探针杂交漂洗去除未参与杂交的标记探针检测杂交信号图20-1核酸分子杂交基本过程
（一）核酸分子杂交原理：